畜牧人
標(biāo)題:
【筆記】豬瘟之診斷
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2016-10-20 09:18
標(biāo)題:
【筆記】豬瘟之診斷
豬瘟之診斷
鐘明華 研究員 臺(tái)灣動(dòng)物研究所
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一、豬瘟及豬瘟病毒
豬瘟是高度傳染性敗血癥,以全身性出血為主征,感染率與死亡率均高達(dá)95-100%。豬瘟只有一個(gè)血清型,豬和野豬是唯一的自然宿主,也是最重要的感染源。豬瘟感染豬及其分泌物排泄物為豬瘟主要傳染源??谒⒈且?、眼屎、糞尿、精液等都有病毒。
豬瘟病毒為RNA病毒,有封套,其RNA具有感染力。病毒核酸基因全長(zhǎng)12.3Kb。
二、豬瘟診斷流程:
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臨床癥狀
豬瘟發(fā)生初期,豬群內(nèi)往往只有少數(shù)豬只呈現(xiàn)癥狀。感染豬最初呈現(xiàn)精神不振,食欲降低,行動(dòng)遲鈍,體溫顯著升高(通常在41℃左右)等現(xiàn)象,血液中白血球量亦隨著體溫上升而減少。病癥早期,豬眼部因結(jié)膜炎而有大量分泌物,而后是眼瞼完全黏著。
患病豬呈高熱,畏寒。小豬喜聚集成堆,保育后期豬只,臨床呈現(xiàn)消瘦,被毛粗亂,并推擠在一起。
肉眼病變,病豬皮膚潮紅,皮下點(diǎn)狀及斑狀出血。
宏觀病變,脾臟梗塞,腎臟結(jié)節(jié),淋巴結(jié)皮下出血,胸腺萎縮,直腸、盲腸潰瘍。
SPF豬人工感染豬瘟病毒試驗(yàn):
臨床癥狀,感染早期下痢,短暫發(fā)熱;被毛粗亂;臨床病理學(xué):肝功能異常;
肉眼病變:淋巴結(jié)腫大,周邊出血;腎臟出血;肝細(xì)胞腫大,蒼白;腸粘膜潮紅;心肌蒼白。
組織病變,非化膿性腦膜炎;小腸粘膜充血、出血;肝細(xì)胞腫大變性;間質(zhì)性腎炎;心肌炎。
實(shí)驗(yàn)室診斷
血液學(xué)檢查:白細(xì)胞減少,病毒血癥,抗體檢測(cè)。
冷凍切片熒光抗體染色:扁桃體、脾臟、淋巴結(jié)、腸管、腦、皮膚、毛囊、舌頭。
抗體監(jiān)測(cè):血清中和抗體檢測(cè),酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)。
病毒分離:初代仔豬睪丸細(xì)胞培養(yǎng),豬腎細(xì)胞培養(yǎng)。
病毒鑒定:間接熒光標(biāo)示抗體染色(IFA),間接過(guò)氧化氫酵素標(biāo)示抗體染色(IPMA),RT-PCR,核酸測(cè)序及DNA晶片技術(shù)。
三、豬瘟病毒區(qū)別鑒定
最后鐘研究員闡述了當(dāng)前豬瘟病毒鑒定及診斷的主流技術(shù)為RT-PCR,但需要區(qū)分疫苗毒及野毒。如利用RT-PCR技術(shù)區(qū)別診斷LPC疫苗及豬瘟野毒。在豬瘟診斷中,需要注意一是:為了避免RT-PCR反應(yīng)的誤判,要設(shè)計(jì)敏感及特殊的引物,RT-PCR反應(yīng)太過(guò)敏感,特異性不足的引物可與疫苗及野外毒株反應(yīng),造成混淆而誤判;二是:避免形態(tài)學(xué)肉眼病理之誤判,因?yàn)槠渌膊∮蓄愃曝i瘟之肉眼病灶。
另外談到了利用基因晶片技術(shù)進(jìn)行豬瘟的診斷,該技術(shù)可區(qū)分豬瘟疫苗毒,野毒。
當(dāng)前豬瘟依然是危害我國(guó)養(yǎng)豬業(yè)的最重要的疫病之一,最近豬瘟疾病的發(fā)生呈現(xiàn)上升趨勢(shì),是規(guī)?;i場(chǎng)優(yōu)先防控的主要疾病之一。
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當(dāng)前豬場(chǎng)豬瘟的防控壓力依然嚴(yán)峻,具有6大特點(diǎn):流行范圍廣;散發(fā)流行;發(fā)病年齡小,成年豬帶毒現(xiàn)象嚴(yán)重;非典型癥狀和繁殖障礙型豬瘟增多;混合感染嚴(yán)重;免疫失敗現(xiàn)象嚴(yán)重等特點(diǎn)。那么,為了更好的防控豬瘟,精準(zhǔn)、及時(shí)的實(shí)驗(yàn)室診斷尤為重要,主要采用RT-PCR檢測(cè)技術(shù)診斷方法,但存在誤判的風(fēng)險(xiǎn),需要設(shè)計(jì)更加敏感的診斷方法(如臍帶血、扁桃體檢測(cè)技術(shù)),結(jié)合臨床癥狀進(jìn)行綜合判斷和分析。
關(guān)于豬瘟防控,最好的措施是實(shí)現(xiàn)豬瘟的凈化。鑒于發(fā)達(dá)國(guó)家成功消滅豬瘟的方法,結(jié)合國(guó)內(nèi)實(shí)際情況,因地制宜制定適合國(guó)內(nèi)的豬瘟凈化方案,再配合高通量、精準(zhǔn)的豬瘟診斷技術(shù)(如臍帶血、扁桃體檢測(cè)技術(shù)),最終能夠成功實(shí)現(xiàn)豬瘟的凈化。
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