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動(dòng)物的味覺生理及甜味劑的應(yīng)用與研究新進(jìn)展
<<飼料與畜牧>>2006年 第08期
作者: 倪冬嬌, 高增兵, 金立志,
(敬請(qǐng)尊重原創(chuàng)謝謝?。?br />
前 言
隨著生物科技的高速發(fā)展,動(dòng)物的生長(zhǎng)性能較以前有了大大的提高。然而,動(dòng)物的生長(zhǎng)潛能(如豬)還遠(yuǎn)遠(yuǎn)沒有充分發(fā)揮出來。而制約這種潛能發(fā)揮的最基本也是最關(guān)鍵要素之一便是采食量不足。影響動(dòng)物的采食量的因素很多,飼料營(yíng)養(yǎng)濃度、環(huán)境溫度和濕度、健康狀況、飼養(yǎng)密度、以及品種、性別和飼養(yǎng)管理水平都會(huì)不同程度影響動(dòng)物的采食。而飼料的味道更是與動(dòng)物的采食過程有著直接的關(guān)聯(lián)。大量的試驗(yàn)及生產(chǎn)實(shí)踐證明,動(dòng)物尤其是豬、牛等畜產(chǎn)動(dòng)物,具有比人類更敏感的味覺感受系統(tǒng)。因此可以通過研究動(dòng)物的味覺系統(tǒng)的結(jié)構(gòu)及生理調(diào)控機(jī)制,有針對(duì)性地使用動(dòng)物偏好的調(diào)味劑來提高動(dòng)物的采食量,特別是對(duì)疾病、斷奶、換料、熱應(yīng)激及適口性不佳等不利因素導(dǎo)致的采食量不足更具有明顯的效果。飼料具有的酸、甜、苦、咸四種基本的味道都對(duì)適口性和采食量產(chǎn)生不同的影響,我們已對(duì)香味劑的研究及其在動(dòng)物生產(chǎn)上的應(yīng)用進(jìn)行了詳盡的綜述(發(fā)表在《飼料廣角》2005年四月第五期第3-6頁)。本文主要綜述甜味劑的作用機(jī)理及在動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)中的應(yīng)用與研究最新進(jìn)展。
關(guān)鍵詞:味覺 甜味劑 采食量
1 動(dòng)物甜味劑的研究歷史與研究進(jìn)展
據(jù)史料記載,人的甜味劑使用早在公元前2600年,埃及人發(fā)現(xiàn)了蜂蜜就開始了。到14世紀(jì),阿拉伯人發(fā)明了蔗糖精煉方法,隨后傳入到歐洲及世界的其它地方。那時(shí)人們發(fā)現(xiàn),人類天生愛甜,因此食物中添加甜味逐漸普遍起來。到現(xiàn)在,人用的營(yíng)養(yǎng)的和非營(yíng)養(yǎng)的甜味劑品種已多達(dá)上百種,并向功能性方向發(fā)展。與此相比,動(dòng)物用的甜味劑的研究要晚得多。Richter (1940)最早開始用5種不同的糖在小鼠飼料中進(jìn)行偏好試驗(yàn)。Richter (1942)年發(fā)明了雙瓶子飲水偏好試驗(yàn)?zāi)P秃?,甜味劑在?dòng)物飼料中的研究開始引起科學(xué)家和畜牧工作者的廣泛興趣。甜味劑對(duì)豬的飲水和采食的影響的研究也逐見報(bào)導(dǎo)。首先,發(fā)現(xiàn)豬對(duì)蔗糖水具有強(qiáng)烈的偏好,接著,乳糖(Kare 等1965),葡萄糖(Kare 等1965; Kennedy 等1972; Baldwin 等1976),糖精鈉(Aldinger 等1959;Baldwin 等1976; Kennedy 等1972),甜蜜素(Baldwin等1976; Kennedy 等1972),索馬甜(Hellekant 1976)對(duì)豬的偏好試驗(yàn)也先后有了結(jié)果。Le Magnen (1971) 提出了“適口性”(palatability)的概念,強(qiáng)調(diào)了飼料的風(fēng)味對(duì)動(dòng)物采食和偏好有影響。McLaughlin等(1983)設(shè)計(jì)出T字迷宮雙料槽對(duì)比試驗(yàn),用于比較豬對(duì)不同風(fēng)味飼料的偏好,其中對(duì)23種甜味劑作了試驗(yàn),用加甜味劑的飼料與不加甜味劑飼料比較,以加甜味劑飼料的采食量占總采食量的百分比作為判斷依據(jù),55-69% 作為中等-高度偏好;44-54% 為無偏好;28-43% 為中等-高度厭惡。結(jié)果發(fā)現(xiàn)只有1種有高度偏好,4種有中等的偏好,15種沒有偏好,2種輕微厭惡,1種高度厭惡。隨著電生理技術(shù)的應(yīng)用,更多的人用的高甜度的甜味劑被用于豬的試驗(yàn)。阿斯巴甜(Hellekant 等1996),新桔皮二氫查爾酮(NHDC)、阿力甜(Alitame)等(Glaser等2000 ;Danilova等1999)對(duì)豬的試驗(yàn)研究有了結(jié)果,不僅將人用甜味劑與動(dòng)物用甜味劑區(qū)分開來,而且從分子水平分析探討了甜味劑的結(jié)構(gòu)與豬的味覺感覺器上的化學(xué)受體產(chǎn)生化學(xué)鍵結(jié)合才能被豬感受到甜味的可能性。同時(shí),味覺傳導(dǎo)神經(jīng)-鼓索神經(jīng)對(duì)甜味劑刺激的反應(yīng)的實(shí)驗(yàn),從生理機(jī)制方面對(duì)甜味劑的作用機(jī)理作了深入的研究,分析了某些人用的高強(qiáng)度甜味劑不能被豬用的可能原因。此外,甜味劑在體內(nèi)的作用與代謝途徑也有報(bào)導(dǎo)。豬的味覺受體蛋白基因也已被表達(dá)。
2 動(dòng)物的味覺生理-甜味感覺
多年來,人們常常將從某種動(dòng)物研究的生理感覺結(jié)果照搬到另一種不同的動(dòng)物,從蛙類到小鼠到猴子,忽視了種屬特異性導(dǎo)致的感覺差異。近幾十年來,人們漸漸從這種誤解中改變過來,認(rèn)識(shí)到不同種屬的動(dòng)物味覺感受有很大的差異,特別是在甜味感覺上。不同種類的動(dòng)物對(duì)不同的甜味劑的神經(jīng)傳導(dǎo)沖動(dòng)不同。如豬的味覺傳導(dǎo)神經(jīng)對(duì)蔗糖、果糖、葡萄糖的刺激表現(xiàn)出較高的脈沖頻率,而對(duì)A-K糖、糖精、甜蜜素、阿力甜、阿斯巴甜等只有微弱的脈沖或沒有脈沖。猴子和黑猩猩對(duì)上述甜味中除甜蜜素外均表現(xiàn)出較高的脈沖(Hellekant等1996)。這里重點(diǎn)討論豬的味覺系統(tǒng)。Chamirro 等(1993)采用電鏡掃描技術(shù)研究豬的味覺結(jié)構(gòu),豬的舌頭分為四部分,分別為邊緣、中間部、近尾部和后尾部。豬的舌頭上約有5000個(gè)菌狀味蕾,是人類(1600個(gè))的3倍以上,主要分布在舌頭邊緣和后尾部;有10,000以上個(gè)杯狀味蕾,而人類只有約6000個(gè);4800個(gè)葉狀味蕾,人類約有3000個(gè)。可見,豬的味蕾數(shù)是人的3-4倍。已有研究發(fā)現(xiàn),人的菌狀味蕾數(shù)與味覺能力呈正相關(guān)(Miller 等1990; Bartoshuk等1996) , 其它動(dòng)物也有類似的結(jié)果??梢?,豬的味覺比人要敏感得多。每個(gè)味蕾由50-150個(gè)味覺細(xì)胞組成,味蕾頂部有微茸毛,分布在舌頭粘膜表面。外來的化學(xué)物質(zhì)溶解并分散在舌粘液中,與微茸毛上的味覺受體蛋白結(jié)合。每個(gè)味蕾至少包含對(duì)酸、甜、苦、咸四種味道中的一種以上的味道敏感的細(xì)胞,而每個(gè)味覺細(xì)胞只能感受一種味道刺激。每個(gè)味覺細(xì)胞通過神經(jīng)突觸與感覺神經(jīng)連接,味蕾表面有許多小孔,在舌頭的表面張開,是感受味道的第一步,側(cè)部的味蕾上小孔最多,是味覺最敏感的部位。由菌狀味蕾感受到的味覺受鼓索神經(jīng)(CT)支配,位置分部最廣泛,能完整地感覺到酸、甜、苦、咸四種味道(Kitchell, 1963; Hellekant 1976; Hellekant 等1996),杯狀味蕾和葉狀味蕾分布在舌頭的脊部和脊外側(cè),受舌咽神經(jīng)(NG)支配。通過記錄這兩類神經(jīng)的脈沖,可以推導(dǎo)味覺感受的強(qiáng)弱。體外試驗(yàn)表明,鼓索神經(jīng)對(duì)甜敏感,舌咽神經(jīng)對(duì)苦敏感,兩種神經(jīng)均對(duì)谷氨酸鈉和蔗糖、果糖、葡萄糖等甜味物質(zhì)敏感,而對(duì)索馬甜、NHDC沒有反應(yīng),對(duì)糖精鈉則反應(yīng)較弱(Danilova 等1999)。
3 甜味劑的在提高動(dòng)物采食量和飲水量上的應(yīng)用
和人類相似,豬也天生愛甜(Kennedy等1972 ;Mathews等1979)。多年來,甜味劑已被添加到飼料中以提高飼料適口性。以前,當(dāng)沒有其他可選擇的甜味物質(zhì)時(shí),主要使用蔗糖、葡萄糖或乳糖。如果甜味劑僅僅用作甜味來源時(shí),必須在飼料中添加3—5%的糖,這樣成本太高。而且,大量使用糖能增加腹瀉(Christina Hof 2000)。因此,僅以蔗糖作為甜味劑并不是理想的選擇。其實(shí),早在四十多年前,糖精已作為一種豬用甜味劑開始在飼料中應(yīng)用,并取得了一定的效果。Alidigner等(1959,1961)在仔豬料中添加一定劑量的糖精,豬的采食量、日增重顯著提高,飼料轉(zhuǎn)化率有一定改善。現(xiàn)在,經(jīng)過修飾去掉金屬尾味的糖精鈉已作為一種性價(jià)比最合適的甜味劑運(yùn)用到豬飼料和飲水中。與西班牙樂達(dá)集團(tuán)公司研發(fā)部合作,Torrallardona(2000)采用雙料槽試驗(yàn),在21日令斷奶仔豬和小豬料中分別添加150ppm糖精鈉及糖精鈉與不同風(fēng)味的香味劑同時(shí)添加的試驗(yàn)。結(jié)果發(fā)現(xiàn),與不添加調(diào)味劑的對(duì)照組相比,僅添加糖精鈉不能提高采食量,而糖精鈉與奶酪味、野草莓味、櫻桃-蜜糖等風(fēng)味同時(shí)添加,采食量提高30%以上。Belgium(1993)作了類似的試驗(yàn)。在22-49kg和76-107kg階段的生長(zhǎng)豬和肥育豬分別只加糖精鈉(對(duì)照組)和糖精鈉與香草風(fēng)味或輕微辣味的香味劑(試驗(yàn)組)同時(shí)添加對(duì)比,結(jié)果,同時(shí)添加糖精鈉和香味劑組比僅添加糖精鈉組相對(duì)采食量大大提高。這些研究得出的一致結(jié)論是:直接在飼料添加糖精鈉,其誘食效果非常有限而且不穩(wěn)定(可能與糖精鈉的混合性均勻性不好有關(guān))。將糖精鈉進(jìn)行修飾除去處理金屬尾味并與適當(dāng)?shù)南阄秳┖嫌貌拍芷鸬矫黠@的誘食效果(詳見圖1至圖2)。牛對(duì)不同甜味劑的試驗(yàn)結(jié)果與豬的相似。Hellekant等(1994)作了研究,試驗(yàn)選用4-16周令的小牛, 雙飲水槽自由飲水,比較不同濃度的乳糖、果糖、蔗糖、葡萄糖等碳水化合物甜味劑和阿斯巴甜、A-K糖、糖精鈉等非碳水化合物甜味劑對(duì)小牛飲水量的影響。結(jié)果發(fā)現(xiàn),小牛對(duì)高于40mM的果糖和乳糖有一定偏好,對(duì)低于0.4mM的糖精鈉無偏好,對(duì)0.4-2.0mM 的糖精鈉有微弱的偏好。對(duì)任何濃度的阿斯巴甜均無偏好。對(duì)A-K糖的偏好表現(xiàn)不穩(wěn)定。
牛的鼓索神經(jīng)對(duì)不同甜味劑的反應(yīng)與豬非常相似。Hard等1989用果糖、蔗糖、乳糖、葡萄糖及A-K糖、阿斯巴甜、糖精鈉、索馬甜等作了與豬類似的實(shí)驗(yàn)。結(jié)果表明,小牛對(duì)糖精鈉有一定反應(yīng),對(duì)阿斯巴甜有微弱的反應(yīng),對(duì)索馬甜沒有反應(yīng),對(duì)碳水化合物類甜味劑有較好的反應(yīng)。
Glaser 等(2000),Nofre等(2002)分別對(duì)人用的33種和60種營(yíng)養(yǎng)性和非營(yíng)養(yǎng)性的甜味劑作了豬的雙飲水糟飲水對(duì)比試驗(yàn)。結(jié)果見表1,并總結(jié)出了不同甜味劑對(duì)人和對(duì)豬的相對(duì)甜度,表2。圖1 生長(zhǎng)豬(22-49kg)對(duì)甜味劑的偏好(Belgium,1993)
注:相對(duì)采食量 =各組采食量占總的采食量的百分比
圖2 肥育豬(76-107kg)對(duì)甜味劑的偏好(Belgium 1993)
注:相對(duì)采食量 =各組采食量占總的采食量的百分比
從表1中可以看出,不同種類不同濃度的甜味劑對(duì)人和豬的結(jié)果差異很大。對(duì)碳水化合物類甜味劑如蔗糖,濃度為5g/l時(shí),全部豬都偏愛,當(dāng)濃度下降到2.5g/l時(shí),18頭豬中只有10頭豬偏好??梢?,豬對(duì)甜味劑的偏好不僅與甜味劑的種類有關(guān)同時(shí)也與濃度有關(guān)。豬對(duì)甜度的偏好有一定有濃度,低于感受的臨界值和高于最大容忍濃度都將無偏好甚至厭惡。非碳水化合物類甜味劑中,對(duì)濃度為0,10g/l的阿力甜、0.35g/l的A-K糖和0.80g/l的糖精鈉有偏好,對(duì)任何濃度的阿斯巴甜、NHDC、甜蜜素、索馬甜均沒有偏好。此外,Danilova 等( 1999)用不同的溶液作了甜味劑對(duì)1-7周令的仔豬刺激的體外試驗(yàn)。試驗(yàn)采用不同的甜味劑直接作用于豬的舌頭上和味蕾,然后檢測(cè)鼓索神經(jīng)反應(yīng)強(qiáng)度及脈沖波。部分結(jié)果見圖3 。
5 甜味劑作用的機(jī)理探討
為什么某些對(duì)人能產(chǎn)生甜味感覺的甜味劑對(duì)豬等動(dòng)物并不能產(chǎn)生反應(yīng)?Nofre等 (1996)對(duì)不同甜味劑的分子結(jié)構(gòu)與豬的甜味受體蛋白分子結(jié)構(gòu)作了詳細(xì)的分析比較。這里著重選擇非碳水化合物類甜味劑進(jìn)行分析。阿斯巴甜,對(duì)豬沒有反應(yīng),其它哺乳動(dòng)物如大頰鼠類(Danilova等1998),小鼠(Hellekant等1992),牛(Hellekant 等1994)均對(duì)任何濃度阿斯巴甜不產(chǎn)生反應(yīng)。從分子結(jié)構(gòu)上分析,根據(jù)多位點(diǎn)接觸理論(MPA)(Nofre等1996),人的甜味受體蛋白至少有8個(gè)結(jié)合位點(diǎn),圍繞在受體周圍,這些位點(diǎn)分別是天冬氨酸或谷氨酸殘基為第1位點(diǎn),賴氨酸殘基為第2位點(diǎn),另一個(gè)天冬氨酸或谷氨酸殘基為第3位點(diǎn),第4、5、6、7位點(diǎn)均是蘇氨酸基,第8位點(diǎn)是絲氨酸殘基。這8個(gè)位點(diǎn)剛好能與阿斯巴甜產(chǎn)生化學(xué)鍵結(jié)合,因而人能強(qiáng)烈感受到甜味。而豬等其它哺乳類動(dòng)物甜味受體蛋白第5位上的蘇氨酸被絲氨酸或丙氨酸取代,絲氨酸或丙氨酸殘基與阿斯巴甜分子上的苯環(huán)空間位點(diǎn)發(fā)生沖突,受體蛋白不能被激活,因此不能產(chǎn)生反應(yīng)。
對(duì)甜蜜素而言,至今為止,發(fā)現(xiàn)對(duì)人具有甜度的甜蜜素對(duì)豬(Kenney等1972;Baldwin等1976;Glaser等2000)、大頰鼠(Danilova等1998; Frank等1996)、貓(Maller等1977)均不能產(chǎn)生甜感反應(yīng)。根據(jù)MPA理論,人的甜味受體分子中,位于第4位上的蘇氨酸基后的第6位上的蘇氨酸與第10位上的纈氨酸基之間形成的空間結(jié)構(gòu)能與甜蜜素分子中的環(huán)己基團(tuán)產(chǎn)生結(jié)合。而豬的甜味受體第10位上的纈氨酸基被丙氨酸取代,可能抑制了甜蜜素分子上的環(huán)己基對(duì)受體蛋白的激活,因此不能產(chǎn)生甜味反應(yīng)(Glaser 等2000)。
糖精鈉對(duì)豬產(chǎn)生的反應(yīng)比人的弱18-120倍,可能是豬的甜味受體蛋白第9位上的蘇氨酸與人的不同,使糖精鈉與受體蛋白的空間相互作用較弱,其它甜味劑如NHDC、索馬甜、阿力甜等對(duì)豬沒有反應(yīng)或產(chǎn)生比人弱得多的反應(yīng),可能也是由于它們的分子不能與豬的甜味受體蛋白產(chǎn)生足夠的空間相互作用。這種分子結(jié)構(gòu)上的差異可能由于種屬遺傳所致。
盡管有關(guān)甜味劑作用的詳細(xì)生理機(jī)制尚在研究中,目前的研究成果表明,甜味劑是否對(duì)豬有反應(yīng),與受體蛋白分子上的蘇氨酸殘基的不同有密切的關(guān)系(Glaser 等2000)。
6 影響甜味劑效果的理化因素
影響甜味劑效果的因素主要包括:甜味劑使用濃度
及其理化性質(zhì),目標(biāo)動(dòng)物等。Schiffman等(2000)作了溫度、pH、離子對(duì)甜味劑的影響研究。試驗(yàn)選擇不同溫度(500 C和60C)不同pH(pH3.0, 4.0, 5.0, 6.0, 7.0)和不同離子濃度(5Mm Na+, 5Mm K+, 5Mm Ca2+ ) 對(duì)不同濃度的蔗糖、果糖、葡萄糖、阿力甜、阿斯巴甜、A-K糖、糖精鈉、甜蜜素、索馬甜、NHDC的甜度的影響。結(jié)果表明,溫度對(duì)甜度有一定的影響,大多數(shù)情況下,高溫時(shí)濃度增強(qiáng),低溫時(shí)甜度降低。如蔗糖在2.5倍甜度時(shí), 在500C時(shí)甜度為3.54;在60C時(shí)甜度為2.26;非碳水化合物甜味劑也基本如此,但糖精鈉卻表現(xiàn)相反趨勢(shì),在2.5倍甜度時(shí), 500C甜度為2.61;60C甜度為2.04; 在5.0倍甜度時(shí), 500C甜度為4.05;60C時(shí)甜度為4.7 ,溫度越高甜度反而下降。
甜味劑的甜味與苦味之間有著密切的關(guān)系。許多單一的化合物甜味劑具有甜味和苦味兩種味道。Schiffman等(1995)作了甜味劑濃度與甜度和苦味的關(guān)系試驗(yàn)。由16位專業(yè)的評(píng)味師對(duì)19種高度和低度甜味劑,包括A-K糖、阿力甜、阿斯巴甜、NHDC、甜蜜素、糖精鈉、索馬甜、果糖、葡萄糖、蔗糖等的不同濃度的味道進(jìn)行評(píng)定。結(jié)果發(fā)現(xiàn),高甜度的甜味劑如A-K糖,NHDC,甜蜜素、糖精鈉、索馬甜等隨著濃度增加,苦味越來越苦,而低甜度的甜味劑如蔗糖、果糖、乳糖等苦味沒有增強(qiáng)。
此外,不同味道之間也會(huì)產(chǎn)生相互作用。Bartoshuk 等(1974)對(duì)酸、甜、苦、咸四種味道的互作作了研究 (見圖4)。從圖中可以看出,四種風(fēng)味之間存在互作關(guān)系。以酸味作基礎(chǔ)味道時(shí),單獨(dú)加甜、加咸、加苦均能降低酸度,而結(jié)合起來添加,酸度又升高。以苦味作為基礎(chǔ)味道時(shí),單獨(dú)加甜、加咸、加酸或結(jié)合添加均能降低苦度。由此可見,飼料中的苦味能被甜味劑掩蓋,這也許是甜味劑提高采食量的原因之一。
7 結(jié)論與展望
7.1 動(dòng)物尤其是豬對(duì)甜味劑的感應(yīng)上與人具有顯著不同。對(duì)人敏感的高甜度的非碳水化合物類的甜味劑對(duì)豬卻并不能產(chǎn)生同樣的反應(yīng)。其原因可能與豬的甜味受體蛋白上的蘇氨酸殘基發(fā)生變異有關(guān)。
7.2 非碳水化合物類甜味劑如糖精鈉對(duì)豬的誘食效果較低, 而經(jīng)過修飾除去金屬尾味并與適當(dāng)?shù)南阄秳┖嫌貌拍芷鸬矫黠@的誘食效果;我們至發(fā)稿日尚沒在動(dòng)物科學(xué)雜志上檢索到其它高濃度的甜味劑如NHDC、索馬甜、阿斯巴甜、甜蜜素等與糖精鈉相比,對(duì)豬采食量產(chǎn)生相同的效果的報(bào)道。
7.3 盡管甜味劑在動(dòng)物飼料中作為誘食劑已有多年的歷史,且越來越普遍。然而,甜味劑對(duì)不同階段的豬的合適的甜度以及甜味劑與飼料中其它原料如魚粉、豆粕、油脂、維生素、礦物質(zhì)及藥物添加劑之間的相互影響以及甜味劑的作用機(jī)理還需要進(jìn)一步深入研究。
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