畜牧人

標(biāo)題: Western blot [打印本頁(yè)]

作者: wuhaiyang2003 時(shí)間: 2010-9-12 16:37
標(biāo)題: Western blot
western blot和Western bloting是一種技術(shù)嗎，兩者有什么區(qū)別。

作者: wuhaiyang2003 時(shí)間: 2010-9-16 21:12
怎么，沒(méi)有知道嗎？

作者: hahachina 時(shí)間: 2010-9-17 02:34
一個(gè)東西.

作者: wuhaiyang2003 時(shí)間: 2010-9-17 21:23
那兩種表述有什么區(qū)別嗎？

作者: donghaijun2009 時(shí)間: 2010-9-17 22:06
Western Blot中文一般稱為蛋白質(zhì)印跡。它是分子生物學(xué)、生物化學(xué)和免疫遺傳學(xué)中常用的一種實(shí)驗(yàn)方法。其基本原理是通過(guò)特異性抗體對(duì)凝膠電泳處理過(guò)的細(xì)胞或生物組織樣品進(jìn)行著色。通過(guò)分析著色的位置和著色深度獲得特定蛋白質(zhì)在所分析的細(xì)胞或組織中的表達(dá)情況的信息。
蛋白免疫印跡（Western blotting 或 Immunoblotting）一般由凝膠電泳、樣品的印跡和
免疫學(xué)檢測(cè)三個(gè)部分組成。第一步是做SDS 聚丙烯酰胺凝膠電泳，使待測(cè)樣品中的蛋白質(zhì)
按分子量大小在凝膠中分成帶。第二步把凝膠中已分成條帶的蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移到一種固相支持物
上，用得最多的材料是硝酸纖維素膜(NC 膜)和PVDF 膜，蛋白轉(zhuǎn)移的方法多用電泳轉(zhuǎn)移（轉(zhuǎn)
移電泳），它又有半干法和濕法之分，現(xiàn)在大多用濕法。第三步是用特異性的抗體檢測(cè)出已
經(jīng)印跡在膜上的所要研究的相應(yīng)抗原。免疫檢測(cè)的方法可以是直接的和間接的?，F(xiàn)在多用間
接免疫酶標(biāo)的方法，在用特異性的第一抗體雜交結(jié)合后，再用酶標(biāo)的第二抗體（堿性磷酸酶
（AP）或辣根過(guò)氧化物酶（HRP）標(biāo)記的抗第一抗體的抗體）雜交結(jié)合，再加酶的底物顯
色或者通過(guò)膜上的顏色或X 光底片上暴光的條帶來(lái)顯示抗原的存在。該技術(shù)被廣泛應(yīng)用于
蛋白表達(dá)水平的檢測(cè)中。

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