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豬支原體肺炎(168株)活疫苗簡介
豬支原體肺炎(168株)活疫苗是由江蘇省農(nóng)科院獸醫(yī)研究所和南京天邦生物科技有限公司研制申報,經(jīng)農(nóng)業(yè)部獸用生物制品規(guī)程委員會審查通過,2006年3月14日被批準為國家二類新獸藥[證號:(2007)新獸藥證字10號]。豬支原體肺炎(168株)活疫苗的研制是三代研究人員智慧與汗水的結(jié)晶,實現(xiàn)了多項重大技術(shù)突破。
一、病原特點
1.豬支原體肺炎168株分離于1979年甘肅省蘭州市安寧區(qū)豬肺炎支原體強毒株人工感染發(fā)病的168號二花臉豬,經(jīng)3次克隆化培養(yǎng),無細胞培養(yǎng)340代次,人工致弱為弱毒菌株,何正禮、金洪效、邵國青等三代科研人員深入研究,并通過大量的實驗室與臨床試驗,證明168株安全性穩(wěn)定,同時具有良好的免疫原性。
2.通過基因特征的研究完成了168弱毒株的生物標記,邵國青等(1998)以SDS-PAGE比較168弱毒株與強毒株及模式株蛋白組成的差異,以脈沖場電泳檢測弱毒株染色體的分子量,同時克隆了168株P(guān)46基因,通過測序分析和RAPD試驗,探討弱毒株的變異規(guī)律。結(jié)果表明,經(jīng)過漫長的致弱過程,豬肺炎支原體的毒力基因發(fā)生了改變,168弱毒株具有其獨特、穩(wěn)定的基因特征,通過分子基因手段標記的“豬肺炎支原克隆致弱株”于2000年2月5日獲得國家發(fā)明專利(專利號:ZL99114276.4)。
3.獨特的無細胞培養(yǎng)技術(shù)最終克服了支原體疫苗的生產(chǎn)瓶頸。支原體的培養(yǎng)難度很高,乳兔肺組織苗不可避免地含有較多雜蛋白,而其它同類疫苗多需要采用濃縮手段才能達到所需抗原滴度。1974年金洪效研究員等以變通的Switzer氏培養(yǎng)基(KM2)分離到豬肺炎支原體,在當時被多方采用。這種無細胞的培養(yǎng)技術(shù)經(jīng)多次改變和改進,形成了目前所采用的江蘇Ⅱ號(KM2)培養(yǎng)基,該培養(yǎng)基適用于支原體疫苗的大規(guī)模生產(chǎn),并使168株與同類疫苗相比之下具有高純度、高滴度、低價格的特點。
二、豬支原體肺炎(168株)活疫苗的作用機理與免疫機理
作用機理 支原體強毒的早期感染過程,首先是附著在纖毛的上端,導(dǎo)致細胞病變、纖毛萎縮、功能受損,進一步發(fā)展就會破壞黏膜層,導(dǎo)致其他病原菌易于侵入而引起繼發(fā)感染。豬感染肺炎支原體后,大量淋巴細胞在各級氣管周圍以及肺泡中聚集、增生,引起咳嗽或氣喘,肺炎支原體抑制被感染細胞的代謝,溶解破壞肺泡結(jié)構(gòu)與淋巴小結(jié),留下永久性的組織傷痕,表現(xiàn)明顯的肺部實變和免疫抑制。豬支原體肺炎(168株)活疫苗具有特異的占位效應(yīng)與主動免疫反應(yīng),形成了抵御強毒支原體感染的堅強堡壘。
占位效應(yīng) 無論是強毒疫苗株還是弱毒疫苗株都只能粘附在氣管、支氣管、肺泡等上皮細胞表面的受體上,而不進入組織和血液。仔豬在出生后5~7天還不會自然感染肺炎支原體,活疫苗弱毒株通過肺內(nèi)注射直接到達肺泡黏膜表面,在肺泡細胞表面形成優(yōu)勢占位,借助黏膜蛋白等營養(yǎng)物質(zhì)大量繁殖,最終占據(jù)肺泡表面所有可占用的空間(大約需1~2周時間),這個過程同時伴隨機體發(fā)生局部黏膜免疫、細胞免疫和體液免疫。此時,如果仔豬再次吸入感染肺炎支原體野毒,肺泡表面已缺乏可占據(jù)的空位,同時被抗體中和、淋巴細胞吞噬或衰竭而死,從而大大減少氣喘病的發(fā)生幾率。
免疫機理 支原體的免疫反應(yīng)可以分為三種,即體液免疫(循環(huán)抗體)、局部黏膜免疫(分泌型IgA)以及細胞免疫。疫苗通過肌肉注射,也可產(chǎn)生較高的循環(huán)抗體水平。但從有效防治氣喘病的角度來說,僅有較高的循環(huán)抗體水平還是遠遠不夠的,還必須對靶器官如呼吸道和肺部進行重點免疫保護,因為循環(huán)抗體很難有效到達這些靶器官,所以還必須依賴針對靶器官的局部黏膜免疫和細胞免疫。經(jīng)研究證明豬支原體肺炎(168株)活疫苗能同時刺激產(chǎn)生三種免疫效應(yīng),有效預(yù)防豬的氣喘病。
凈化效應(yīng) 雖然滅活疫苗免疫和藥物治療對豬支原體肺炎控制有一定效果,但豬肺炎支原體具有免疫逃避、慢性感染、反復(fù)發(fā)病的特性,所以實現(xiàn)豬場凈化難以實現(xiàn)。支原體活疫苗同樣具備免疫逃避和反復(fù)感染的特性,長期免疫可形成豬群和環(huán)境的弱毒菌群優(yōu)勢,通過弱毒菌株的競爭與占位逐步達到強毒菌株的凈化,是豬場長期、持續(xù)免疫支原體肺炎(168株)活疫苗的最終目的和必然結(jié)果。
三、疫苗特點
1、免疫效力堅強而持久,只需正確接種1次,便可在2周內(nèi)產(chǎn)生保護力,1個月抗同群感染,2個月抗強毒感染,免疫期可達9個月;
2、安全性更好,采用獲國家專利的豬肺炎支原體克隆致弱株及無細胞培養(yǎng)技術(shù),疫苗純度高,較乳兔肺組織苗更安全;
3、相對進口滅活疫苗具有更高的性價比,在長期使用中會給養(yǎng)殖場創(chuàng)造出更高經(jīng)濟效益。
四、使用方法
1、豬只在未感染肺炎強毒的時候免疫效果較好,建議5~15日齡時仔豬免疫1頭份?;钜呙绮捎脽o細胞培養(yǎng)基技術(shù)培養(yǎng),還可以通過鼻腔免疫接種,為大豬特別是母豬免疫提供了方便,建議在母豬進產(chǎn)房時噴鼻免疫。
2、接種時需采用肺內(nèi)注射,使用疫苗配套的專用注射針頭,從肺臟所處位置的中間部位的肋間隙垂直進針注射(初次操作可按右側(cè)肩胛骨后緣沿中軸線向后2~3肋間,垂直進針是指入針方向與豬體皮膚之間的角度為90°),每只小豬換一個針頭。使用時按瓶簽注射頭份,用滅菌生理鹽水稀釋,每頭豬注射0.5~1毫升。
3、免疫前后1~2周禁用抗支原體藥物(如土霉素、壯觀霉素、卡那霉素、林肯霉素、泰樂菌素等)和飼料添加劑;作用于細胞壁或非敏感藥物(如青霉素、阿莫西林、羥氨芐青霉素、頭孢菌素II、磺胺二甲氧嘧啶、鏈霉素、多粘菌素等)可正常使用。 |
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