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【原創(chuàng)】豬唾液用于疾病診斷的實用指南
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作者:
畜牧編輯
時間:
2016-8-12 11:19
標(biāo)題:
【原創(chuàng)】豬唾液用于疾病診斷的實用指南
一、唾液用于疾病診斷的常用方法
1、疾病監(jiān)控
預(yù)后分析及唾液可用于動物疾病信號的監(jiān)控,及評估豬群內(nèi)的流行病原。預(yù)后分析
并不是一種診斷程序,因此唾液也不能用作排除感染的依據(jù)。
2、檢測抗體
唾液樣品可用于檢測PRRSV抗體,血清學(xué)檢查不適合用于普遍存在的病原,如PCV2。
3、檢測病原RNA/DNA
唾液樣品還可用于檢測造成肺炎的病原,如豬肺炎支原體、PRRSV、SIV等,但這些病原在唾液中的存在并不一定與疾病相關(guān)。
二、動物選擇
1、感染者:選擇已表現(xiàn)出感染信號的動物
2、無癥狀者:隨機選擇無癥狀的動物
3、跟蹤感染時間:同一動物進行兩次取樣,兩次間隔2-4周
4、檢查感染狀況:對不同年齡群的動物分別取樣(如4、8、12、16、20、24周齡)
三、取樣數(shù)量
由于缺乏對唾液樣品的診斷靈敏度的相關(guān)數(shù)據(jù),最適樣品大小目前還沒有最終確定。樣品數(shù)量取決于觀察的單位,不能超過欄水平。
下表1列出了不同發(fā)病率情況下的唾液取樣數(shù),實際取樣數(shù)應(yīng)等于或高于表中的數(shù)值。
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四、取樣前準(zhǔn)備工作
準(zhǔn)備一條新的、干凈的、原色棉繩,直徑適合于豬場的大小和年齡。如斷奶仔豬為1cm,生長育肥豬可為2cm。禁止使用合成纖維繩,因為它們的吸收唾液的能力不及棉繩。
繩子的長度取決于具體的固定的位置,如固定在天花板,則需要較長;如固定在欄壁,則長度較短。
一條繩子足夠適用于10-15頭取樣豬。但是,如果欄舍內(nèi)飼養(yǎng)豬只增加,則需增加取樣繩的數(shù)量。
每欄使用一條新的棉繩。
準(zhǔn)備一些滅菌的試管(5-12mL)用于儲存收集到的唾液樣品,確保試驗無菌。
取樣最好在豬只進食前或后的2小時執(zhí)行,這樣可提高豬只對取樣繩的興趣,提高取樣效率。
五、取樣技術(shù)
1、固定取樣繩。在欄舍內(nèi)選擇一個位置固定取樣繩,要保證欄內(nèi)所有豬均可接觸到取
樣繩。固定位置應(yīng)干凈,遠(yuǎn)離飲水和進食區(qū)。取樣繩的低端應(yīng)與豬站立時嘴的高度相平。如果同欄內(nèi)分配多個取樣繩,它們的位置應(yīng)盡可能的分開。
2、取樣繩放置時間為30min。如果發(fā)現(xiàn)試驗豬對取樣繩不夠活躍,可延長至1小時。
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3、小心取下取樣繩,注意不要接觸到地面。將取樣繩內(nèi)的唾液擠至一個干凈的塑料袋或容器內(nèi)。
4、將上述塑料袋剪開一個小口,將里面的唾液轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的無菌試管內(nèi)。每個樣品至少需要2ml。
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5、收集后,如果發(fā)現(xiàn)試管內(nèi)有明顯的雜質(zhì),如飼料等,則需用離心機對樣品進行純化。離心速度為2000x g,10分鐘。
6、在試管上標(biāo)明取樣欄舍、取樣豬場、取樣日期。
六、樣品保存
在將樣品送往試驗室前,可暫時先將樣品儲存于冰箱內(nèi),但必需在1天送往試驗室分析。如果不能,則應(yīng)該將樣品保存于–20至–80°C冷庫。
七、送檢
在送檢前應(yīng)確保你所選的試驗室具備唾液分析的能力。常規(guī)血液、組織的分析方法并不適用于唾液。另還需附上相關(guān)的信息,如獸醫(yī)姓名、豬場名稱、發(fā)票信息、所取樣品的動物種類和年齡、取樣日期、取樣數(shù)、樣品類型、檢測項目等。
譯者:戶啟蔚
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