畜牧人

標題: Western blot [打印本頁]

作者: wuhaiyang2003 時間: 2010-9-12 16:37
標題: Western blot
western blot和Western bloting是一種技術嗎，兩者有什么區(qū)別。

作者: wuhaiyang2003 時間: 2010-9-16 21:12
怎么，沒有知道嗎？

作者: hahachina 時間: 2010-9-17 02:34
一個東西.

作者: wuhaiyang2003 時間: 2010-9-17 21:23
那兩種表述有什么區(qū)別嗎？

作者: donghaijun2009 時間: 2010-9-17 22:06
Western Blot中文一般稱為蛋白質(zhì)印跡。它是分子生物學、生物化學和免疫遺傳學中常用的一種實驗方法。其基本原理是通過特異性抗體對凝膠電泳處理過的細胞或生物組織樣品進行著色。通過分析著色的位置和著色深度獲得特定蛋白質(zhì)在所分析的細胞或組織中的表達情況的信息。
蛋白免疫印跡（Western blotting 或 Immunoblotting）一般由凝膠電泳、樣品的印跡和
免疫學檢測三個部分組成。第一步是做SDS 聚丙烯酰胺凝膠電泳，使待測樣品中的蛋白質(zhì)
按分子量大小在凝膠中分成帶。第二步把凝膠中已分成條帶的蛋白質(zhì)轉移到一種固相支持物
上，用得最多的材料是硝酸纖維素膜(NC 膜)和PVDF 膜，蛋白轉移的方法多用電泳轉移（轉
移電泳），它又有半干法和濕法之分，現(xiàn)在大多用濕法。第三步是用特異性的抗體檢測出已
經(jīng)印跡在膜上的所要研究的相應抗原。免疫檢測的方法可以是直接的和間接的?，F(xiàn)在多用間
接免疫酶標的方法，在用特異性的第一抗體雜交結合后，再用酶標的第二抗體（堿性磷酸酶
（AP）或辣根過氧化物酶（HRP）標記的抗第一抗體的抗體）雜交結合，再加酶的底物顯
色或者通過膜上的顏色或X 光底片上暴光的條帶來顯示抗原的存在。該技術被廣泛應用于
蛋白表達水平的檢測中。

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