畜牧人

標題: 請教：測定真蛋白 [打印本頁]
作者: 阿土    時間: 2008-9-12 10:28
標題: 請教：測定真蛋白
我們單位以前都不測真蛋白的，可現(xiàn)在突然讓測了，不會啊。我就自己照書上操作的，現(xiàn)在有幾個問題，希望高手們幫忙解答啊，
1：加硫酸銅和氫氧化鈉的時候是繼續(xù)讓樣品液體在電爐子上加熱呢還是不用再加熱了
2：為什么我把過濾后的沉淀和濾紙放在65攝氏度的烘箱干燥2小時候，濾紙都還是濕的呢
3：有什么方法能把濾紙上的沉淀全部簡單的轉到凱氏燒瓶中呢
作者: glory143    時間: 2008-9-12 10:35
直接把沉淀加濾紙丟進燒瓶中就好了，難道還要把沉淀從濾紙上取下來？？
作者: 阿土    時間: 2008-9-12 10:56
哦，我還真以為是把沉淀都弄下來呢，謝啦
作者: 長沙雙胞胎    時間: 2008-9-12 11:06
:P: :D:: 太專:lol :P: 業(yè)
作者: beijingbrill    時間: 2008-9-12 11:19
在測定真蛋白時可以直接水洗，其結果和堿洗幾乎無差別，而且過濾起來速度快，另外過濾完后無需徹底烘干，只要感覺濾紙無水即可
作者: dy3166    時間: 2008-9-12 11:40
標題: 回復 樓主 阿土 的帖子
加硫酸銅時要加熱，但假氫氧化鈉則不用加熱
沉淀要i烘干一些，如水分太多會降低硫酸濃度，易起泡，加長消化時間。
作者: tony2005428    時間: 2008-9-12 11:49
1、加硫酸銅和氫氧化鈉的時候是不用繼續(xù)加熱就可以
2、把過濾后的沉淀和濾紙放在烘箱烘干，是防止水分太多在消化時易起泡沫，消化不完全
3、直接把過濾后的沉淀和濾紙一起放在消化管內消化就可以了，不用取下來
:xuehu: :xuehu:
作者: tony2005428    時間: 2008-9-12 16:59
標題: 回復 8樓 wujianping992 的帖子
wujianping992
你做出來的真蛋白是不是比粗蛋白還高啊？？
呵呵呵
那肯定是出錯了？？
@@004: :tiaotiao:
作者: houweqi    時間: 2008-11-3 10:38
標題: 請教
我第一次測一個氨基酸粉的真蛋白，粗蛋白為106%左右，可測真蛋白才7%左右。我覺得是在加完硫酸銅和氫氧化鈉過濾時，燒杯壁上粘了很多，怎么洗都洗不下來，是不是這個原因引起的。請教高手燒杯壁上粘的對結果有影響嗎？如果有，怎么洗下來。
作者: yarain10    時間: 2009-12-21 20:04
嘎嘎，今天也做了第一次，
作者: yarain10    時間: 2009-12-21 20:05
在試樣的前處理過程中，“煮沸”要求是加熱至沸并保持30分鐘，目的是使試樣中的非蛋白氮類物質充分溶解于水中。加10％硫酸銅溶液和25％氫氧化鈉溶液時最好采用移液管移取，然后沿著燒杯內壁緩慢滴加，一方面防止局部氫氧化鈉太濃將溶解部分蛋白質，這樣會導致最終結果偏低；另一方面是為了使試樣中的真蛋白質充分鹽析：放置2小時或靜置過夜也是這個道理。沉淀物宜以雙層中速定量濾紙過濾，雙層濾紙可以加快過濾速度，同時又不致于將沉淀物過濾掉。濾液無SO+2表明了已充分洗滌沉淀物，因為如果濾液中仍有SO+2 。則表明沉淀物中間仍可能夾雜有部分可溶性非蛋白氮類物質(如NH )，若不繼續(xù)洗滌則將導致最終結果偏高。將濾紙和殘渣(沉淀物)包好放入烘箱中于65～70cc下干燥2小時是為了使沉淀物充分干燥。一方面是為了避免沉淀物中仍夾雜有一些氨類物質(盡管這種情況一般不會發(fā)生。因為濾液已經過了氯化鋇試液的檢驗，但仍不能排除因人眼觀察的局限性使其中間仍夾雜有部分熱烘干的過程中揮發(fā)掉)；另一方面也是為了下一步試樣消化的順利進行。因為如果試樣潮濕，炭化升溫過快，氣體驟然膨脹不易從凱氏燒瓶中散發(fā)出去，很容易使試樣與氣體一同沖出凱氏燒瓶從而導致消化失敗
作者: 孫銳利    時間: 2009-12-22 16:41
我還沒測過真蛋白呢？
作者: hongmei86    時間: 2010-1-14 15:53
真蛋白不是還可以用三氯乙酸法的蠻
作者: 煙花雨    時間: 2010-8-1 22:46
回復 11# yarain10
非常實用的解答，真蛋白困惑我的問題，這里都能找到答案！:)3:
作者: 陽光綠茶008    時間: 2010-8-1 22:53
學習了，但是你不知道你用的什么方法呀，有沒有考慮過準確性的問題



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