簡介:

為研制安全有效的PRRSV、PCV2基因工程疫苗，本研究采用RT-PCR方 法擴增了PRRSV主要免疫原性基因ORF3、ORF5。在此基礎上構建了四個含 有PRRSV主要結構蛋白基因ORF5、ORF3和豬IL18基因的重組核酸疫苗質粒 pVAX1-ORF5、pVIR-IL18-ORF5、pVAX1-ORF5-ORF3、pVIR-IL18-ORF5 -ORF3和一個重組雞痘病毒rFPV-IL18-ORF5-ORF3。并構建了兩個共表達 PRRSV和PCV2免疫原性基因的二聯(lián)核酸疫苗pIRES-ORF2-ORF5、pIRES- ORF2-ORF5-ORF3和兩個二聯(lián)重組雞痘病毒rFPV-ORF2-ORF5、rFPV-ORF2- ORF5-ORF3。Western-blotting、IFA、RT-PCR等檢測結果表明，核酸疫苗和重 組雞痘病毒中的目的基因在真核細胞中得到正確表達。小鼠免疫試驗結果表明， 所構建的核酸疫苗和重組雞痘病毒均能有效刺小鼠產生抗PRRSV和PCV2特 異性體液免疫和細胞免疫反應。用PRRSV核酸疫苗pVIR-IL18-ORF5-ORF3和 重組雞痘病毒rFPV-IL18-ORF5-ORF3以及PRRSV-PCV2二聯(lián)核酸疫苗 pIRES-ORF2-ORF5-ORF3和重組雞痘病毒rFPV-ORF2-ORF5-ORF3聯(lián)合免疫 豬，結果表明，核酸疫苗和重組雞痘病毒均能誘導豬產生特異性的體液免疫和 細胞免疫反應，其中以核酸疫苗首免，重組雞痘病毒追加免疫效果最佳。