【原創(chuàng)】豬唾液用于疾病診斷的實(shí)用指南

2016-8-12 11:24| 發(fā)布者: 畜牧編輯| 查看: 1618| 評論: 0|原作者: 畜牧編輯

　　一、唾液用于疾病診斷的常用方法

　　1、疾病監(jiān)控

　　預(yù)后分析及唾液可用于動(dòng)物疾病信號的監(jiān)控，及評估豬群內(nèi)的流行病原。預(yù)后分析并不是一種診斷程序，因此唾液也不能用作排除感染的依據(jù)。

　　2、檢測抗體

　　唾液樣品可用于檢測PRRSV抗體，血清學(xué)檢查不適合用于普遍存在的病原，如PCV2。

　　3、檢測病原RNA/DNA

　　唾液樣品還可用于檢測造成肺炎的病原，如豬肺炎支原體、PRRSV、SIV等，但這些病原在唾液中的存在并不一定與疾病相關(guān)。

　　二、動(dòng)物選擇

　　1、感染者：選擇已表現(xiàn)出感染信號的動(dòng)物

　　2、無癥狀者：隨機(jī)選擇無癥狀的動(dòng)物

　　3、跟蹤感染時(shí)間：同一動(dòng)物進(jìn)行兩次取樣，兩次間隔2-4周

　　4、檢查感染狀況：對不同年齡群的動(dòng)物分別取樣（如4、8、12、16、20、24周齡）

　　三、取樣數(shù)量

　　由于缺乏對唾液樣品的診斷靈敏度的相關(guān)數(shù)據(jù)，最適樣品大小目前還沒有最終確定。樣品數(shù)量取決于觀察的單位，不能超過欄水平。

　　下表1列出了不同發(fā)病率情況下的唾液取樣數(shù)，實(shí)際取樣數(shù)應(yīng)等于或高于表中的數(shù)值。

　　四、取樣前準(zhǔn)備工作

　　準(zhǔn)備一條新的、干凈的、原色棉繩，直徑適合于豬場的大小和年齡。如斷奶仔豬為1cm，生長育肥豬可為2cm。禁止使用合成纖維繩，因?yàn)樗鼈兊奈胀僖旱哪芰Σ患懊蘩K。

　　繩子的長度取決于具體的固定的位置，如固定在天花板，則需要較長；如固定在欄壁，則長度較短。

　　一條繩子足夠適用于10-15頭取樣豬。但是，如果欄舍內(nèi)飼養(yǎng)豬只增加，則需增加取樣繩的數(shù)量。

　　每欄使用一條新的棉繩。

　　準(zhǔn)備一些滅菌的試管（5-12mL）用于儲(chǔ)存收集到的唾液樣品，確保試驗(yàn)無菌。

　　取樣最好在豬只進(jìn)食前或后的2小時(shí)執(zhí)行，這樣可提高豬只對取樣繩的興趣，提高取樣效率。

　　五、取樣技術(shù)

　　1、固定取樣繩。在欄舍內(nèi)選擇一個(gè)位置固定取樣繩，要保證欄內(nèi)所有豬均可接觸到取

　　樣繩。固定位置應(yīng)干凈，遠(yuǎn)離飲水和進(jìn)食區(qū)。取樣繩的低端應(yīng)與豬站立時(shí)嘴的高度相平。如果同欄內(nèi)分配多個(gè)取樣繩，它們的位置應(yīng)盡可能的分開。

　　2、取樣繩放置時(shí)間為30min。如果發(fā)現(xiàn)試驗(yàn)豬對取樣繩不夠活躍，可延長至1小時(shí)。

　　3、小心取下取樣繩，注意不要接觸到地面。將取樣繩內(nèi)的唾液擠至一個(gè)干凈的塑料袋或容器內(nèi)。

　　4、將上述塑料袋剪開一個(gè)小口，將里面的唾液轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的無菌試管內(nèi)。每個(gè)樣品至少需要2ml。

　　5、收集后，如果發(fā)現(xiàn)試管內(nèi)有明顯的雜質(zhì)，如飼料等，則需用離心機(jī)對樣品進(jìn)行純化。離心速度為2000x g，10分鐘。

　　6、在試管上標(biāo)明取樣欄舍、取樣豬場、取樣日期。

　　六、樣品保存

　　在將樣品送往試驗(yàn)室前，可暫時(shí)先將樣品儲(chǔ)存于冰箱內(nèi)，但必需在1天送往試驗(yàn)室分析。如果不能，則應(yīng)該將樣品保存于–20至–80°C冷庫。

　　七、送檢

　　在送檢前應(yīng)確保你所選的試驗(yàn)室具備唾液分析的能力。常規(guī)血液、組織的分析方法并不適用于唾液。另還需附上相關(guān)的信息，如獸醫(yī)姓名、豬場名稱、發(fā)票信息、所取樣品的動(dòng)物種類和年齡、取樣日期、取樣數(shù)、樣品類型、檢測項(xiàng)目等。

譯者：戶啟蔚
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