請(qǐng)高手分析飼用植酸酶活性的檢測(cè)結(jié)果總是很低的原因。

tgz5637

酶制劑檢測(cè)，導(dǎo)致誤差最大的因素就是底物和稀釋倍數(shù)。制定植酸酶行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)的時(shí)候，對(duì)測(cè)定顯色的吸光值線性范圍規(guī)定得很大，這對(duì)測(cè)定未知樣時(shí)，會(huì)造成很大困惑?？梢钥纯催@篇
http://www.jmyingheng.com/   >技術(shù)交流>生物技術(shù)>《酶制劑檢測(cè)的非定義性因素的影響》一文。
  c 指的是回歸方程，這里一般是指一元方程y=ax+b。怎么由標(biāo)準(zhǔn)曲線求回歸方程恐怕你要查看書了。檢測(cè)方法以濃度對(duì)吸光值做圖，得到的c的單位就是umol/ml，以物質(zhì)的量對(duì)吸光值做圖，得到的c的單位就是umol。

如果懷疑試劑有問題，就全部重配重買。
這些只能自己檢查-----pH增加pH精密試紙對(duì)照校正緩沖液、底物溶液。pH電計(jì)用標(biāo)準(zhǔn)液，看看配對(duì)了沒有？顯色劑配對(duì)了沒有？分光光度計(jì)有無(wú)偏差？植酸鈉底物是否有效？同時(shí)注意底物必須現(xiàn)配現(xiàn)用，不能使用超過(guò)12小時(shí)的底物溶液。
其他的可以把做標(biāo)準(zhǔn)曲線的測(cè)定值發(fā)來(lái)本站郵箱，就可知道回歸方程是多少。
    最好找已知酶活的樣品，做平行測(cè)定，可以知道是試劑問題，還是酶本身失活了。

[ 本帖最后由 tgz5637 于 2008-7-5 17:46 編輯 ]

tgz5637

回歸方程數(shù)值偏低，表明做標(biāo)準(zhǔn)曲線時(shí)，同一梯度標(biāo)準(zhǔn)樣液的測(cè)定吸光度值偏大；
查查什么原因?qū)е挛庵灯?？顯色劑配制錯(cuò)誤，分光度計(jì)平時(shí)是否常用，測(cè)其他產(chǎn)品有無(wú)問題？標(biāo)準(zhǔn)曲線至少5個(gè)數(shù)據(jù)點(diǎn)的相關(guān)性，要求達(dá)到 r=0.999。

qinqin0226

很好的學(xué)習(xí)機(jī)會(huì)啊,我本來(lái)也要做這個(gè)實(shí)驗(yàn)的,剛申請(qǐng)了藥品的,現(xiàn)在不用做了，由別人去做了,很有些遺憾哦.

JH_C

底物1%燕麥木聚糖經(jīng)冰凍保存后取出，會(huì)產(chǎn)生沉淀，請(qǐng)問還能繼續(xù)使用嗎？

fangke3546

tgz5637能講講標(biāo)準(zhǔn)曲線的問題嗎
我做出來(lái)的系數(shù)這么與你的相差那么大啊，我的在18左右
另外我想問一下，牛血清白蛋白組分幾對(duì)檢測(cè)好一些？
謝謝

tgz5637

直接把標(biāo)準(zhǔn)曲線數(shù)據(jù)貼上來(lái)看看

關(guān)于標(biāo)準(zhǔn)曲線請(qǐng)看這個(gè)網(wǎng)址。http://www.esnips.com/nsdoc/5426 ... f0a/?action=forceDL

xiaoyanzhu2002

您的確是高手。受教了，非常感謝！

bingerhan

我想請(qǐng)問一下測(cè)植酸酶時(shí)標(biāo)準(zhǔn)曲線怎么繪制？怎樣來(lái)確定它的濃度范圍？酶樣的稀釋倍數(shù)又該如何確定？為什么最后都要使樣液保持在某一個(gè)濃度左右？謝謝！

xiedahai

領(lǐng)教了！請(qǐng)問有沒有市場(chǎng)上幾大植酸酶公司產(chǎn)品的植酸酶活性的檢測(cè)數(shù)據(jù)（不是廠家提供的數(shù)據(jù)）？在此先謝謝了！

默者

酶制劑活性測(cè)定通常有“測(cè)不準(zhǔn)”原理，剛開始做的時(shí)候酶活總是不穩(wěn)定，不過(guò)時(shí)間長(zhǎng)了以后便會(huì)趨于穩(wěn)定