蛋白消化液測定鈣磷

tony2005428

很感興趣哦
但是還是第一次聽說過
有多少家公司用過此方法，能否介紹一下經(jīng)驗？？？
謝謝

粗蛋白你做過比較，也有這方面的資料，能否貼出來供大家參考一下，謝謝！?。。?！
:huahua: :xuehu:

粗蛋白

04年取化驗上崗證發(fā)的"飼料檢驗化驗員"書上有這種檢測法, 我對比了一下,只是自己所用的催化劑與書上的不一致,  書上是硫酸鉀和硒粉(或雙氧水)作的催化劑,而我用的是硫酸銅與硫酸鉀(1:15), 因此在檢測鈣時加入乙二胺色澤就有一點異常,加入KOH時全變成紫紅色無法進行下去; 然后我又做,加入乙二胺和孔雀石綠后就未加KOH, 色澤已顯熒光,繼續(xù)加鹽酸羥胺和鈣指示劑, 用EDTA滴定,耗了50多毫升標液熒光卻一直不消失......最終用此法測鈣含量以失敗宣告結束. 測磷得出了數(shù)據(jù)但還需繼續(xù)檢測驗證.
     如果有朋友是使用硫酸鉀和硒粉(或雙氧水)作催化劑的,不防做做, 這樣可節(jié)約很多時間的少很多事情!!  書上已給出此法來"快速檢測鈣磷", 我想肯定是行的!!

月亮花

原帖由 dy3166 于 2008-1-5 13:30 發(fā)表
用蛋白消化液測定鈣磷怎么計算？
還有用這種方法測定鈣磷應該注意什么？

大家討論的蛋白消化液是已經(jīng)蒸餾后的（測完氮）還是剛消化完的。如果是前者就比較有意義，如果是后者蛋白質如何測定。另外，整個體系的體積和濃度如何定，需要準確才能算出準確的濃度或含量。如果測鈣用EDTA法不好，能否用沉淀法？但如果使用蒸餾后的，過量堿造成的黑色以及pH偏高對草酸鈣的影響會對結果不利。期待大家找出好方法。

any_wyb

沒做過,請高手來解決了

粗蛋白

飼料中粗蛋白、鈣、總磷的快速測定方法

一，方法原理：在催化劑或氧化劑存在下，用硫酸破壞試樣中的有機物，使含氮化合物轉變成成硫酸銨，鈣、磷以離子形式進入硫酸溶液中，制備成試樣溶液。分取部分溶液用凱氏定氮法測定粗蛋白，分取部分溶液用EDTA法測定鈣，分取部分溶液用釩鉬酸銨法測定磷。
二，試劑與溶液：濃硫酸  硫酸鉀   硒粉  催化劑（硫酸鉀+硒為 1000+1，磨細混勻壓制成3.5克左右的圓餅備用）    過氧化氫(30%)   硼酸溶液(20克/升)    氫氧化鈉(400克/升溶液)    混合指示劑(甲基紅1克/升乙醇溶液與溴甲酚綠5克/升乙醇溶液等體積混合,在陰涼棕色瓶內保存)  0.02mol/l鹽酸標液   蔗糖   硫酸銨  
鹽酸羥胺   氫氧化鉀(20%)  三乙醇胺溶液(1:1)  乙二胺溶液(1:1)   1%淀粉溶液   1克/升孔雀石綠水溶液   鈣黃綠素-甲基百里香酚藍指示劑   乙二胺四乙酸二鈉標準液   鈣標準溶液(0.001克/亳升)   
釩鉬酸銨顯色劑    磷標準溶液   

三，試樣消化:
法1  硫酸、硒催化消化法：稱取樣0.5-1克,無損失的倒入凱氏瓶中,加入3.5克催化劑和12亳升硫酸,在電爐上加熱待泡沫消失后升溫至360-410度,加熱至透明的微黃色,取下冷卻，加20亳升水,轉入100亳升容量瓶中流水冷卻，用蒸餾水稀釋至刻度搖勻為試樣消化液.
法2  過氧化氫、硫酸、硒消化法：稱取樣0.5-1克,無損失的倒入凱氏瓶中,加入3.5克催化劑和12亳升硫酸,10亳升過氧化氫，小心混勻待反應泡沫消失后，置360度左右電爐上消化至透明的微黃色,取下冷卻,加20亳升水,流水冷卻，轉入100亳升容量瓶中，用蒸餾水稀釋至刻度搖勻為試樣消化液.
法3  過氧化氫、硫酸消化法：稱取樣0.5-1克,無損失的倒入凱氏瓶中,加12亳升硫酸,10亳升過氧化氫，小心混勻待泡沫消失后置于升溫至約250度電爐上加熱至硫酸冒煙、溶液呈棕黑色，取上冷卻，補加過氧化氫至溶液呈白色，再加熱，如此反復數(shù)次至高溫下溶液清亮，冷卻,加25亳升水,流水冷卻，轉入100亳升容量瓶中,用蒸餾水稀釋至刻度搖勻為試樣消化液.
四，粗蛋白測定：略
五，鈣的測定：準確移取試樣消化液10-25亳升，加水50亳升，1%淀粉液10亳升，三乙醇胺液2亳升，乙二胺液1亳升，1滴孔雀石綠液，滴加20%氫氧化鉀至無色再過量10亳升，加0.1克鹽酸羥胺,加鈣黃綠素-甲基百里香酚藍指示劑少許,在黑色背景下立即用EDTA標液滴定至綠色熒光消失呈現(xiàn)紫紅色為止,同時作空白.
               計算:Ca%= T*V2*V0*100  /  m*V1
                  T為EDTA標液對鈣的滴定度(克/亳升); m為樣品重(克)
             V0 V1 V2分別為試樣消化液總體積, 分取試樣體積,實際消耗EDTA標液體積(亳升)

六, 磷的測定: 準確移取試樣消化液1-10亳升于50ml容量瓶中，加入釩鉬酸銨顯色劑10ml，定容搖勻,放置10分鐘以上 .以標準空白液為參比,用1cm比色皿在分光光度計上400nm波長下測定試樣液的吸光度.在標準曲線上查得試樣消化液的含磷量。
計算          M1
P%=        ---------------------           *100
                M * V1/V *1000000  
M1——由標準曲線上查出的磷的量，ug  M 為試樣質量 g  
V和 V1 分別為試樣消化液總體積和分取試樣體積 ml

dy3166

真的只有換催化劑才行嗎？

粗蛋白

我用的硫酸銅作催化劑,  鈣含量是無法檢測出, 但磷含量能檢測出.這幾天做了幾個對比樣, 用蛋白消化液檢測的磷比用灰份檢測的磷高0.1% (用的是一個肉鴨料和一個蛋雞料分別作對比試驗)

王天西

在測定過程中加入1%淀粉溶液和孔雀石綠起什么作用,還有鹽酸羥胺又是干什么用的,鈣黃綠素--甲基百里香酚藍指示劑在EDTA滴定前后是怎么反應,顏色為什么是這樣變化的.感激不盡

dy3166

哪天，有位前輩告訴說取樣后加10ml20%KOH溶液，然后再加淀粉、乙二胺、三乙醇胺、KOH等。這樣的話一共就加了20mlKOH，但我做出來后鈣含量還是高。
看來只有在研究了

dy3166

哪天，有位前輩告訴說取樣后加10ml20%KOH溶液，然后再加淀粉、乙二胺、三乙醇胺、KOH等。這樣的話一共就加了20mlKOH，但我做出來后鈣含量還是高。
看來只有在研究了