畜牧人

標(biāo)題: 關(guān)于自家苗的制作！請(qǐng)大家進(jìn)來提一提意見。還希望各位大蝦能教教我WSM要這么做！ [打印本頁]

作者: 消散了的魂 時(shí)間: 2008-2-16 00:15
標(biāo)題: 關(guān)于自家苗的制作！請(qǐng)大家進(jìn)來提一提意見。還希望各位大蝦能教教我WSM要這么做！
很多時(shí)候，知道了要如何去做，卻不知道這其中道理；是一件很痛苦的事情！現(xiàn)整理出來  其中還有很多不完整的。期望進(jìn)來的人，能留下點(diǎn)真經(jīng)！
                                 關(guān)于自家苗的制作

1取病料
   取患病新死亡，有典型癥狀并且是沒有用抗生素治療過的的仔豬，用解剖刀取肺臟、脾臟、淋巴結(jié)等諸多器官；不同的病采用的組織是有區(qū)別，各種病原對(duì)組織的嗜好是不一樣的，藍(lán)耳病病毒在肺部含量較多，而豬瘟病毒因其嗜內(nèi)皮細(xì)胞的特性，使其在腎臟和免疫器官含量較多。如果把病豬所有內(nèi)臟一起搗碎制苗，各種抗原都將被稀釋，很難達(dá)到有效免疫的抗原量。
PS：本步驟的要點(diǎn)是1、病料要新鮮的，防止細(xì)菌毒素的產(chǎn)生。如果不能及時(shí)做，凍在-20度（盡量底溫處）保存。2、病料要采集病變明顯的，保證疫苗的效果。。
2制作
   將病料剁碎(除去結(jié)締組織，筋膜，氣管及較粗的支氣管,但一定要取出肺門淋巴結(jié))將采集的病料稱重，加適量生理鹽水，用消毒好的組織勻漿機(jī)，絞3-5min，致勻漿狀，搗碎機(jī)高速運(yùn)轉(zhuǎn),溫度上升很快,夏天溫度高時(shí),容器中的病料很容易超過40 ℃,使蛋白質(zhì)發(fā)生變性,破壞病原的免疫源性。故夏天制苗時(shí),病料加入搗碎機(jī)中的生理鹽水和用于水浴冷卻病料的冷水,都應(yīng)預(yù)先在冰箱中經(jīng)過冷凍),裝盆標(biāo)記場(chǎng)名放入冰箱凍溶。對(duì)于新采取的病料反復(fù)凍溶三次。，過濾是將病料中有用的部份濾出，是一個(gè)關(guān)鍵環(huán)節(jié)。解凍的病料與生理鹽水按1Kg：3500-4000ml的比例進(jìn)行稀釋調(diào)兌。再用雙層無菌醫(yī)用紗布過濾，然后將過了兩層紗布的濾液過一次八層再過一次十二層紗布。
最后加入甲醛，以甲醛溶液為例,需氧細(xì)菌滅活需要的濃度為0.1%～0.2%,厭氧細(xì)菌滅活需要的濃度為0.4%～0.5%,病毒滅活需要的濃度為0.05%～0.4%,而且,豬瘟病毒用甲醛溶液滅活效果不理想。所以制作不同的疫苗,對(duì)滅活劑的種類和滅活劑的濃度要求是不一樣的.使甲醛純液在溶液中最終濃度達(dá)到0.3-0.4％，甲醛濃度不能高了。一小時(shí)搖均后，置37℃條件下滅活；滅活時(shí)間不能太短。滅活期間，每4—6小時(shí)搖動(dòng)一次約半小時(shí)，48小時(shí)后滅活完畢，分裝前按1500UI/ml比例加入雙抗（青霉素和鏈霉素），還要加一定量的黃芪多糖，增加豬只抗體的生成。于滅活液中并搖勻，再移至分裝間用虹吸法進(jìn)行無菌分裝。取出置于4℃下，保存待用。這樣注射下去豬就不容易產(chǎn)生過敏反應(yīng) PS：本步驟主要在于無菌操作，和滅活完全。
3試驗(yàn)
   在投入使用前，對(duì)自制的自家組織苗，進(jìn)行安全性和免疫效果的生物學(xué)試驗(yàn)。包括在添加完甲醛后滅活24H時(shí)分別進(jìn)行小白鼠腹部注射2ml,觀察24小時(shí)；和鏡檢細(xì)菌數(shù)量。在全場(chǎng)注射之前先用一兩窩豬仔作一下試驗(yàn)，觀察兩天，看有沒發(fā)生過敏、或注部位發(fā)生炎。如果沒有什么反應(yīng)，就可以全場(chǎng)鋪開。
4使用
      大豬可以用3ml，小豬1.5ml，種公豬6ml，間隔兩周免疫兩次。幼豬出生4-7天首次免疫，過7天進(jìn)行二免。母豬產(chǎn)前4 周注射4毫升/頭。

   自家苗效果如何？重要的是發(fā)病的豬盡量杜絕用抗生素，目前所做的自家滅活苗也沒有什么辦法去測(cè)定其中的病原含量，所以是盲目的。跟所取的組織是不是典型病變部位，制作過程等有很大的關(guān)系。
   自家苗的效果在發(fā)病最厲害的時(shí)候所取病料制成的苗效果最好，自家苗用下去后，病情得到控制，沒用了典型病變病變組織，所以效果會(huì)變差
細(xì)菌的結(jié)構(gòu)更加復(fù)雜，產(chǎn)生抗原的蛋白質(zhì)種類更多，自家苗效果不很穩(wěn)定。
   自家苗本身就是滅活苗,無論細(xì)菌還是病毒都大多已經(jīng)被殺死,因此,只要是經(jīng)過嚴(yán)格的工藝,將病原體殺滅,自家苗就是基本安全的,即使起不到好的作用,也不會(huì)引發(fā)疾病。
   如果取病料的豬是幾種病混合感染的,那用這病料制成的自家苗抗原的劑量符合要求基本上就可以能免疫這幾種?。∽詈檬沁x擇細(xì)菌性疾病作苗，雖然細(xì)菌滅活，但細(xì)菌本身的抗原決定簇仍然存在；免疫后，會(huì)刺激機(jī)體產(chǎn)生相應(yīng)的抗體，如果疫苗不起作用的話我們可以用藥物去控制或消滅它！另外，對(duì)于有多種血清型的細(xì)菌，制備的自家苗相對(duì)效果還會(huì)比較好!病不很復(fù)雜,控制的好的豬場(chǎng),按正規(guī)免疫到位,效果是最好的了!!!
      自家苗可以用,但是必須有條件的,就是豬場(chǎng)病非常的多,比較厲害的情況下來用,不要?jiǎng)虞m就用自家苗,那樣風(fēng)險(xiǎn)會(huì)很大.自家苗不是疾病的救命稻草！當(dāng)心飲鴆止渴！
   通過培養(yǎng)細(xì)菌來做自家苗,可以克服不少弊端》》》》！?。。。?！

[ 本帖最后由消散了的魂于 2008-2-16 17:18 編輯 ]

作者: 消散了的魂 時(shí)間: 2008-2-16 00:18
沙發(fā)先。。。。。。

提幾個(gè)問題

1 ：通過培養(yǎng)細(xì)菌來做自家苗如何操作？區(qū)別在哪里？
2 ：關(guān)于純甲醛濃度？我實(shí)際操作中是0.35%左右  卻有人說4%？  點(diǎn)解！
3 ：關(guān)于滅活溫度和滅活時(shí)間長(zhǎng)度？有人說24小時(shí)就能滅活？點(diǎn)解！
4 ：關(guān)于雙抗的藥物能否換成啊奇酶素之類的，如果可以；有哪些能用，用量如何？點(diǎn)解！
5 ：關(guān)于鏡檢能使用幾種方法；推薦用哪幾種。用啥標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)？
5 ：關(guān)于小白鼠活體實(shí)驗(yàn) 的原理！
6 ：如何預(yù)估，只是預(yù)估病原含量？

期盼能得到大家的回復(fù)

            感謝每位到過這里的帥哥和美女



新年快樂

謝謝三樓的... ...我還有幾點(diǎn)不明.
1.比如...能否多點(diǎn)資料?比如擴(kuò)繁后滅活...這其中的操作過程! 點(diǎn)解
2.涉及到佐劑的問題!我以前的制作過程中確實(shí)沒有添加!  不知道以后會(huì)不會(huì)!心里沒底!
3.如果...細(xì)菌擴(kuò)繁后后藥物滅活呢?不是甲醛,這樣的做法...到底在特色情況下可行不?
4.有人提出尋找臨床癥狀疑似PCV3感染的病豬，豬舍豬喘氣病疫苗，加重PCV2病變，該方法能從某種程度上幫助解決典型病料的問題?？尚蟹?

[ 本帖最后由消散了的魂于 2008-2-16 14:52 編輯 ]

作者: gaolao 時(shí)間: 2008-2-16 10:11
1 ：通過培養(yǎng)細(xì)菌來做自家苗如何操作？區(qū)別在哪里？

一個(gè)是通過培養(yǎng)擴(kuò)繁后滅活制作；一個(gè)是直接搗碎組織滅活制作；
2 ：關(guān)于純甲醛濃度？我實(shí)際操作中是0.35%左右卻有人說4%？點(diǎn)解！

我用到了0.45%，有的人還用到了0.6%。我想純甲醛濃度的濃度對(duì)免疫效果應(yīng)該起到關(guān)鍵性的作用；
請(qǐng)有實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)的人解析？
3 ：關(guān)于滅活溫度和滅活時(shí)間長(zhǎng)度？有人說24小時(shí)就能滅活？點(diǎn)解！

我想滅活選擇在37攝氏度是使細(xì)菌在其繁殖的溫度下被充分的滅活，時(shí)間一般都是2-3天；
4 ：關(guān)于雙抗的藥物能否換成啊奇酶素之類的，如果可以；有哪些能用，用量如何？點(diǎn)解！

雙抗的作用我覺得無非是對(duì)注射部位起到一定的消炎作用；添加量還沒達(dá)到保健的劑量；
5 ：關(guān)于鏡檢能使用幾種方法；推薦用哪幾種。用啥標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)？

我覺得用鏡檢的方法還不如用培養(yǎng)基培養(yǎng)的方法簡(jiǎn)便、使用、直觀！
5 ：關(guān)于小白鼠活體實(shí)驗(yàn) 的原理！

這個(gè)主要是看注射的應(yīng)激大小及注射部位的吸收情況
6 ：如何預(yù)估，只是預(yù)估病原含量？

這個(gè)主要看你的病料是否典型！

樓主的制作一直沒涉及到佐劑的問題？
樓主“如果取病料的豬是幾種病混合感染的,那用這病料制成的自家苗抗原的劑量符合要求基本上就可以能免疫這幾種??！”
每種病毒對(duì)滅活劑純甲醛濃度的要求是不一樣的，最好是病料的疾病相對(duì)單一典型！

作者: 雨寒 時(shí)間: 2008-2-16 10:21
安全嗎？

作者: gaolao 時(shí)間: 2008-2-16 15:27
安全是相對(duì)的，危險(xiǎn)是絕對(duì)的

作者: 消散了的魂 時(shí)間: 2008-2-16 16:39
嚴(yán)重同意...  ....
質(zhì)量第一...  ....
一切由天...  ....

作者: 傘柄 時(shí)間: 2008-2-17 14:02
今有幸拜讀! 受益不少!
但樓主說一切由天...這我反對(duì);這不應(yīng)該是我們這些技術(shù)人員說的!

作者: 178783955 時(shí)間: 2008-2-27 21:51
我做過很多滅活苗啊。關(guān)于滴加甲醛的問題，我提這么一點(diǎn)建議：一定要慢慢滴加。當(dāng)然有條件的可以用振蕩培養(yǎng)，那樣滅活更徹底。歡迎大家批評(píng)指正。

作者: 男兒.無悔 時(shí)間: 2008-3-5 23:30
張見識(shí)了正考慮這個(gè)呢

作者: 沙漠風(fēng) 時(shí)間: 2008-5-28 13:51
在自家苗的制做中，有人說甲醛濃度是4%,有人說甲醛純液最終濃度達(dá)到0.3-0.4％，甲醛濃度不能高了。請(qǐng)教各位老師，如果甲醛濃度高了有什么樣的后果，
雙抗的作用我覺得無非是對(duì)注射部位起到一定的消炎作用；添加量還沒達(dá)到保健的劑量，每毫升加那么點(diǎn)雙抗能起消炎作用嗎，過路的老師請(qǐng)回答。

作者: wang1632002 時(shí)間: 2008-6-11 10:24
有道理哈~~·~
關(guān)鍵還是環(huán)節(jié)的掌握~~

作者: yzwhl.2008 時(shí)間: 2008-6-16 12:42
請(qǐng)教諸位，取一頭豬的心肝肺典型病料，做自家組織滅活苗，最終稀釋到多少？可免疫多少頭豬或注射豬每頭幾毫升？:buyao:

作者: yunwei81 時(shí)間: 2008-6-19 10:13
精華,精華頂一下

作者: 屠江富 時(shí)間: 2008-6-20 20:38
自家苗中的甲醛對(duì)豬瘟的免疫是否有影響，，我在擔(dān)心它會(huì)對(duì)豬瘟的免疫應(yīng)答有有影響，請(qǐng)各位講講

作者: cenhao 時(shí)間: 2009-1-3 19:57
其實(shí)這東西奧妙很多，包括確定疾病的種類，發(fā)病時(shí)間，死亡時(shí)間，采哪種病料，病料怎樣保存，水與病料的比例，搗碎的細(xì)度，過濾紗布的層數(shù)，甲醛的加入方法，滅活的溫度，滅活的時(shí)間，佐劑的選擇，類毒素的粗步檢測(cè)，細(xì)菌檢測(cè)，以及注射的量免疫程序等，不是簡(jiǎn)單的搗鼓幾下就能達(dá)到很好的效果的。如果做的好，免疫程序也確定的好的話，場(chǎng)里的疾病會(huì)很少發(fā)生，當(dāng)然也要配合其它疫苗的正確使用，規(guī)范科學(xué)的日常管理，合理優(yōu)化的營(yíng)養(yǎng)配方。

作者: cenhao 時(shí)間: 2009-1-3 20:15
其實(shí)這東西奧妙很多，包括確定疾病的種類，發(fā)病時(shí)間，死亡時(shí)間，采哪種病料，病料怎樣保存，水與病料的比例，搗碎的細(xì)度，過濾紗布的層數(shù)，甲醛的加入方法，滅活的溫度，滅活的時(shí)間，佐劑的選擇，類毒素的粗步檢測(cè)，細(xì)菌檢測(cè)，以及注射的量免疫程序等，不是簡(jiǎn)單的搗鼓幾下就能達(dá)到很好的效果的。如果做的好，免疫程序也確定的好的話，場(chǎng)里的疾病會(huì)很少發(fā)生，當(dāng)然也要配合其它疫苗的正確使用，規(guī)范科學(xué)的日常管理，合理優(yōu)化的營(yíng)養(yǎng)配方。

作者: ccxmlhx 時(shí)間: 2009-1-3 23:32
那么復(fù)雜啊?等著治豬病制出來用時(shí)豬都死光了

作者: ccxmlhx 時(shí)間: 2009-1-4 23:08
我認(rèn)為自家苗中甲醛濃度高了注射后會(huì)引起豬局部水腫壞死,我也遇到過!

作者: mute0616 時(shí)間: 2009-5-7 23:08
感覺自家苗效果時(shí)號(hào)時(shí)壞

作者: chenyuanfang46 時(shí)間: 2009-5-7 23:41
慎用....................

作者: tianhe1981 時(shí)間: 2009-5-8 09:54
我認(rèn)為自家苗這種東西一般豬場(chǎng)里還是不要自己動(dòng)手做吧，儀器除外，光是技術(shù)本身就要求太高，完全可以通過找專業(yè)院校實(shí)驗(yàn)室之類的地方幫著做要穩(wěn)當(dāng)?shù)亩喟?hr noshade size="2" width="100%" color="#808080"> 作者: danzhu1985 時(shí)間: 2009-5-21 22:16
一顆定時(shí)炸彈，早晚出事啊

歡迎光臨畜牧人 (http://m.ffers.com.cn/)