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畜牧人

標(biāo)題: 求助：豆粕中真蛋白的測(cè)定 [打印本頁(yè)]

作者: jku002 時(shí)間: 2007-12-21 08:51
標(biāo)題: 求助：豆粕中真蛋白的測(cè)定
請(qǐng)問(wèn)大家一下：豆粕中真蛋白的測(cè)定方法？還有一般豆粕中真蛋白的含量是多少？

作者: yxy0725 時(shí)間: 2007-12-21 11:25
1、原理
   硫酸銅在堿性溶液中，可將蛋白質(zhì)沉淀，且不溶于熱水過(guò)濾和洗滌后，可將純蛋白質(zhì)和非蛋白質(zhì)含蛋物分離，再用凱氏定蛋法測(cè)定沉淀中的蛋白質(zhì)含量。
2、儀器設(shè)備
   （1）燒杯：200ml。
   （2）定性濾紙。
   （3）其他設(shè)備與粗蛋白質(zhì)測(cè)定法的相同。
3、試劑及配制
   （1）100g/L硫酸銅溶液：分析純硫酸銅（CuSO4•5H2O）10g溶于100mL蒸餾水中。
   （2）25g/L氫氧化鈉溶液：將2.5g分析純氫氧化鈉溶于100mL蒸餾水中。
         （3）10g/L氯化鋇溶液：1g氯化鋇（BaCl•H2O）溶于100mL蒸餾水中。
         （4）2moL/鹽酸溶液。
         （5）其他試劑預(yù)一般粗蛋白測(cè)定法的相同。
4、測(cè)定步驟
            準(zhǔn)確稱取試樣1g左右（精確到0.0001g），置于200mL燒杯中，加50mL蒸餾水，加熱至沸，加入20mL硫酸銅溶液，20mL氫氧化鈉溶液（加入以上兩種溶液多要緩慢，且要邊加入邊攪拌），用玻璃棒充分?jǐn)嚢?，放?h以上，用傾斜過(guò)濾（用定型濾紙），然活后用60~80℃熱蒸餾水洗滌沉淀5~6次，用氯化鋇溶液5滴和鹽酸溶液1滴檢查濾液，直至不生成白色沉淀為止。將沉淀和濾紙放在65℃烘箱干燥2h，然后全部轉(zhuǎn)移到凱氏燒瓶中，消化后進(jìn)行定蛋測(cè)定。
5、結(jié)果計(jì)算
   同粗蛋白測(cè)定。

作者: yxy0725 時(shí)間: 2007-12-21 11:27
方法二：
將樣品充分混勻后分成兩份，準(zhǔn)確稱取。一份用于常規(guī)凱氏定氮法測(cè)定其粗蛋白質(zhì)含量，將另一份加五倍（50ml）的三氯乙酸溶液（10%的水溶液）攪動(dòng)，靜置10min后全部轉(zhuǎn)移到漏斗中過(guò)濾，再用五倍（50ml）三氯乙酸溶液洗滌濾渣兩遍，于105℃烘干按常規(guī)測(cè)定。

作者: 馬前足 時(shí)間: 2007-12-21 11:51
豆粕造假的也很多，應(yīng)該加細(xì)檢驗(yàn)．

作者: 激光打印機(jī) 時(shí)間: 2007-12-21 23:58
做真蛋白一般是為了防止摻假

如果加入蛋白精之類(lèi)的做真蛋白有用嗎?

作者: jku002 時(shí)間: 2007-12-27 15:03
測(cè)真蛋白，消化時(shí)好多泡沫都粘在消化管上，怎么辦阿

作者: jku002 時(shí)間: 2008-1-2 08:36
怎么沒(méi)人回答呢，自己頂一下，也祝大家新年快樂(lè)

作者: yxy0725 時(shí)間: 2008-1-4 11:08
以前遇到過(guò)油脂高的樣品泡沫多的情況,不知道你的是不是這個(gè)原因
不知道可不可以加消泡劑,沒(méi)找到過(guò)這方面的東西~

作者: 綠緣 時(shí)間: 2008-1-4 11:31
我測(cè)豆粕的真蛋白的時(shí)候沒(méi)有泡沫啊，如果沾在瓶壁上的話可以在消化塊好的時(shí)候關(guān)了火冷卻了之后加水沖下去，然后再消化個(gè)把小時(shí)就好了。

作者: 綠緣 時(shí)間: 2008-1-4 11:32
泡泡也有可能使濾紙包導(dǎo)致的，剛加熱的時(shí)候火開(kāi)小點(diǎn)。

作者: demom0502 時(shí)間: 2008-1-4 12:17
我們一般都測(cè)一下KOH溶解度來(lái)鑒別摻假

作者: trssjc 時(shí)間: 2008-1-4 12:58
同時(shí)測(cè)測(cè)氨基酸含量進(jìn)行綜合評(píng)定．

作者: dy3166 時(shí)間: 2008-1-4 20:41
真蛋白硝化時(shí)出現(xiàn)起泡是因?yàn)闆](méi)有將濾紙和樣品烘干，水分太高降低硫酸濃度引起的；如出現(xiàn)這種情況可取出稍冷后將用硫酸其沖下即可。

作者: jku002 時(shí)間: 2008-1-9 09:13
謝謝大家的幫忙，我又重新做了一下，把濾紙和樣品哄的很干，所以沒(méi)泡沫了，呵呵，不過(guò)還有個(gè)問(wèn)題請(qǐng)教大家，我測(cè)的發(fā)酵豆粕的真蛋白比粗蛋白低3-4個(gè)點(diǎn)，這算正常嗎？

作者: xlm1985ok 時(shí)間: 2008-9-21 11:35
方法說(shuō)略潮，BaCl2溶液滴加在濾紙上檢測(cè)硫酸根離子嗎

作者: xlm1985ok 時(shí)間: 2008-9-21 11:39
檢測(cè)硫酸根離子時(shí)加一滴鹽酸是保持在酸性環(huán)境嗎

作者: xlm1985ok 時(shí)間: 2008-11-2 20:48
我烘了一夜第二天消化時(shí)氣泡還是很多，請(qǐng)大家把側(cè)粗蛋白的方法上傳一下，可能溫度和試劑量還有不同吧，共同學(xué)習(xí)一下吧

作者: litonggang 時(shí)間: 2008-12-23 10:19
標(biāo)題: 回復(fù) 17樓 xlm1985ok 的帖子
l老兄，您好！能告訴我豆粕蛋白質(zhì)溶解度的測(cè)定方法嗎，謝謝！我郵箱是litonggang111@163.com

作者: 風(fēng)落沙情 時(shí)間: 2008-12-27 21:25
測(cè)KOH溶解度鑒別不了摻假吧，那只是用來(lái)作豆粕的加工是否過(guò)生或過(guò)熟的指標(biāo)。

作者: 風(fēng)落沙情 時(shí)間: 2008-12-27 21:27
真蛋白比粗蛋白低3-4個(gè)點(diǎn)有點(diǎn)不太正常，我測(cè)的真蛋白一般都以比粗蛋白低一個(gè)點(diǎn)左右，相差最大的一次也不到兩個(gè)點(diǎn)。

作者: yhhxj888 時(shí)間: 2009-8-11 11:23
20# 風(fēng)落沙情

[ts]yhhxj888 于 2009-8-11 11:25 補(bǔ)充以下內(nèi)容[/ts]

烘干后消化前不要加催化劑先消化1個(gè)小時(shí)，再冷卻后加催化劑消化就不會(huì)有泡了。。希對(duì)你有助。

作者: jiangchangde 時(shí)間: 2010-5-2 09:29
回復(fù) 14# jku002
發(fā)酵豆粕中的真蛋白不包括氨基酸吧，應(yīng)該水解的了一部分，是正常的吧！

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