【筆記】豬瘟之診斷

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豬瘟之診斷

鐘明華 研究員 臺(tái)灣動(dòng)物研究所

一、豬瘟及豬瘟病毒
　　豬瘟是高度傳染性敗血癥，以全身性出血為主征，感染率與死亡率均高達(dá)95-100%。豬瘟只有一個(gè)血清型，豬和野豬是唯一的自然宿主，也是最重要的感染源。豬瘟感染豬及其分泌物排泄物為豬瘟主要傳染源?？谒?、鼻液、眼屎、糞尿、精液等都有病毒。
　　豬瘟病毒為RNA病毒，有封套，其RNA具有感染力。病毒核酸基因全長(zhǎng)12.3Kb。
二、豬瘟診斷流程：

臨床癥狀
　　豬瘟發(fā)生初期，豬群內(nèi)往往只有少數(shù)豬只呈現(xiàn)癥狀。感染豬最初呈現(xiàn)精神不振，食欲降低，行動(dòng)遲鈍，體溫顯著升高（通常在41℃左右）等現(xiàn)象，血液中白血球量亦隨著體溫上升而減少。病癥早期，豬眼部因結(jié)膜炎而有大量分泌物，而后是眼瞼完全黏著。
　　患病豬呈高熱，畏寒。小豬喜聚集成堆，保育后期豬只，臨床呈現(xiàn)消瘦，被毛粗亂，并推擠在一起。
　　肉眼病變，病豬皮膚潮紅，皮下點(diǎn)狀及斑狀出血。
　　宏觀病變，脾臟梗塞，腎臟結(jié)節(jié)，淋巴結(jié)皮下出血，胸腺萎縮，直腸、盲腸潰瘍。
SPF豬人工感染豬瘟病毒試驗(yàn)：
　　臨床癥狀，感染早期下痢，短暫發(fā)熱；被毛粗亂；臨床病理學(xué)：肝功能異常；
　　肉眼病變：淋巴結(jié)腫大，周邊出血；腎臟出血；肝細(xì)胞腫大，蒼白；腸粘膜潮紅；心肌蒼白。
　　組織病變，非化膿性腦膜炎；小腸粘膜充血、出血；肝細(xì)胞腫大變性；間質(zhì)性腎炎；心肌炎。
實(shí)驗(yàn)室診斷
　　血液學(xué)檢查：白細(xì)胞減少，病毒血癥，抗體檢測(cè)。
　　冷凍切片熒光抗體染色：扁桃體、脾臟、淋巴結(jié)、腸管、腦、皮膚、毛囊、舌頭。
　　抗體監(jiān)測(cè)：血清中和抗體檢測(cè)，酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)。
　　病毒分離：初代仔豬睪丸細(xì)胞培養(yǎng)，豬腎細(xì)胞培養(yǎng)。
　　病毒鑒定：間接熒光標(biāo)示抗體染色（IFA），間接過(guò)氧化氫酵素標(biāo)示抗體染色（IPMA），RT-PCR，核酸測(cè)序及DNA晶片技術(shù)。
三、豬瘟病毒區(qū)別鑒定
　　最后鐘研究員闡述了當(dāng)前豬瘟病毒鑒定及診斷的主流技術(shù)為RT-PCR，但需要區(qū)分疫苗毒及野毒。如利用RT-PCR技術(shù)區(qū)別診斷LPC疫苗及豬瘟野毒。在豬瘟診斷中，需要注意一是：為了避免RT-PCR反應(yīng)的誤判，要設(shè)計(jì)敏感及特殊的引物，RT-PCR反應(yīng)太過(guò)敏感，特異性不足的引物可與疫苗及野外毒株反應(yīng)，造成混淆而誤判；二是：避免形態(tài)學(xué)肉眼病理之誤判，因?yàn)槠渌膊∮蓄?lèi)似豬瘟之肉眼病灶。
　　另外談到了利用基因晶片技術(shù)進(jìn)行豬瘟的診斷，該技術(shù)可區(qū)分豬瘟疫苗毒，野毒。
　　當(dāng)前豬瘟依然是危害我國(guó)養(yǎng)豬業(yè)的最重要的疫病之一，最近豬瘟疾病的發(fā)生呈現(xiàn)上升趨勢(shì)，是規(guī)?；i場(chǎng)優(yōu)先防控的主要疾病之一。

　　當(dāng)前豬場(chǎng)豬瘟的防控壓力依然嚴(yán)峻，具有6大特點(diǎn)：流行范圍廣；散發(fā)流行；發(fā)病年齡小，成年豬帶毒現(xiàn)象嚴(yán)重；非典型癥狀和繁殖障礙型豬瘟增多；混合感染嚴(yán)重；免疫失敗現(xiàn)象嚴(yán)重等特點(diǎn)。那么，為了更好的防控豬瘟，精準(zhǔn)、及時(shí)的實(shí)驗(yàn)室診斷尤為重要，主要采用RT-PCR檢測(cè)技術(shù)診斷方法，但存在誤判的風(fēng)險(xiǎn)，需要設(shè)計(jì)更加敏感的診斷方法（如臍帶血、扁桃體檢測(cè)技術(shù)），結(jié)合臨床癥狀進(jìn)行綜合判斷和分析。
　　關(guān)于豬瘟防控，最好的措施是實(shí)現(xiàn)豬瘟的凈化。鑒于發(fā)達(dá)國(guó)家成功消滅豬瘟的方法，結(jié)合國(guó)內(nèi)實(shí)際情況，因地制宜制定適合國(guó)內(nèi)的豬瘟凈化方案，再配合高通量、精準(zhǔn)的豬瘟診斷技術(shù)（如臍帶血、扁桃體檢測(cè)技術(shù)），最終能夠成功實(shí)現(xiàn)豬瘟的凈化。