畜牧人

標(biāo)題: 溶菌酶產(chǎn)品對某水產(chǎn)養(yǎng)殖廠水樣抑菌效果分析 [打印本頁]

作者: wangxulai 時間: 2008-2-11 18:52
標(biāo)題: 溶菌酶產(chǎn)品對某水產(chǎn)養(yǎng)殖廠水樣抑菌效果分析
溶菌酶產(chǎn)品對某水產(chǎn)養(yǎng)殖廠水樣抑菌效果分析

試驗材料
分析水樣：采集于杭州市余杭區(qū)某中華鱉養(yǎng)殖基地，共采集8個養(yǎng)殖池塘混合后為一個樣品。
溶菌酶產(chǎn)品：杭州公司生產(chǎn)提供
培養(yǎng)基：LB液體與LB固體培養(yǎng)基 pH 7.0
試驗方法
1 配制溶菌酶試驗液精確稱量溶菌酶4mg溶解于1ml pH 6.2的磷酸鹽緩沖液中，得4mg/ml的溶菌酶試驗液；
2 將滅菌后的LB液體培養(yǎng)基分裝至4只150ml錐形瓶中，每瓶25ml培養(yǎng)基，分別加入1.25ml，0.625ml，0.3125ml和0ml的4mg/ml的溶菌酶溶液，標(biāo)注A，B，C和D。
3 將采集到的水樣經(jīng)濾紙過濾出去殘留的泥沙和其他固體物質(zhì)，濾液收集于50ml滅菌過的離心管中，按1%的比例分別接種至以上4只錐形瓶中，置37℃，200rpm恒溫搖床中過夜培養(yǎng)16~18h；
4 從搖床中將以上各組培養(yǎng)液取出，各取3ml在紫外可見分光光度計下測定OD600。
5 將以上各組培養(yǎng)液取50ul涂布LB固體培養(yǎng)基平板（96mm）統(tǒng)計菌落數(shù)量。
試驗結(jié)果
1各組吸光度如下：
A（0.2mg/ml）組：OD600=0.000       B（0.1mg/ml）組：OD600=0.002
C（0.05mg/ml）組：OD600=0.002       D（0mg/ml）組：OD600=0.617
2 平板菌落統(tǒng)計
A（0.2mg/ml）組：0                   B（0.1mg/ml）組：0
C（0.05mg/ml）組：0                   D（0mg/ml）組：不計其數(shù)
附圖如下：

為進一步了解合適的使用濃度，采用降低的溶菌酶試驗濃度再次進行試驗研究，濃度分別為A組0.01mg/ml，B組0.05mg/ml，C組0.0025mg/ml，D組0 mg/ml。試驗方法同上。
試驗結(jié)果
1各組吸光度如下：
A（0.01mg/ml）組：OD600=0.105       B（0.005mg/ml）組：OD600=0.107
C（0.0025mg/ml）組：OD600=0.546    D（0mg/ml）組：OD600=1.775
若以D組（空白對照組）為參照標(biāo)準(zhǔn)（100%），各試驗組菌體殘留比例分別為：A組 5.9%；B組 6.03%；C組 30.76%，D組 100%。因此在0.005mg/ml的使用濃度時可實現(xiàn)90%以上的抑菌效果，使用為0.0025mg/ml時可以實現(xiàn)70%以上的抑菌效果。由此建議使用劑量約為5ppm。
注：以上試驗結(jié)果是在實驗室控制條件下得到的，現(xiàn)實使用時條件變化可能會一定程度的影響試驗結(jié)果。

歡迎光臨畜牧人 (http://m.ffers.com.cn/)