飼料營養(yǎng)成分的測定（看看對你是否有用）

lzm_001 · 發(fā)表于 2011-6-30 06:44:58

1、飼料中水分的測定
飼料中的水分存在形式有兩種，一是游離水（又叫初水），二是吸附水。因此水分的測定一般包括初水和吸附水的測定，總水的計算。有些飼料如子實、糠麩類飼料和秸桿、干草等都處于風(fēng)干狀態(tài)，因此只測吸附水（也就是總水），不測初水和計算總水分的含量。
1.1 初水分的測定
1.1.1 儀器設(shè)備
工業(yè)天秤，電熱式恒溫烘箱，剪刀，粉碎機(jī)，樣本瓶，藥匙，培養(yǎng)皿，篩子。
1.1.2 測定原理
含水分高的新鮮飼料在60-65℃烘箱中烘干至恒重，逸失的重量即為初水。
1.1.3 測定步驟
取平均樣品200-300g，置于已知重量的培養(yǎng)皿中，先在80℃條件下，烘15min，然后放在60-65℃的烘箱中，進(jìn)行干燥，干燥到樣品容易磨碎（5-6h）。將烘干的樣品放在室內(nèi)自然的條件下冷卻4-6h（不少于2h），便成為風(fēng)干狀態(tài)。稱重：重復(fù)上述操作，直到兩次稱重之差不超過0.5g為止。
1.1.4計算：
初水分=烘干前后重量之差/鮮樣品重*100%
1.2 吸附水分測定（干物質(zhì)測定）
1.2.1 測定原理
在105℃±2烘箱內(nèi)，在大氣壓下烘干，直至恒重，逸失的重量為試樣吸附水分。在該溫度下干燥，不僅飼料中的吸附水被蒸發(fā)，同時一部分膠體水分也被蒸發(fā)，另外還有少量揮發(fā)油揮發(fā)。
1.2.2 儀器設(shè)備
稱量瓶，烘箱，藥匙，干燥器（用氯化鈣或變色硅膠作干燥劑），分析天平，坩堝鉗，小毛刷。
1.2.3 測定步驟
潔凈的稱量瓶，在105℃烘箱中烘1h，取出，在干燥器中冷卻30min ，稱重，準(zhǔn)確至0.0002g。重復(fù)以上動作，直至兩次重量之差小于0.0005g為恒重。在已知重量的稱量瓶中稱取兩份平行試樣，每份2-5g（含水重0.1g以上，樣厚4mm以下），準(zhǔn)確至0.0002g，稱量瓶不蓋蓋，在105℃烘箱中烘3h（溫度到達(dá)105℃開始計時），取出，蓋好稱量瓶蓋，在干燥器中冷卻30min，稱重，再同樣烘干1h，冷卻，稱重，直到兩次重量差小于0.0002g。
1.2.4 測定結(jié)果的計算
1.2.4.1 計算公式見下式：
水分=（W1-W2）/（W1-W0）*100%
式中：W1為烘干前試樣及稱量瓶重（g）；W2為105℃烘干后試樣及稱量瓶重（g）；W0為已恒重的稱量瓶重（g）。
1.2.4.2 重復(fù)性：每個試樣應(yīng)取兩個平行樣進(jìn)行測定，以其算術(shù)平均值為結(jié)果。兩個平行樣測定值相差不得超過0.2%，否則重做。
精密度：含水量在10%以上，允許相對偏差為1%；含水量在5-10%時，允許相對偏差為3%,含水量在5%以下時，允許相對偏差為5%。
相對偏差=每個平行測定結(jié)果與兩次平行測定結(jié)果平均值之差/兩次平行測定結(jié)果平均值。
1.2.5 注意事項
1.2.5.1 加熱時樣本中有揮發(fā)物質(zhì)可能與樣本中水分一起損失，例如青貯料中的VFA。
1.2.5.2 某些含脂肪高的樣品，烘干時間長反而增重，為脂肪氧化所致，應(yīng)以增重前那次重量為準(zhǔn)。
1.2.5.3 含糖分高的易分解或易焦化試樣，應(yīng)使用減壓干燥法(70℃，600mm汞柱以下，烘干5h 測定水分)。
1.3 SC69-02C型水分快速測定儀
1.3.1 原理:使試樣受紅外線輻射波的熱能后，游離水分迅速蒸發(fā)后，即能通過儀器上的光學(xué)投影裝置直接讀出試樣物質(zhì)含水率的百分比。
1.3.2 操作步驟
1.3.2.1 干燥預(yù)熱：預(yù)熱5分鐘，關(guān)燈冷卻至常溫。
1.3.2.2 開燈20分鐘后，用10g砝碼校正零點。在加碼盤中放置5克砝碼，并在天平或儀器上稱取試樣5g。
1.3.2.3 加熱測試：開啟紅外燈，對試樣進(jìn)行加熱，在一定的時間后刻度移動靜止，表示水分蒸干，記錄讀數(shù)即為水分?jǐn)?shù)。
1.3.2.4 取下被測物和砝碼。
1.4 飼料總水分的計算
飼料分析結(jié)果，通常都用風(fēng)干狀態(tài)樣本的百分含量表示。為了將這些數(shù)字換算成原始飼料或絕干飼料的百分含量，必須計算總水分。
計算公式：OB=Y+(100-Y)*X/100
式中：OB為飼料中總水分的百分?jǐn)?shù)；Y為初水分的百分?jǐn)?shù)；X為吸附水百分?jǐn)?shù)。
2 飼料中粗蛋白質(zhì)的測定
2.1 國標(biāo)法
2.1.1 測定原理
凱氏法測定試樣含氮量，即在催化劑存在下，用硫酸破壞有機(jī)物，使含氮物轉(zhuǎn)化成硫酸銨。加入強(qiáng)堿并蒸餾使氨逸出，用硼酸吸收后，用標(biāo)準(zhǔn)鹽酸滴定測得含氮量，乘以氮與蛋白質(zhì)的換算系數(shù)6.25，計算粗蛋白質(zhì)含量。
2.1.2 儀器設(shè)備
樣品粉碎機(jī)，常量直接蒸餾裝置或半微量水蒸汽蒸留裝置，凱氏燒瓶（100或150ml），三角瓶（150或250ml），洗瓶（500ml），酸式滴定管（25ml），移液管（10ml），消化電爐。
2.1.3 試劑及配制
2.1.3.1 濃硫酸：比重1.84。
2.1.3.2 硫酸銅、硫酸鉀或硫酸鈉。
2.1.3.3 40%NaOH溶液：40gNaOH溶于100ml蒸餾水中。
2.1.3.4 標(biāo)準(zhǔn)硫酸胺：優(yōu)級純于105℃烘1-2h，干燥器內(nèi)冷卻備用。
2.1.3.5 2%硼酸溶液：2g硼酸溶于100ml蒸餾水中。
2.1.3.6 0.1mol/L鹽酸：8.3mlHCL，加蒸餾水定容于1000ml 容量瓶中，混合均勻標(biāo)定。
2.1.3.7 甲基紅-溴甲酚綠混合指示劑：0.1%甲基紅酒精溶液與0.5%溴甲酚綠酒精溶液，兩溶液等體積混合，陰涼處保存3個月以內(nèi)。
2.1.3.8 鹽酸溶液的標(biāo)定：基準(zhǔn)物無水碳酸鈉于270-300℃灼燒1h至恒重，稱0.2g(準(zhǔn)至0.0002g)，溶于50ml蒸餾水中，加2滴指示劑，用HCL溶液滴定至灰紅色。
C(HCL)=W(Na2CO3)/0.053V(HCL)
2.1.4 測定步驟
2.1.4.1 試樣的消化
取0.5-1g試樣（含氮量5-80mg），準(zhǔn)確至0.0002g，無損地放入凱氏燒瓶中，加入0.4g硫酸銅、6g硫酸鉀，與試樣混合均勻，再加濃硫酸10ml和2粒玻璃球。把凱氏燒瓶放在通風(fēng)柜里的電爐上小心加熱，待樣品焦化，泡沫消失，再加大火力（360-410℃），直至全部內(nèi)容物呈透明的淺藍(lán)色或白色為止。
試劑空白測定：另取凱氏燒瓶一個，加入0.4g硫酸銅、6g硫酸鉀，再加濃硫酸10ml和2粒玻璃球。加熱消化至瓶內(nèi)溶液澄清。
另稱量標(biāo)準(zhǔn)硫酸銨0.2g，同時按上述方法處理。結(jié)果應(yīng)為21.19±0.2%。
2.1.4.2 氨的蒸餾
2.1.4.2.1 常量直接蒸餾法
待試樣消化液冷卻，加蒸餾水60-100ml，搖勻，冷卻。沿瓶壁小心加入50mlNaOH 溶液，立即與蒸餾裝置相連，蒸餾裝置冷凝管的末端應(yīng)浸入25ml硼酸吸收液1cm。加混合指示劑2滴，輕搖凱氏燒瓶，使溶液混勻，加熱蒸餾。直至餾水液體積約150ml。先將吸收液取下，再停止加熱。
2.1.4.2.2 半微量水蒸汽蒸餾法
待試樣的消化液冷卻，加蒸餾水20ml，移入100ml容量瓶，冷卻后用水稀釋至刻度，搖勻，為試樣分解液。取20ml硼酸溶液，加混合指示劑2滴，使半微量裝置的冷凝管末端浸入此溶液。準(zhǔn)確移取試樣分解液10-20ml，注入蒸餾裝置的反應(yīng)室中，用少量蒸餾水沖洗進(jìn)樣入口，塞好入口玻璃塞，再加10mlNaOH溶液，小心拉起玻璃塞使之進(jìn)入反應(yīng)室，將玻璃塞塞好，且在入口處加水封好，防止漏氣，蒸餾4min，使冷凝管末端離開吸收液面，再蒸餾1min，用蒸餾水洗冷凝管末端，洗液均流入吸收液。
注：上述兩種蒸餾法測定結(jié)果相近，可任選一種。
2.1.4.3 滴定
吸收氨后的吸收液立即用0.1mol/L鹽酸標(biāo)準(zhǔn)液滴定，溶液由藍(lán)綠色變?yōu)榛壹t色即為終點。將試劑空白測定之消化液和測回收率的硫酸銨的消化液同樣處理。
2.1.5 測定結(jié)果計算
2.1.5.1 計算公式
粗蛋白質(zhì)= C(V1-V2)*0.014*6.25/(WV3/V)*100%
式中：C為HCL標(biāo)準(zhǔn)液的濃度(mol/L)；W為樣本重（g）；V1為滴定樣品時所用HCL標(biāo)準(zhǔn)液體積數(shù)（ml）；V2為空白滴定所用鹽酸標(biāo)準(zhǔn)液體積數(shù)（ml）；V為試樣分解液總體（ml）；V3為試樣分解液蒸餾用體積（ml）；0.014為氮的毫克當(dāng)量；6.25為氮換算成蛋白質(zhì)的平均系數(shù)。
2.1.5.2 重復(fù)性
每個試樣取兩平行樣進(jìn)行測定，以其算術(shù)平均值為結(jié)果。當(dāng)CP含量在25%以上，允許相對偏差為1%；當(dāng)CP含量在10-25%，允許相對偏差為2%；當(dāng)CP含量在10%以下，允許相對偏差為3%。
2.2凱氏定氮儀法
2.2.1 儀器及試劑準(zhǔn)備
同仲裁法
2.2.2 操作步驟
2.2.2.1 消化前準(zhǔn)備
2.2.2.1.1將抽氣泵的螺口同水咀的內(nèi)螺紋聯(lián)接牢，然后將毒氣罩上的膠管一頭接在抽氣泵的橫出口處，抽氣泵下端用膠管能止下水道（注：出水膠管長度不得超出30cm并不準(zhǔn)彎曲），開足水咀，使抽氣泵有足夠的吸力。
2.2.2.1.2 接通消化爐上的電源插座，開電源開關(guān)。
2.2.2.2 消化操作
2.2.2.2.1稱取0.3-1g試樣、液體2-5ml（含氮量5-80mg）準(zhǔn)確到0.0002，干凈無損失地轉(zhuǎn)入清洗干凈的消化、加入催化劑6.4g再加入濃硫酸8-25ml。
2.2.2.2.2 將裝有試樣的消化管放在消化爐支架上，蓋上毒氣罩，向下壓緊毒氣罩鎖牢兩面鎖鉤。
2.2.2.2.3 手提毒氣罩中間連同裝有試樣的消化管一起移到電熱爐上保持消化管在電爐中心，開始樣品消化，保持消化管中液體連續(xù)沸騰　，沸酸在瓶頸部下冷凝回流。待溶液消煮至無微小碳粒、呈蘭綠色時繼續(xù)消煮30-40min。
2.2.3 蒸餾
2.2.3.1 蒸餾前準(zhǔn)備
2.2.3.1.1儀器保持目測水平
2.2.3.1.2 接通進(jìn)水口、排水口，注意　排水膠管出水口，不得高于儀器底平面，同時關(guān)閉排水閥門。
2.2.3.1.3 接通電源　，電源線必須有良好的接地線，時時必須保持同儀器相同，禁止接地借用零線，再檢查電源是否牢靠。
2.2.3.2 蒸餾操作
2.2.3.2.1 先于電源總開關(guān)后開自來水龍頭，使自來水經(jīng)過給水口分別進(jìn)入冷凝管和穩(wěn)壓泵，由穩(wěn)壓泵對蒸汽發(fā)生爐供水并進(jìn)行汽的穩(wěn)壓。注意水流量以保證冷凝管起到冷卻作用并預(yù)熱15分鐘。
2.2.3.2.2 開蒸餾開關(guān)，待蒸汽導(dǎo)出管放出蒸汽時，關(guān)閉蒸汽開關(guān)，從觀察窗觀察待蒸發(fā)爐水位穩(wěn)定（水位保持在電極底部）。
2.2.3.2.3 在接收瓶托架上，放上已經(jīng)加入適量（15ml）接收液（硼酸和混合批示劑）的錐形瓶，使蒸餾導(dǎo)出管未端浸入接收液中。
2.2.3.2.4 按下消化管托架將消化好并冷卻后的消化管，單個套在防濺管的密封圈上稍加旋轉(zhuǎn)，其保持接口密封，抬上托架，關(guān)上防護(hù)罩。
2.2.3.2.5 開蒸餾水開關(guān)，加蒸餾水約10ml左右，再加堿液開關(guān)，加適量NaOH溶液至蒸餾液堿性顏色變黑為止。
2.2.3.2.6開抽吸開關(guān)，抽出消化管內(nèi)殘存廢液，然后關(guān)抽吸開關(guān)，開蒸餾開關(guān)至蒸汽清洗約1min后關(guān)蒸餾開關(guān)，取下消化管，按上步驟可連續(xù)蒸餾。
2.2.4 滴定
吸收氨后的吸收液，用標(biāo)定后的鹽酸溶液進(jìn)行滴定，溶液由蘭綠色變?yōu)榛易仙珵榻K點。
2.2.5 空白測定
用0.1g糖代替樣品或不加樣品作空白測定。
2.2.6 測定結(jié)果計算
2.2.6.1計算公式
粗蛋白質(zhì)%=(V2-V1)*C*0.014*6.25/W*100
式中：V2---滴定試樣時消耗酸標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積（ml）
V2---滴定空白時消耗酸標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積（ml）
C---酸標(biāo)準(zhǔn)溶液的mol/L濃度
W---度樣質(zhì)量
2.2.6.2平等測定的結(jié)果用算術(shù)平均值表示，保留小數(shù)后二位。
2.3 飼料中真蛋白質(zhì)的測定
2.3.1 原理
蛋白質(zhì)在一定堿性條件下，能與重金屬鹽類發(fā)生鹽析作用而析出沉淀，此沉淀物不溶于熱水，而非蛋白氮則易溶于水中。用熱水洗沉淀，將水溶性含氮物洗去，剩下的沉淀再測蛋白，得出真蛋白質(zhì)的含量，用真蛋質(zhì)與粗蛋白質(zhì)含量之比(蛋白質(zhì)比率)，可判斷出魚粉中是否摻入水溶性非蛋白含氮物質(zhì)。
魚粉真蛋白質(zhì)比率與指標(biāo)：進(jìn)口魚粉中真蛋白質(zhì)比率不得小于80%，國產(chǎn)魚粉中真蛋白質(zhì)比率不得小于75%。
2.3.2 儀器設(shè)備
樣品粉碎機(jī)，常量直接蒸餾裝置或半微量水蒸汽蒸留裝置，凱氏燒瓶（100或150ml），三角瓶（150或250ml），洗瓶（500ml），酸式滴定管（25ml），移液管（10ml），消化電爐，中速定性濾紙，表面皿，玻璃棒，漏斗。
2.3.3 試劑與溶液
2.3.3.1 濃硫酸：比重1.84。
2.3.3.2 硫酸銅、硫酸鉀或硫酸鈉。
2.3.3.3 40%NaOH溶液：40gNaOH溶于100ml蒸餾水中。
2.3.3.4 標(biāo)準(zhǔn)硫酸胺：優(yōu)級純于105℃烘1-2h，干燥器內(nèi)冷卻備用。
2.3.3.5 2%硼酸溶液：2g硼酸溶于100ml蒸餾水中。
2.3.3.6 0.1mol/L鹽酸：8.3mlHCL，加蒸餾水定容于1000ml 容量瓶。
2.3.3.7 硫酸銅水溶液：100g/L。
2.3.3.8 25g/L NaOH溶液：25gNaOH溶于1000ml蒸餾水中。
2.3.3.9 氯化鋇試液：50g/L氯化鋇水溶液。
2.3.4 樣品選取與制備
同仲裁法
2.3.5 測定步驟
2.3.5.1 試樣的處理：稱取試樣1-2克(精確至0.0001g)于200ml燒杯中，加水50ml煮沸，加入10%的硫酸銅溶液20ml和2.5%的氫氧化鈉溶液20ml，邊加邊攪拌，加完后繼續(xù)攪拌1min，放置1小時以上或靜置過夜，沉淀物以中速定性濾紙過濾，用70℃以上熱水反復(fù)洗殘渣，直至濾液無硫酸根離子為止(取5%氯化鋇試液5滴于表面皿中，加2mol/L鹽酸1滴，滴入濾液，在黑色背景處觀察應(yīng)無白色沉淀)。將濾紙與殘渣包好，放入烘箱，在65-75℃干燥2h.
2.3.5.2試樣的消化：將烘干的試樣連同濾紙一起放入消化管中，以下操作同仲裁法或凱氏定氮儀法。
2.3.6 結(jié)果計算
2.3.6.1 計算公式
粗蛋白質(zhì)與真蛋白質(zhì)含量計算方法同仲裁法或凱氏定氮儀法。
真蛋白質(zhì)比率(%)=真蛋白質(zhì)含量/粗蛋白質(zhì)含量*100
2.3.6.2 重復(fù)性
蛋白質(zhì)含量在40%以上時允許相對平均偏差2%；
蛋白質(zhì)含量在40%以下時允許相對平均偏差2.5%。
3 飼料中粗脂肪的測定
飼料脂肪的測定，通常是將試樣放在特制的儀器中，用脂溶性溶劑（乙醚、石油醚、氯仿等）反復(fù)抽提，可把脂肪抽提出來，浸出的物質(zhì)除脂肪外，還有一部分類脂物質(zhì)也被浸出，如游離脂肪酸、磷脂、蠟、色素以及脂溶性維生素等，所以稱為粗脂肪。
測定粗脂肪的方法常用的有油重法、殘余法、浸泡法等。
3.1粗脂肪測定儀法
3.1.1 儀器和用具
3.1.1.1 分析天平：感量0.0001g
3.1.1.2 實驗室用粉碎機(jī)或研缽
3.1.1.3干燥箱
3.1.1.4備有變色硅膠的干燥器
3.1.1.5脫脂棉、廣口瓶、脫脂細(xì)紗、脫脂線
3.1.1.6脂肪測定儀及用具
3.1.1.7濾紙筒：用直徑125mm圓形濾紙摺成外徑24mm左右，長度50mm左右的濾紙筒
3.1.2 試劑
無水乙醚，AR級
3.1.3 操作步驟
3.1.3.1 檢查電源　上否完好，水源是否接牢，開電源開關(guān)，設(shè)定溫控儀和調(diào)溫旋扭溫度，預(yù)熱15分鐘。
3.1.3.2 將抽提筒用開水洗凈，洗至筒內(nèi)無任何雜質(zhì)，置于干燥箱內(nèi)烘1小時左右（105℃）取出編號，稱重后移入干燥器內(nèi)冷卻備用，編號并稱重。
3.1.3.3 試樣準(zhǔn)備
3.1.3.3.1 糧食、飼料等低油樣品，可直接稱取粉碎樣品2克左右，精確至0.0002克，先在濾紙筒內(nèi)底部塞一層脫脂棉，然后將樣品轉(zhuǎn)入筒內(nèi)，再用脫脂棉蓋在試樣上。
3.1.3.3.2 油料等高油樣品在備用試樣中稱取2克左右試樣，倒入烘盒中，放入干燥箱中在105℃溫度下烘30分鐘趁熱加入研缽中進(jìn)行研磨，磨粹后，加入適量的脫脂細(xì)砂（約2克左右）與試樣同磨，將試樣研至出油狀后，干凈地轉(zhuǎn)入在底部塞脫脂棉濾紙筒內(nèi)，用脫脂棉醮少許乙醚，揩凈研缽上試樣和脂肪，并入濾紙筒內(nèi)，再用脫脂棉蓋在試樣上。
3.1.3.4 試樣轉(zhuǎn)入儀器，手握提把，使速節(jié)通近軟軸提至適當(dāng)位置，將濾紙筒上口對準(zhǔn)速節(jié)吸合即可，然后拉下提把，將濾紙筒移至適當(dāng)高度（使抽提筒放入時不碰），并觀察濾紙筒時否在冷凝管中心。
3.1.3.5 將抽提筒從干燥器中取出，置于托架上，在抽提　內(nèi)加入適量的無水乙醚約50ml，然后手握托架手柄將抽提筒移入加熱板上，然后用托架將抽提筒抬上，使抽提筒上口對準(zhǔn)下保護(hù)套的園柱孔，保證二平面接觸良好，拉下壓桿使鎖緊勾子同座子鎖牢，然后再將抽提筒稍加旋轉(zhuǎn)，以保證二平面接觸良好。
3.1.3.6 接通水源給水管、排水管，開啟冷凝管旋塞至手柄方向垂直于水平面。
3.1.3.7 手握提把上移，將試樣降入抽提筒底浸泡，此時，將溫控儀和調(diào)溫旋扭溫度設(shè)置為60-70℃，具體按溶劑沸點及室溫度。
3.1.3.8 從溶劑揮發(fā)開始浸泡適當(dāng)時間，將濾紙筒年長約5cm，進(jìn)行抽提，再將濾紙筒提升1cm，同時將冷凝管旋塞塞至手柄方向平行于水平面進(jìn)行溶劑回收，時間約為15分鐘。
3.1.3.9 關(guān)閉電源，左手握住壓桿，拉開鎖緊勾子，使冷凝管復(fù)位，同時右手握住托架手柄將托架上抬，等冷凝管復(fù)位后，用托架皎抽提筒在加熱板上取出，待溶劑完全揮發(fā)后轉(zhuǎn)入干燥箱中烘去水分，一般為45分鐘（105℃）后移入干燥器內(nèi)冷卻稱量，計算含油量，最好使所得油脂達(dá)到恒重（即多次烘干、冷卻、稱量，使最后二次稱重，前后重差在0.002g以內(nèi)）。
3.1.3.10 將濾紙筒移至適當(dāng)位置，摘下濾紙筒后，取出回收溶劑，回收時將溶器放在冷凝管下部，容器口對準(zhǔn)冷凝管下口完全打開旋塞，等到聚集在冷凝管內(nèi)的溶劑流完為止，取出盛有回收溶劑的容器，倒入大容　器中以備用。
3.1.3.11 使用結(jié)束　，關(guān)閉電源　，擦洗干凈。
3.1.4 時間表
含油量(%) 浸泡時間(h) 提抽時間（h）
0.5-5 0.5 1
5-15 1 1
15-25 1 1.5
25-35 1.5 1.5
35-45 2.5 2
45-60 3 2.5
3.1.5 結(jié)果計算
粗脂肪%＝W1/W2*100
W1---粗脂肪重量
W2---試樣重
3.2 國標(biāo)法
3.2.1 測定原理
用乙醚等有機(jī)溶劑反復(fù)浸提飼料樣本，使其中脂肪溶于乙醚，并收集于盛醚瓶中，然后將所有的浸提溶劑加以蒸發(fā)回收，直接稱量盛醚瓶中的脂肪重，即可計算出飼料樣本中的脂肪含量。
3.2.2儀器設(shè)備
索氏脂肪抽提器，恒溫水浴鍋，干燥器，坩堝坩，烘箱，鑷子，稱量瓶，分析天平，濾紙或濾紙筒（中速脫脂）。
3.2.3 試劑
無水乙醚（化學(xué)純）。
3.2.4 測定步驟
3.2.4.1 索氏提取器應(yīng)干燥無水，將抽提瓶洗凈于105℃±2℃干燥箱中烘干30min，然后置于干燥器中冷卻30min，稱重，如此反復(fù)進(jìn)行，至最后兩次重量之差小于0.0008g為止。
3.2.4.2 精稱風(fēng)干樣品2g左右于濾紙筒中或用濾紙包好，并用鉛筆注明標(biāo)號，放入105℃烘箱中烘干2h。濾紙筒應(yīng)高于提取器虹吸管的高度，濾紙包長度。應(yīng)以可全部浸泡于乙醚中為準(zhǔn)。
3.2.4.3 將濾紙筒或包放入抽提管中，在抽提瓶中加無水乙醚60-100ml，在60-75℃的水浴上加熱，使乙醚回流每小時約為8-10次。浸提時間依樣品中脂肪含量而定。一般約需8-16h或檢查抽提管流出的乙醚揮發(fā)后不留下油跡為抽提終點。
3.2.5 結(jié)果計算
3.2.5.1 計算公式
粗脂肪=(W2-W3)/W1*100%
式中：W1為樣品重（g）；W3為抽提瓶重（g）；W2為盛有脂肪的抽提瓶重量（g）。
3.2.5.2 重復(fù)性
每個試樣取兩平行樣進(jìn)行測定，以其算術(shù)平均值為結(jié)果。
粗脂肪含量在10%以上，允許相對偏差為3%。粗脂肪含量在10%以下時，允許相對偏差為5%。
4 飼料中粗纖維的測定
4.1 粗纖維測定儀
4.1.1儀器和用具
4.1.1.1粗纖維測定儀
4.1.1.2分析天平
4.1.1.3干燥箱
4.1.1.4高溫爐
4.1.1.5粉碎機(jī)及分樣篩
4.1.1.6干燥器
4.1.2 試劑
硫酸、氫氧化鈉、95%乙醇、乙醚、正辛醇
4.1.3 操作前準(zhǔn)備
4.1.3.1試劑制備
4.1.3.1.1　硫酸溶液（0.128mol/L）：取濃硫酸約75ml，用蒸餾水稀釋到1000ml，用已知濃度的NaOH液標(biāo)定后，調(diào)整其濃度至1.28±0.005mol/L的硫酸原液，用前用蒸餾水稀釋10倍即可。
4.1.3.1.2堿溶液（0.312mol/L）：取飽和NaOH溶液（680g/L）約190ml，用不含CO2蒸餾水稀釋500ml，用已知濃度的酸液標(biāo)定后，調(diào)整其濃度至3.12±0.005mol/L的堿原液，用前用蒸餾水稀釋10倍即可。
4.1.3.2　樣品制備
4.1.3.2.1取有代表性的樣品，揀去雜質(zhì)，按四分法取25g左右。
4.1.3.2.2 將樣品置在60-65℃烘箱骨干燥8小時左右，冷卻后粉碎，全部通過0.84mm2(20目)篩子，其中大于40目的不得小于50%，小于60目不得大于10%。
4.1.3.2.3　樣品中的脂肪含量超過1%需要脫脂，（可用測定粗脂肪后殘渣分析）。
4.1.3.2.4　將坩鍋用開水洗凈，洗至坩鍋內(nèi)無雜質(zhì)，置于干燥箱內(nèi)105℃烘1小時，移入干燥器內(nèi)冷卻至室溫，編號，再置于干燥箱內(nèi)備用。
4.1.4 操作步驟
4.1.4.1 在已編號后的坩鍋內(nèi)準(zhǔn)確地稱取凈干的平均試樣或烘干無水的脫脂1-3g（谷物2-3g）準(zhǔn)確至0.0001g。
4.1.4.2接通電源、水源、開啟主機(jī)電源開關(guān)（自來水盡是開足保證冷凝）。
4.1.4.3打開酸、堿預(yù)熱瓶上蓋，分別　加入已制備的酸堿溶液及蒸餾水，加至預(yù)熱瓶的90%，蓋上冷凝球。
4.1.4.4開啟酸預(yù)熱電源開關(guān)，預(yù)熱酸至微沸。
4.1.4.5將裝有試樣的坩鍋移入儀器溫室中，下部放入坩鍋座中心，上部對準(zhǔn)消煮管下的保護(hù)套的內(nèi)孔，壓下手柄并鎖緊再一次檢查坩鍋位置是否準(zhǔn)確后，將下閥全部關(guān)閉，逐個拉出加熱器手柄。
4.1.4.6開啟酸閥，逐個開上閥，在消煮管內(nèi)加入少量約5ml硫酸溶液，再開吸開關(guān)，逐個開下閥，抽盡溶液　，關(guān)吸開關(guān)和全部下閥。然后將乙預(yù)熱好的硫酸溶液加至150ml后，再在每個消煮管內(nèi)加入3-4滴正辛醇，開定時器同時按需要分別開中熱器電源開關(guān)，調(diào)節(jié)選位旋鈕可觀察單個加熱電壓。并將電壓調(diào)至最高（220V）同時開啟蒸餾水預(yù)熱開關(guān)（預(yù)熱水至沸點）。待消煮液微沸，將電壓逐個調(diào)至樣品無沉淀時將定時旋鈕旋至30min，保持消煮液微沸（如發(fā)現(xiàn)試樣粘壁可補(bǔ)加消煮液），到時加溫自動停止。
4.1.4.7開吸開關(guān)，再逐個開下閥將消煮液快速抽掉（在10min內(nèi)抽盡）并用熱水洗滌殘渣至中性（約三次）后抽盡洗液，在抽濾過程中如發(fā)現(xiàn)坩鍋被堵塞時關(guān)吸開關(guān)，開吹開關(guān)用氣流反沖，發(fā)現(xiàn)消煮管內(nèi)出現(xiàn)氣泡后關(guān)吹開關(guān)開吸開關(guān)繼續(xù)抽吸。
4.1.4.8按4.6步驟進(jìn)行堿消煮。
4.1.4.9按4.7方法抽洗堿消煮液，逐個推進(jìn)加熱器手柄。
4.1.4.10脫色和膠脂，全部關(guān)閉下閥，用胖肚吸管分別在消煮管上口分三次加入95%乙醇浸泡、抽濾（總共約20ml，每次泡浸時間約1min）后，再分三次加入乙醚沖洗（每次約20ml），若已脫脂樣品不需要用乙醚沖洗。
4.1.4.11左手壓下手柄拉出鎖緊勾子緩緩上升，使其復(fù)位，帶好手套取出存有試樣的坩鍋，待乙醚和乙醇全部揮發(fā)完，再移入干燥箱內(nèi)在130℃溫度下烘2小時，取出置于干燥器內(nèi)冷卻至室溫稱重（A1）。
4.1.4.12將稱重后的坩鍋置　入550℃電阻爐內(nèi)灼燒30min，待爐溫降至200℃以下，從電阻爐內(nèi)取郵置于干燥器內(nèi)冷卻至室溫稱重（A2）。
4.1.5結(jié)果計算
CF%＝（A1-A2）÷S1×100
CF—粗纖維的百分含量（%）
A1—坩鍋+粗纖維+殘渣及灰分質(zhì)量（g）
A2—坩鍋+殘渣及灰分質(zhì)量（g）
S1--試樣重量(g)
4.2 國標(biāo)法
4.2.1 測定原理
用固定量的酸和堿，在特定條件下消煮樣品，再用乙醇除去醇溶解物，經(jīng)高溫灼燒扣除礦物質(zhì)量，所余量即為粗纖維。粗纖維不是一個確切的化學(xué)實體，主要由纖維素和少量半纖維素、木質(zhì)素等組成。
4.2.2 儀器設(shè)備
抽濾裝置（抽真空裝置、抽濾瓶及漏斗），電爐，馬福爐，高型無嘴燒懷，冷凝球，古氏坩堝，干燥箱，量筒（200、50ml）、酸洗石棉。
4.2.3 試劑及配制
4.2.3.1　硫酸溶液（0.128mol/L）：取濃硫酸約75ml，用蒸餾水稀釋到1000ml，用已知濃度的NaOH液標(biāo)定后，調(diào)整其濃度至1.28±0.005mol/L的硫酸原液，用前用蒸餾水稀釋10倍即可。
4.2.3.2 堿溶液（0.312mol/L）：取飽和NaOH溶液（680g/L）約190ml，用不含CO2蒸餾水稀釋500ml，用已知濃度的酸液標(biāo)定后，調(diào)整其濃度至3.12±0.005mol/L的堿原液，用前用蒸餾水稀釋10倍即可。
4.2.3.3 乙醚、95%乙醇、正辛醇。
4.2.4 測定步驟
4.2.4.1 酸處理：精稱樣本1-2g左右（若樣本脂肪含量在8%以上，須先用乙醚脫脂），小心放入500ml高型無嘴燒杯，用量筒準(zhǔn)確加入200ml硫酸 ,加一滴防泡沫劑，并在液面處劃一刻度線。然后放在電爐上，裝上冷凝球，通入冷水，加熱使溶液在1min內(nèi)沸騰，記時，維持微沸狀態(tài)30min，取下加入蒸餾水200ml，靜置15-20min，待樣品下沉后，在抽濾裝置上抽去上清液，再用少量蒸餾水沖洗漏斗。濾布處附著樣本于無嘴燒杯中，然后用NaOH溶液中和至沉淀液呈中性（用廣泛試紙檢查）。
4.2.4.2 堿處理：在無嘴燒杯中加入NaOH溶液至200ml刻度處，將無嘴燒杯在電爐上如酸處理一樣微沸處理30min，取下加入蒸餾水200ml，靜置15-20min，抽去上層清液，沖洗濾布后，用硫酸調(diào)至中性。
4.2.4.3 抽濾：將經(jīng)酸、堿處理后的中性沉淀液移入輔有石棉的古氏坩堝中抽濾，然后將燒杯壁殘渣完全洗于坩堝中抽濾，再用乙醇25ml沖洗坩堝中的殘渣。
4.2.4.4 烘干灰化：取下坩堝，用紗布將其外壁擦凈，放入105℃烘箱中烘至恒重，然后于電爐上小心炭化至無煙后，放入550℃高溫電爐灼燒30min，稱重，再灼燒15min，冷卻稱重，直至恒重為止。
4.2.5 結(jié)果計算
4.2.5.1 計算公式同粗纖維測定儀法
4.2.5.2 重復(fù)性：每個試樣應(yīng)取兩個平行樣測定，以其算術(shù)平均值為結(jié)果。粗纖維含量在10%以下，允許絕對值相差0.4；粗纖維含量在10%以上，允許相對偏差為4%。
5 飼料中粗灰分的測定
試樣經(jīng)灼燒完全后，余下的殘留物質(zhì)（如氧化物和鹽）稱為灰分?；曳钟兴苄耘c水不溶性，酸溶性、酸不溶性。水溶性灰分大部分是鉀、鈉、鈣、鎂等氧化物和可溶性鹽，水不溶性灰分除泥沙外，還有鐵、鋁等的氧化物和堿土金屬的堿式磷酸鹽。酸不溶性灰分大部分為污染摻入的泥沙和原來存在于動植物組織中經(jīng)灼燒成的二氧化硅。
5.1 測定原理
飼料中灰分的測定一般采用灰化法。將試樣在550℃燒灼，使構(gòu)成飼料有機(jī)物的主要元素C、N、H、等氧化，所余殘渣即飼料中所含各種礦物元素的氧化物、氯化物及碳酸鹽，以及混雜在飼料中粘土、砂粒等，稱為粗灰分。
5.2 儀器設(shè)備
樣品粉碎機(jī)，分析天平（感量0.0001g），電爐，坩堝鉗，馬福爐，瓷坩堝(50ml)，干燥器（變色硅膠作干燥劑）、40目分樣篩。
5.3 試劑及配制
0.5%氯化鐵墨水溶液（稱0.5g氯化鐵溶于100ml藍(lán)墨水中）
5.4 測定步驟
5.4.1 將帶蓋坩堝洗凈烘干后，用鋼筆蘸0.5%氯化鐵墨水溶液編號。
5.4.2 將坩堝和蓋一起放入馬福爐，在550℃±20℃下灼燒30min，稱重再重復(fù)灼燒，冷卻、稱重，直至兩次重量之差小于0.0005g為恒重量。
5.4.3 在已知重量的坩堝中稱取2g左右試樣（不超過坩堝容量的一半，灰分重量應(yīng)在0.05g以上），在電爐上低溫碳化至無煙為止。
5.4.4 炭化后將坩堝移入馬福爐中，于550℃下灼燒3h，使全部樣品變成灰白色或紅棕色（含有錳）。待灰化結(jié)束后，待爐溫降至200℃下時打開爐門，將坩堝取出于空氣中冷卻1min.，放入干燥器中冷卻30min，稱重。再同樣灼燒1h，冷卻，稱重，直至兩次重量之差小于0.001g 為恒重量。
5.5 結(jié)果計算
5.5.1 計算公式：
粗灰分=(W2-W0)/(W1-W0)*100%
式中：W0為已恒重量空坩堝重（g）；W1為坩堝加試樣重（g）；W0為灰化后坩堝加灰分重(g)。
5.5.2 重復(fù)性：每個試樣應(yīng)取兩個平行樣進(jìn)行測定，以其算術(shù)平均值為結(jié)果。
粗灰分含量在10%以上，允許相對偏差為0.5%；粗灰分含量在5-10%以上，允許相對偏差為1%；粗灰分含量在5%以下，允許相對偏差為5%。
5.6 注意事項
5.6.1 樣品開始炭化時，應(yīng)打開部分坩堝蓋，便于氣流流通；溫度應(yīng)逐漸上升，防止火力過大而使部分樣品顆粒被逸出的氣體帶走。
5.6.2 為了避免樣品氧化不足，不應(yīng)把樣品磨得太細(xì)，壓得過緊，樣品應(yīng)松松地放在坩堝內(nèi)。
5.6.3 灼燒溫度不宜超過600℃，否則會引起磷、硫等鹽的揮發(fā)。
5.6.4 灼燒殘渣顏色與試樣中各元素含量有關(guān)，含鐵高時為紅棕色，含錳高為淡藍(lán)色。但有明顯黑色炭粒時，為炭化不完全，應(yīng)延長灼燒時間。
6 飼料中鈣的測定
鈣的測定方法有高錳酸鉀氧化還原滴定法、EDTA絡(luò)合滴定法、原子吸收分光光度法等。高猛酸鉀法操作繁復(fù)，但準(zhǔn)確度高，重復(fù)性好，為國家標(biāo)準(zhǔn)仲裁分析法。EDTA絡(luò)合滴定法手續(xù)簡便、快速、適合于大批樣品的測定，為國家標(biāo)準(zhǔn)快速測定鈣方法。
6.1 高錳酸鉀氧化還原滴定法
6.1.1 測定原理
飼料樣品灰化后，用鹽酸溶解，然后在溶液中加入草酸銨，使鈣成為草酸鈣白色沉淀，然后用硫酸溶解草酸鈣再用標(biāo)準(zhǔn)高錳酸鉀溶液滴定游離的草酸根離子。
6.1.2 儀器設(shè)備
燒杯，量筒,吸耳球，定量濾紙，洗瓶，電爐，容量瓶（100ml），漏斗，移液管（10、20ml），表面皿，玻璃棒，酸式滴定管（25ml:）。
6.1.3 試劑及配制
6.1.3.1 1:3鹽酸溶液。
6.1.3.2 1:3硫酸溶液。
6.1.3.3 1:1氨水溶液。
6.1.3.4 4.2%草酸銨溶液。
6.1.3.5 甲基紅乙醇溶液(0.1g溶于100ml乙醇中)。
6.1.3.6 濃硝酸
6.1.3.7 0.05mol/L高錳酸鉀溶液
6.1.3.7.1 配制：稱取高錳酸鉀約1.6克，溶于1000ml水中，煮沸10min，冷卻靜置1-2天，用沙芯漏斗過濾，濾液保存于潔凈的棕色瓶中備用。
6.1.3.7.2 標(biāo)定：準(zhǔn)確稱取0.1克基準(zhǔn)草酸鈉(105℃烘干2h)，準(zhǔn)確至0.0002g，溶于50ml水中，再加硫酸溶液10ml，將此溶液加熱至75-85℃。用配好的高錳酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定。-滴定至溶液呈粉紅色且1min內(nèi)不褪色為止。滴定結(jié)束后，溶液溫度應(yīng)保持在60℃以上。按以下公式計算：C=m/0.067(V-V0)
C為高錳酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度(mol/L)
V滴定時消耗高錳酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液體積(ml)
V0空白滴定時消耗高錳酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液體積(ml)
M基準(zhǔn)草酸鈉質(zhì)量(g)
6.1.4 測定步驟
在粗灰分測定樣本中，加HCL10ml和數(shù)滴濃HNO3 ，小心煮沸，將此液轉(zhuǎn)入100ml容量瓶中，再加以熱水沖洗坩堝，冷至室溫后，定容混勻備用。
用移液管準(zhǔn)確吸取樣本液10-20ml于燒杯中加入甲基紅兩滴，滴加氨水溶液至溶液由紅變橙黃色。再滴加鹽酸溶液至溶液又呈紅色（PH為2.5-3.0）為止。加熱煮沸后趁熱加入草酸銨10ml邊加熱邊攪拌。若溶液由紅變黃（或桔黃），則需滴加HCL又呈紅色，煮沸3-4min后，放置過夜（或在水浴上加熱2h）。
用定量中速濾紙過濾，棄去濾液，用1:50氨水溶液沖洗燒杯及濾紙上的草酸鈣沉淀6-8次，直至草酸鈣被洗凈為止（接取濾液2-3ml，加硫酸數(shù)滴，加熱80℃后，加高錳酸鉀1滴，如溶液呈微紅色，且1-2min不褪色即可）。
沉淀和濾紙轉(zhuǎn)移入原燒杯中，加硫酸溶液10ml，蒸餾水50ml，加熱至75-85℃，立即用高錳酸鉀-滴定至溶液呈微紅且30s不褪色為止。
在干凈燒杯中加濾紙1張，硫酸10ml,蒸餾水50ml,=# > 1#3 后，加熱至75-85℃，立即用高錳酸鉀-滴定至溶液呈微紅且30s不褪色為止。
6.1.5 結(jié)果計算
6.1.5.1 計算公式：
C(Ca)=(V3-V0)*C*0.02*V1/V2/W*100%
式中：W為樣本重（g）；V1為樣本灰化液稀釋用量（ml）；V2 為測定鈣時樣本溶液用量（ml）；V3 為滴定樣本高錳酸鉀用量（ml）；V0為滴定空白液高錳酸鉀用量（ml）；C為高錳酸鉀溶液濃度（mol/L）。
6.1.5.2 重復(fù)性：樣品應(yīng)取兩個平行樣進(jìn)行測定，以其算術(shù)平均值為結(jié)果。
Ca含量在5%以上，允許相對偏差3%；含量在5-1%時，允許相對偏差5%；含量在1%以下，允許相對偏差10%。
6.1.6 注意事項
6.1.6.1 高錳酸鉀溶液濃度不穩(wěn)定，至少每月標(biāo)定一次；
6.1.6.2 每種濾紙空白值不同，消耗高錳酸鉀標(biāo)準(zhǔn)液的用量不同，至少每盒濾紙做一次空白測定。
6.2 EDTA絡(luò)合滴定法
6.2.1 試劑及配制
6.2.1.1 硝酸
6.2.1.2 三乙醇胺（分析純）(1+1)水溶液
6.2.1.3 鈣紅指示劑,1g鈣試劑羧酸鈉鹽與99gNaCl（分析純）混勻研細(xì)。
6.2.1.4 鹽酸羥胺（分析純）
6.2.1.5 孔雀綠指示劑：0.1g 指示劑溶于100ml蒸餾水。
6.2.1.6 20%NaOH
6.2.1.7 EDTA標(biāo)準(zhǔn)液(0.05mol/L)：精稱分析純乙二胺乙酸二鈉鹽19g溶于水，稀釋成1000ml，搖勻備用。
6.2.1.7.1 標(biāo)定滴定度：含鈣1mg的標(biāo)準(zhǔn)液10ml按樣品測定法進(jìn)行，這時EDTA:對鈣的滴定度為：T=CV/V0
C為鈣標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度；
V為吸取鈣標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積；
V0為EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定消耗的體積。
6.2.1.7.2 濃度標(biāo)定：稱取1克于800℃灼燒至恒重的基準(zhǔn)氧化鋅，稱準(zhǔn)至0.0002g。用少量水濕潤，加20%鹽酸溶液至樣品溶解，移入250ml容量瓶中，稀釋至刻度，搖勻。取30-35ml，加70ml水，用10%氨水溶液中和至PH7-8，加10ml氨-氯化銨緩沖溶液(54gNH4CL，溶于水，加15mol/L氨水394ml，稀釋至1L)及5滴鉻黑T指示液(5g/L)，用配制好的EDTA滴定至溶液由紫色變?yōu)榧兯{(lán)色。同時作空白試驗。
計算公式為C=m/[(V1-V0)*0.08138]
其中：V1為EDTA之用量；
V0為空白試驗之用量；
m為氧化鋅之質(zhì)量。
6.3 測定步驟
按高錳酸鉀法制各樣本分解液后，準(zhǔn)確吸取分解液10ml于150ml三角瓶中，加三乙醇胺溶液2ml，蒸餾水50ml，孔雀綠指示劑1滴，用20%NaOH溶解至無色，再加以NaOH液2ml，立即加0.1g鹽酸羥胺和少量鈣紅指示劑，并立即用EDTA標(biāo)準(zhǔn)液滴定至溶液由紫紅色變?yōu)榧兯{(lán)色為止。
6.4 結(jié)果計算
C(Ca)=TV2V0/(10mV1)
式中：T為滴定度
V2實際消耗EDTA標(biāo)準(zhǔn)液的體積
V1分取試樣分解液的體積
V0試樣分解液的部體積
m試樣的質(zhì)量
或C(Ca)=CEDTA(V-V0)40.1/m
式中V為消耗EDTA的體積，
V0為空白試驗之用量
m為試樣的質(zhì)量。
7 總磷的測定
7.1 測定原理
先將試樣中有機(jī)物破壞，在酸性溶液中使磷酸與偏釩酸和鉬酸銨生成黃色化合物，在波長420mm下進(jìn)行比色測定。
7.2 儀器設(shè)備
分光光度計，容量瓶或具塞比色管（50ml），容量瓶（100ml或1000ml），刻度移液管。
7.3 試劑及配制
7.3.1 鹽酸（1:1水溶液）
7.3.2 濃硝酸
7.3.3 釩鉬酸銨顯色劑：稱取偏釩酸銨1.25g，加硝酸250ml；另取鉬酸銨25g，加蒸餾水100ml溶解之，在冷卻條件下將此溶液倒入上溶液，且加蒸餾水調(diào)至1000ml，避光保存。如生成沉淀則不能使用。
7.3.4 磷酸標(biāo)準(zhǔn)溶液：將磷酸二氫鉀在105℃干燥1h，在干燥器中冷卻后稱0.2197g，溶解于蒸餾水中定量轉(zhuǎn)入1000ml溶量瓶中，加硝酸3ml，用蒸餾水稀釋到刻度，即成50ug/ml的磷標(biāo)準(zhǔn)溶液。
7.4 測定步驟
在粗灰分測定樣本中，加HCL10ml和數(shù)滴濃HNO3 ，小心煮沸，將此液轉(zhuǎn)入100ml容量瓶中，再加以熱水沖洗坩堝，冷至室溫后，定容混勻備用。
7.4.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制：準(zhǔn)確移取磷標(biāo)準(zhǔn)溶液0、1.0、2.0、4.0、6.0、8.0、10.0、15.0ml于50ml容量瓶中，各加入釩鉬酸銨顯色試劑10ml，用蒸餾水稀釋至刻度，搖勻，放置10min以上。以0ml溶液作參比，用1cm比色池，在420波下，用分光光度計測各溶液的吸光度，以磷含量為橫坐標(biāo)，吸光度為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
7.4.2 試樣測定：準(zhǔn)確移取試樣分解液1-10ml（含磷量50-500ug）于50ml容量瓶中，加入釩鉬酸銨顯色試劑10ml，按標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制的方法顯色和比色測定，測得試樣分解液的吸光度，由標(biāo)準(zhǔn)曲線查得試樣分解液的含磷量。
7.5 結(jié)果計算
7.5.1 計算公式(%)=100X/mV
式中：m為試樣重（g）；V為比色測定時所移取試樣分解液體積（ml）；X為由標(biāo)準(zhǔn)曲線查得試樣分解液含磷量（ug）。
7.5.2 重復(fù)性：每個試樣稱取兩個平行樣進(jìn)行測定，以其算術(shù)平均值為結(jié)果。含磷量在0.5%以上允許相對偏差3%；含磷量在0.5%.以下，允許相對偏差10%。
7.6 注意事項
7.6.1 比色時，待測液磷含量不宜過濃，最好控制在每毫升含磷0.5mg以下。
7.6.2 待測液在加入試液后應(yīng)靜置10min，再進(jìn)行比色，但不能靜置過久。
8 飼料級DL-蛋氨酸的測定
8.1 測定原理
在中性介質(zhì)中準(zhǔn)確加入過量的碘溶液，將兩個碘原子加到蛋氨酸的硫原子上，過量的碘溶液用硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液回滴。
8.2 試劑與材料
8.2.1 磷酸氫二鉀溶液：500g/L
8.2.2 磷酸二氫鉀溶液：200g/L。
8.2.3 碘化鉀溶液：200g/L。
8.2.4 碘溶液：C(1/2 I2)約0.1mol/L。
8.2.5 硫化硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液：C(NaS2O4)約0.1mol/L。
8.2.6 淀粉溶液：10g/L 。
8.3 分析步驟
稱取試樣0.23-0.25g(精確至0.0002g)移入500ml碘量瓶中，加入70ml無離子水，然后分別加入下列試劑：10ml磷酸氫二鉀溶液、10ml磷酸二氫鉀溶液、10ml碘化鉀溶液，待全部溶解后準(zhǔn)確加入50ml碘溶液，蓋上瓶蓋，水封，充分搖勻，于暗處放置30min.，用硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液滴定過量的碘，近終點時加入1ml淀粉指示劑，滴定至無色并保持30s為終點，同時做空白試驗。
8.4 結(jié)果計算
8.4.1 計算公式
以質(zhì)量分?jǐn)?shù)表示的蛋氨酸含量（X1）按下式計算：
X1=C(V-V0)*0.0746/m
式中：C為硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液的實際濃度（mol/L）；V為滴定試樣時消耗的硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液的體積（ml）；V0為空白消耗的硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液的體積（ml）；m為試術(shù)的質(zhì)量（g）0.0746為與1.0ml硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液C(NaS2O4)=1mol/L相當(dāng)?shù)?、以克表示的蛋氨酸的質(zhì)量。所得結(jié)果應(yīng)表示至一位小數(shù)。
8.4.2 允許差
取平行測定結(jié)果的算術(shù)平均值為測定結(jié)果，兩次平行測定結(jié)果的絕對差值不得大于0.1%。
9 飼料級L-賴氨酸鹽酸鹽含量的測定
9.1 試劑和溶液
甲酸、冰乙酸、a-萘酚苯基甲醇指示劑0.2%(m/v)冰乙酸指示液、高氯酸：濃度約為0.1mol/L的冰乙酸標(biāo)準(zhǔn)溶液。
9.2 測定步驟
試樣預(yù)先在105℃干燥至恒重，稱取干燥試樣式0.2g，稱準(zhǔn)至0.0002g，加3ml甲酸和50ml冰乙酸，再加入5ml乙酸汞的冰乙酸溶液，加入10滴a-萘酚苯基甲醇指示液，用0.1mol/L高氯酸的冰乙酸標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定，試樣液由橙黃色變?yōu)辄S綠色即為滴定終點。用同樣方法另作空白試驗以校正之。
9.3 結(jié)果計算
9.3.1 計算公式：賴氨酸鹽酸鹽的百分含量按下式計算：
0.09132*C*(V-V0)/m
式中：c為高氯酸標(biāo)準(zhǔn)溶液之濃度（mol/L）；V為試樣消耗高氯酸標(biāo)準(zhǔn)液之體積（ml）；V0為空白試驗消耗高氯酸標(biāo)準(zhǔn)溶液之體積（ml）；m為試樣之質(zhì)量（mg）；0.09132為每毫摩爾賴氨酸鹽酸鹽之質(zhì)量（g）。
9.3.2 兩個平行試樣測定結(jié)果之差不得大于0.2%，以其算術(shù)平均值報告結(jié)果。
10 飼料中水溶性氯化物的測定方法
本方法適用于配合飼料、濃縮飼料和單一飼料。檢測范圍氯元素含量為0-60mg。
10.1 方法原理
溶液澄清，在酸性條件下，加過量標(biāo)準(zhǔn)硝酸銀使樣品溶液中的氯化物形成氯化銀沉淀，除去沉淀后，用硫氰酸銨滴定過量的硝酸銀，根據(jù)消耗的硫氰酸銨的量，計算出其氯化物的含量。
10.2 試劑
實驗室用水應(yīng)符合GB6682中三級水用水的規(guī)格。使用的試劑除特殊規(guī)定外應(yīng)為分析純。
10.2.1 硝酸。
10.2.2 硫酸鐵（60g/L）：稱取硫酸鐵60g，加水微熱溶解后，調(diào)成1000ml。
10.2.3 硫酸鐵指示劑：250g/L硫酸鐵水溶液，過濾除去不溶物，與等體積濃硝酸混合均勻。
10.2.4 氨水：1+19水溶液。
10.2.5 硫氰酸銨［c=0.02mol/L］：稱取硫氰酸銨1.52g溶于1000ml水中。
10.2.6 氯化鈉標(biāo)準(zhǔn)貯備液：基準(zhǔn)級氯化鈉于500℃灼燒1h，干燥器中冷卻保存，稱5.8454g溶解于水中，轉(zhuǎn)入1000ml容量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻。此氯化鈉標(biāo)準(zhǔn)貯備液的濃度為0.1mol/L。
10.2.7 氯化鈉標(biāo)準(zhǔn)工作液：準(zhǔn)確吸取氯化鈉標(biāo)準(zhǔn)貯備液20.00ml于1000ml容量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻。此氯化鈉標(biāo)準(zhǔn)工作液的濃度為0.02mol/L。
10.2.8 硝酸銀標(biāo)準(zhǔn)溶液［c=0.02mol/L］：稱取3.4g硝酸銀溶于1000ml水中，貯于棕色瓶內(nèi)。
10.2.8.1 體積比：吸取硝酸銀溶液20ml，加硝酸4ml，指示劑2ml，在劇烈搖動下用硫氰酸銨溶液滴定，滴至終點為持久的淡紅色，由此計算兩溶液的體積比（F），計算公式為：
F=20/V2
式中：F為硝酸銀與硫氰酸銨溶液的體積比；20為硝酸銀的體積（ml）；V2 為硫氰酸銨溶液體積（ml）。
10.2.8.2 標(biāo)定：準(zhǔn)確移取氯化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液10ml，于100ml容量瓶中，加硝酸4ml，硝酸銀標(biāo)準(zhǔn)溶液25ml，振蕩使沉淀凝結(jié)，用水稀釋至刻度，搖勻，靜置5min，干過濾入干錐形瓶中。吸取濾液50ml，加硫酸鐵指標(biāo)，用硫氰酸銨溶液滴定出現(xiàn)淡紅棕色，且30s不褪色為終點。
硝酸銀標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度計算如下：
c=m*(20/1000)*(10/1000)/[0.05845(V1-FV2*100/50)]
式中：c為硝酸銀標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度（mol/L）；m為氯化鈉質(zhì)量（g）；V1為硝酸銀標(biāo)準(zhǔn)溶液體積（ml）；V2為硫氰酸銨溶液體積（ml）；F為硝酸銀和硫氰酸銨溶液的體積比；0.05845為與1ml硝酸銀標(biāo)準(zhǔn)溶液［1mol/L］相當(dāng)?shù)囊钥吮硎镜穆然c的質(zhì)量。
10.3 儀器設(shè)備
10.3.1 實驗室用樣品粉碎機(jī)或研缽。
10.3.2 分樣篩：孔徑0.45mm（40目）。
10.3.3 分析天平：感量0.0001g。
10.3.4 刻度移液管：10ml、2ml。
10.3.5 移液管：50ml、25ml。
10.3.6 滴定管：酸式，25ml。
10.3.7 容量瓶：100，1000ml。
10.3.8 燒杯：250ml。
10.3.9 濾紙：快速，直徑15cm。
10.4 試樣的選取和制備
選取有代表性的試樣，粉碎至40目，用四分法縮減至200g，密封保存，以防試樣組分變化或變質(zhì)。
10.5 測定步驟
10.5.1 氯化物的提取
稱取樣品適量（氯含量在0.8%以內(nèi)，稱取樣品5g左右；氯含量在0.8-1.6%，稱取樣品3g左右；氯含量在1.6%以上，稱取樣品1g左右），準(zhǔn)確至0.0002g，準(zhǔn)確加入硫酸鐵溶液50ml，氨水溶液100ml，攪拌數(shù)分鐘，放置10min，用干的快速濾紙過濾。
10.5.2 測定
準(zhǔn)確移取濾液50ml于100ml容量瓶中，加濃硝酸10ml，硝酸銀標(biāo)準(zhǔn)溶液25ml，用力振蕩使沉淀凝結(jié)，用水烯釋至刻度，搖勻，靜置5min，干過濾于150ml錐形瓶中或靜置（過夜）沉化。吸取濾液（澄清液）50ml，加硫酸鐵指示劑10ml，用硫氰酸銨溶液滴定，出現(xiàn)淡橘紅色，且
30s不褪色為終點。
10.6 結(jié)果計算
計算見式
CL(%)=(V1-V2F*100/50)c*150*0.0355*100/50m
NaCL(%)=(V1-V2F*100/50)c*150*0.05845*100/50m
式中：m為樣的質(zhì)量（g）；V1為硝酸銀溶液體積（ml）；V2為滴定時硫氰酸銨溶液消耗體積（ml）；F為硝酸銀和硫氰酸銨溶液的體積比；C為硝酸銀標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度（mol/L）；0.0355為與1ml硝酸銀標(biāo)準(zhǔn)溶液相當(dāng)?shù)囊钥吮硎镜穆仍氐馁|(zhì)量；0.05845與1ml硝酸銀標(biāo)準(zhǔn)溶液相當(dāng)?shù)囊钥吮硎镜穆然c的質(zhì)量。所得結(jié)果以表示至兩位小數(shù)。
10.7 允許差
每個樣品應(yīng)取兩份平行樣進(jìn)行測定，以其算術(shù)平均值為分析結(jié)果。
氯含量在3%以下（含3%），允許絕對誤差0.05；氯含量在3%以上，允許相對偏差3%。
10.8 快速測定方法
稱取5-10g樣品，準(zhǔn)確至0.0001g，加入水200ml，攪拌15min，放置15分鐘，準(zhǔn)確移取上清液20 ml，加水50ml，10%鉻酸鉀指示劑1ml，用硝酸銀標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定，呈現(xiàn)磚紅色，且1min不褪色為終點。
計算見式：CL(%)=V2*c*200*0.0355*100/20m
式中：同10.6。
11 配合飼料混合均勻度的測定
11.1 氯離子選擇性電極法
11.1.1 方法原理
本法通過氯離子選擇性電極的電位對溶液中氯離子的選擇性響應(yīng)來測定氯離子的含量，以飼料中氯離子含量的差異來反映飼料的混合均勻度。
11.1.2 儀器
11.1.2.1 氯離子選擇性電極。
11.1.2.2 雙鹽橋甘汞電極。
11.1.2.3 酸度計或電位計：精度0.2mv。
11.1.2.4 磁力攪拌器。
11.1.2.5 容量瓶：50ml
11.1.2.6 分析天平：分度值0.0001g
11.1.2.7 移液管：1ml、5ml、10ml
11.1.2.8 燒杯：100ml、250ml
11.1.3 試劑與溶液
本標(biāo)準(zhǔn)所用試劑和水，在沒有注明其他要求時，均指分析純試劑和規(guī)定的三級水。
11.1.3.1 硝酸溶液：濃度約為0.5mol/L，吸取濃硝酸35ml，用水稀釋至1000ml。
11.1.3.2 硝酸鉀溶液：濃度約為2.5mol/L，稱取252.75g硝酸鉀于燒杯中，加水加熱溶解，用水稀釋至1000ml。
11.1.3.3 氯離子標(biāo)準(zhǔn)液：稱取經(jīng)500℃灼燒1h冷卻后的氯化鈉8.2440g于燒杯中，加水微熱溶解，轉(zhuǎn)入1000ml容量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻，溶液中含氯離子5mg/ml。
11.1.4 樣品的采集與制備
11.1.4.1 本法所需的樣品系配合飼料成品，必須單獨采制。
11.1.4.2 每一批飼料至少抽取10個有代表性的樣品。每個樣品的數(shù)量應(yīng)以畜禽的平均一日采食量為準(zhǔn)，即肉用仔雞前期飼料取樣50g；肉用仔雞后期飼料與產(chǎn)蛋雞飼料取樣100g；生長肥育豬飼料取樣500g。樣品的布點必須考慮各方位深度、袋數(shù)或料流的代表性，但是，每一個樣品必須由一點集中分取樣。取樣時不允許有任何翻動或混合。
11.1.4.3 將上述兩個樣品在化驗室充分混合，以四分法從中取10g試樣進(jìn)行測定。對顆粒飼料與較粗的粉狀飼料需將樣品粉碎后再取試樣。
11.1.5 測定步驟
11.1.5.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制：吸取氯離子標(biāo)準(zhǔn)液0.1，0.2，0.3，0.6，1.2，2.0，4.0，6.0ml，分別加入50ml容量瓶中，加入5ml0.5mol/L硝酸溶液，10ml2.5mol/L硝酸鉀溶液，用水稀釋至刻度，搖勻，即可得到0.50，1.00，1.50，3.00，6.00，10.00，20.00，30.00mg/ml的氯離子標(biāo)準(zhǔn)系列，將它們分別倒入100ml的干燥燒杯中，放入磁性攪拌子一粒，以氯離子選擇性電極為指示電極，雙鹽橋甘汞電極為參比電極，用磁力攪拌器攪拌3min（轉(zhuǎn)速恒定），在酸度計或電位計上讀取指示值（mv），以溶液的電位值（mv）為縱坐標(biāo)，氯離子濃度為橫坐標(biāo)，在半對數(shù)坐標(biāo)紙上繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
11.1.5.2 試樣的測定：稱取試樣10g（準(zhǔn)確至0.0002g）置于250ml燒杯中，準(zhǔn)確加入100ml水，攪拌10min，靜置10min后用干燥的中速寫性濾紙過濾。吸取試樣濾液10ml置于50ml容量瓶中，加入5ml硝酸溶液及10ml硝酸鉀溶液，用水稀釋至刻度，搖勻，按標(biāo)準(zhǔn)曲線的操作步驟進(jìn)行測定，讀取電位值，從標(biāo)準(zhǔn)曲線上求得氯離子含量的對應(yīng)值。
11.1.6 混合均勻度的計算
以各次測定的氯離子含量的對應(yīng)值為X1、X2、X3…… X10，其平均值X?，標(biāo)準(zhǔn)差S:與差異系數(shù)CV按式11.1.6.1至式11.1.6.3計算。
11.1.6.1 X-=( X1+X2+X3+… X10)/10
11.1.6.2 S=√[(X1-X-)2+(X2-X-)2+(X3-X-)2+……+(X10-X-)2]/9
11.1.6.3 CV(%)=S/X-*100
11.2 甲基紫法
11.2.1 方法原理
本法以甲基紫色素作為示蹤物，將其與添加劑一起加入，預(yù)先混合于飼料中，然后以比色法測定樣品中甲基紫含量，以飼料中甲基紫含量的差異來反映飼料的混合均勻度。本法主要適用于混合機(jī)和飼料加工工藝中混合均勻度的測試。
11.2.2 儀器與試劑
11.2.2.1 分光光度計：有5比色皿。
11.2.2.2 標(biāo)準(zhǔn)篩：篩孔基本尺寸100um 。
11.2.2.3 甲基紫（生物染色劑）
11.2.2.4 無水乙醇。
11.2.3 示蹤物的制備與添加
將測定用的甲基紫混勻并充分研磨，使其全部通過100um標(biāo)準(zhǔn)篩。按照配合飼料成品量十萬分之一的用量，在加入添加劑的工段投入甲基紫。
11.2.4 樣品的采集與制備
樣品的采集與制備與氯離子選擇電極法相同。
11.2.5 測定步驟
稱取試樣10g，放在100ml的小燒杯中，加入30ml無水乙醇，不時地加以攪動，燒杯上蓋一表面玻璃，30min后用濾紙過濾（定性濾紙，中速），以無水乙醇作為空白調(diào)節(jié)零點，用分光光度計，以5mm比色皿在590nm的波長下測定濾液的吸光度。
以各次測定的吸光度值為X1、X2、X3；……X10，其平均值X-，標(biāo)準(zhǔn)差S與變異系數(shù)CV按式11.1.6計算。
11.2.6 注意事項
11.2.6.1 同一批飼料的10個樣品測定時應(yīng)盡量保持操作的一致性，以保證測定值的穩(wěn)定性和重復(fù)性。
11.2.6.2 由于出廠的各批甲基紫的甲基化程度不同，色調(diào)可能有差別，因此，測定混合均勻度所用的甲基紫，必須用同一批次的并加以混勻，才能保持同一批飼料中各樣品測定值的可比性。
11.2.6.3 配合飼料中若添加首稽粉、槐葉粉等含有色素的組分時，則不能用甲基紫法測定混合均勻度。
12 配合飼料粉碎粒度的測定
本測定法適用于規(guī)定的標(biāo)準(zhǔn)編織篩測定配合飼料成品的粉碎粒度。
12.1 儀器
12.1.1 標(biāo)準(zhǔn)編制篩：篩目4、6、8、12、16目；凈孔邊長5、3.2、2.5、1.6、1.25mm。
12.1.2 搖篩機(jī)：統(tǒng)一型號電動搖篩機(jī)。
12.1.3 天平：感量為0.01g。
12.2 測定步驟
從原始樣品中稱取試樣100g，放入規(guī)定篩層的標(biāo)準(zhǔn)編織篩內(nèi)，開動電動機(jī)連接篩10min，篩完后將各層底物篩上物分別稱重，計算公式：
W=m1/m2*100
該篩層上留存百分率W
該篩層上留存粉料的重量m1
試樣重量m2
檢驗結(jié)果計算到小數(shù)點后第1位，第2位四舍五入。
過篩的損失量不得超過1%，雙試驗允許誤差不超過1%，求其平均數(shù)即為檢驗結(jié)果。
12.3 注意事項
12.3.1 測定結(jié)果以統(tǒng)一型號的電動搖篩機(jī)為準(zhǔn)，或手工篩5min計算結(jié)果。
12.3.2 篩分時若發(fā)現(xiàn)未經(jīng)粉碎的谷粒與種子時，應(yīng)加以稱重并記載。
13 顆粒飼料淀粉糊化度測定法
本方法適用于經(jīng)擠壓、膨化等工藝制得的各種顆粒飼料中淀粉糊化度的測定。
13.1 測定原理
β-淀粉酶在適當(dāng)?shù)腜H值和溫度下，能在一定的時間內(nèi)，定量地將糊化淀粉轉(zhuǎn)化成還原糖，轉(zhuǎn)化的糖量與淀粉的糊化程度成比例關(guān)系。用鐵氰化鉀法測其還原糖量，即可計算出淀粉的糊化度。
13.2 儀器和設(shè)備
13.2.1 分析天平：感量0.1mg。
13.2.2 多孔恒溫水浴鍋。
13.2.3 定性濾紙；中速。
13.2.4 堿式滴定管。
13.2.5 移液管。
13.2.6 玻璃漏斗
13.2.7 容量瓶。
13.3 試劑和溶液
13.3.1 10%磷酸鹽緩沖液
甲液：溶解71.64g磷酸氫二鈉于蒸餾水中，并稀釋至1000ml。
乙液：溶解31.21g磷酸二氫鈉于蒸餾水中，并稀釋至1000ml。
取甲液49ml與乙液51ml合并為100ml，再加入900ml蒸餾水即為10%磷酸鹽緩沖液。
13.3.2 6%β-淀粉酶溶液(活力大于10萬單位)：溶解6.0gβ-淀粉酶（精制）于100ml10%磷酸鹽緩沖液中成乳濁液。（β-淀粉酶貯于冰箱內(nèi)，用時現(xiàn)配）。
13.3.3 1.79mol/L硫酸溶液：將10ml濃硫酸用蒸留水稀釋至100ml。
13.3.4 12%鎢酸鈉溶液：溶解12.0g鎢酸鈉于100ml蒸留水中。
13.3.5 堿性鐵氰化鉀溶液：溶解32.9g鐵氰化鉀和44.0g無水碳酸鈉于蒸餾水中并稀釋至1000ml，貯于棕色瓶內(nèi)。
13.3.6 醋酸鹽溶液：溶解70.0g氯化鉀和40.0g七水硫酸鋅于蒸餾水中加熱溶解，冷卻至室溫，再緩緩加入200ml冰乙酸并稀釋至1000ml。
13.3.7 10%碘化鉀溶液：溶解10.0g碘化鉀于100ml蒸餾水中，加入幾滴飽和氫氧化鈉溶液，防止氧化，貯于棕色瓶內(nèi)。
13.3.8 0.05mol/L硫代硫酸鈉溶液：溶解24.82g硫代硫酸鈉和3.8g硼酸鈉于蒸餾水中，并稀釋至1000ml，貯于棕色瓶內(nèi)（此液放置一星期后使用）。
13.3.9 10g/L淀粉指示劑:溶解1.0g可溶性淀粉于煮沸的蒸餾水中，再煮沸騰1min，冷卻，稀釋至100ml。
13.4 試樣的制備
取要檢測的顆粒飼料樣品20g左右，在實驗室樣品磨中粉碎，其細(xì)度通過40目編織篩，混勻，放于密閉容器內(nèi)，貼上標(biāo)簽作為試樣。樣品應(yīng)低溫保存。
13.5 分析步驟
13.5.1 分別稱取試樣1g（淀粉含量不大于0.5g）4份，置于4只150ml三角瓶中，標(biāo)上A1、A2、B1、B2。另取一只150ml三角瓶，不加試樣，作空白，并標(biāo)上C。在這5只三角瓶中各用50ml量筒加入40ml10%磷酸鹽緩沖液。
13.5.2 將A1、A2置于沸水浴中煮沸30min，取出快速冷卻至60℃以下。
13.5.3 將A1、A2、B1、B2 、C置于恒溫水浴鍋中預(yù)熱3min后，各用5ml移液管加入5ml6%β-淀粉酶溶液，保溫（60℃）1h（每隔15min輕輕搖勻一次）。
13.5.4 1h后，將5只三角瓶取出，用移液管分別加入2ml硫酸溶液搖勻，再加入2ml鎢酸鈉溶液搖勻，并將它們?nèi)哭D(zhuǎn)移到5只100ml容量瓶中（用蒸餾水蕩洗三角瓶-次以上，蕩洗液也轉(zhuǎn)移至相應(yīng)的容量瓶內(nèi)）。最后用蒸餾水定容至100ml)，并貼上標(biāo)簽。
13.5.5 搖晃容量瓶，靜置2min后，用中速定性濾紙過濾。留濾液作為下面測定試樣。
13.5.6 用5ml移液管分別吸取上述濾液5ml，放入潔凈的150ml三角瓶內(nèi)，再用15ml移液管加入15ml堿性鐵氰化鉀溶液，搖勻后置于沸水浴中準(zhǔn)確加熱20min后取出，用冷水快速冷卻至室溫，用25ml移液管緩慢加入25ml醋酸鹽溶液，并搖勻。
13.5.7 用5ml移液管加入5ml10%碘化鉀溶液搖勻，立即用硫代硫酸鈉溶液滴定，當(dāng)溶液顏色變成淡黃色時，加入幾滴淀粉指示劑，繼續(xù)滴定到藍(lán)色消失。各三角瓶分別逐一滴定，并記下相應(yīng)的滴定量。
13.6 結(jié)果計算
13.6.1 所測試樣糊化度兩次平行測定結(jié)果按下式計算：
k1=(c-b1)*100/(c-a1)
k2=(c-b2)*100/(c-a2)
式中，c為空白滴定量（ml）；a1、a2、b1、b2為完全糊化樣品溶液滴定量（ml）。13.6.2 精密度：雙試驗的相對誤差：糊化度在50%以下時，不超過5%；糊化度在50%以上時，不超過10%。
14 顆粒飼料硬度的測定方法
顆粒飼料硬度是指顆粒對處壓力所引起變形的抵抗能力。
14.1 原理
用對單顆粒徑向加壓的方法使其破碎。以此時的壓力表示該顆粒的硬度。用多個顆粒的硬度的平均值表示該樣品的硬度。
14.2 儀器設(shè)備
木屋式硬度計
14.3 樣品制備
從每批顆粒飼料中取出有代表性的樣品約20g，用四分法從各部分選取長度6mm以上，大體上同樣大小、長度的顆粒(以顆粒兩頭最凹處計算)20粒。
14.4 測定步驟
將硬度計的壓力指針調(diào)整至零點，用鑷子將顆粒橫放到載物臺上，正對壓桿下方。轉(zhuǎn)動手輪，使壓桿下降，速度中等、均勻。顆粒破碎后讀取壓力數(shù)值(X1)。清掃載物臺上碎屑。將壓力計指針重新調(diào)整至零點，開始下一樣品的測定。
14.5 計算
14.5.1 X-=(X1+X2+…+X20)/20
式中：X-為樣品硬度(kg)；
X1…X20為各單粒樣品的硬度。
如果顆粒長度不足6mm，則在硬度數(shù)值后明平均長度。
14.5.2 允許差：2份樣品的絕對誤差不大于1.0kg。
15 顆粒飼料粉化率及含粉率的測定方法
顆粒飼料粉化率是指顆粒飼料在特定條件下產(chǎn)生的粉未重量占其總重量百分比。
含粉率是指顆粒飼料中所含粉料重量占其總重量的百分比。
本方法適用于一般硬顆粒飼料的粉化率、含粉率測定。
15.1 原理
本法通過粉化儀對顆粒飼料產(chǎn)品的翻轉(zhuǎn)磨擦后成粉量的測定，反映顆粒的堅實程度。
15.2 儀器設(shè)備
15.2.1 粉化儀
15.2.2 標(biāo)準(zhǔn)篩一套
15.2.3 標(biāo)準(zhǔn)篩振篩機(jī)
15.3 樣品制備
15.3.1 顆粒冷卻后1小時以后測定，從各批顆粒飼料中取出有代表性的樣品1.5kg。
15.3.2 將實驗室樣品用規(guī)定篩號的金屬篩分3次用振篩機(jī)預(yù)篩1，將篩下物稱重計算3次篩下物總重的百分婁，即為含粉率(%)。然后將篩上物用四分法稱取2份試樣，每份500g.
15.4 測定步驟
將稱好的2份樣品分裝入粉化儀的回轉(zhuǎn)箱內(nèi)，蓋緊箱蓋，開動機(jī)器，使箱體回轉(zhuǎn)10min(500轉(zhuǎn))，停止后取出樣品，用規(guī)定篩格在振篩機(jī)上篩理1分鐘，稱取篩上物重量得B1、B2，計算2份樣品測定結(jié)果的平均值。
15.5 測定結(jié)果
15.5.1 含粉率與粉化率的計算
Q1=m1/m2*100
式中：Q1為樣品含粉率(%)
m1預(yù)篩后篩下物總重(g)
m2預(yù)篩樣品總重(g)
Q2=(1-m/500)*100
式中：Q2為樣品粉化率(%)
m為回轉(zhuǎn)后篩上物總重(g)，得結(jié)果表示至小數(shù)點后一位。
15.5.2 允許差：2份樣品的絕對誤差不大于1，在仲裁分析時絕對誤差不大于1.5。
15.6 不同顆粒直徑采用的篩孔尺寸表
顆粒直徑(mm) 1.5 2.0 2.5 3.0 3.5 4.2 4.5
篩孔直徑(mm) 1.0 1.4 2.0 2.36 2.8 2.8 3.35
顆粒直徑(mm) 5.0 6.0 8.0 10.0 12.0 16.0 20.0
篩孔直徑(mm) 4.0 4.0 5.6 8.0 8.0 11.2 16.0
15.7 補(bǔ)充說明：在樣品量不足500克時，也可用250克樣品，回轉(zhuǎn)5min，測定粉化率。
16 預(yù)混合飼料混合均勻度的測定方法
本測定方法適用于含有鐵源的微量素預(yù)混合飼料混合均勻度的測定。
16.1 原理
本法通過預(yù)混合炰中鐵含量的差異來反映各組分分布的均勻性。通過鹽酸弮羥胺將樣品液中的鐵還原成二價鐵，再與顯色劑鄰菲羅啉反應(yīng)，生成橙紅色的絡(luò)合物，以比色法測定鐵的含量。
16.2 儀器設(shè)備
分析天平、752分光光度計、燒杯、移液管、容量瓶。
16.3 試劑和溶液
16.3.1 鹽酸
16.3.2 鄰菲羅啉溶液：溶解0.1g鄰菲羅啉于約80ml80℃的水中，冷卻后用水稀釋至100ml，保存于棕色瓶中，并置于冰箱內(nèi)可穩(wěn)定數(shù)周。
16.3.3 鹽酸羥胺溶液：溶解10g鹽酸羥胺(化學(xué)純)于水中，并稀釋至100ml，保存于棕色瓶中，并置于冰箱內(nèi)可穩(wěn)定數(shù)周。
16.3.4 乙酸鹽緩沖溶液：溶解8.3g無水乙酸鈉于蒸餾水中。加入12ml冰乙酸，并用水稀釋至100ml。
16.4 樣品的采集與制備
16.4.1 本法所需的樣品系預(yù)混合飼料成品，必須單獨采制。
16.4.2 包裝成品在成品庫取樣，一個包裝為一個點，每個樣品由一點集中取一樣。
16.4.3 每批飼料抽10個有代表性的實驗室樣品，每一樣品為50克。各實驗室樣品的分布點必須考慮代表性，取樣前不允許翻動或再混合。
16.4.4 將上述每個實驗室樣品在試驗室充分混勻，以四分法從中分取1-10g(視含鐵量不同)試樣進(jìn)行測定。
16.5 測定步驟
稱取試樣1-10g于燒杯中，加20ml濃鹽酸，充分混勻后用水稀釋至100ml，使樣品中無機(jī)鐵直接溶解，待溶液澄清后吸取上清液1ml(含鐵量約在40ug以下，否則要少稱樣或少用上清液，若溶液混濁，則應(yīng)過濾)于25ml竄量瓶中，加入鹽酸羥胺溶液1ml充分混勻，5min后加入乙酸鹽緩沖溶液5ml，搖勻后再加鄰菲羅啉溶液1ml，用水稀釋至25ml，充分混勻，放置30min，以水作參比溶液，用分光光度計在510nm波長處測定其吸光度。
只測樣呂混合均勻度時可直接用試樣溶液的吸光度計算。須計算鐵含量時，則以定量的分析純鐵絲或硫酸亞鐵銨作標(biāo)準(zhǔn)曲線。由每個試樣溶液測定值減支空白溶液值后從標(biāo)準(zhǔn)曲線上求得樣品液的鐵含量。
16.6 注意
16.6.1 試樣中加入濃鹽酸時必須慢慢滴加，以防樣液濺出。
16.6.2 對于高銅的預(yù)混合飼料可酌情將顯色劑鄰菲羅啉溶液的用量提高至3-5ml。
16.7 結(jié)果計算
X-=( X1+X2+X3+… X10)/10
S=√[(X1-X-)2+(X2-X-)2+(X3-X-)2+……+(X10-X-)2]/9
CV(%)=S/X-*100
17 油中雜質(zhì)的測定
17.1 儀器和用具
抽氣泵、抽氣瓶、安全瓶、2號玻璃砂芯漏斗、膠管、稱量皿、鑷子、量筒、玻棒、天平。
17.2 試劑
石油醚(沸程60-90℃)、95%乙醇、酸洗石棉、脫脂棉、定量濾紙等。
17.3 操作方法
17.3.1 準(zhǔn)備抽氣裝置：用膠管連接抽氣泵、抽氣瓶、安全瓶。用水將石棉分成粗細(xì)兩部分，先用粗的，后用細(xì)的石棉鋪墊玻璃砂芯漏斗約3mm厚，先用水沿玻棒傾入漏斗中抽洗，后用少量乙醇和石油醚先后抽洗，待石油醚揮凈后，將漏斗送入105℃電烘箱中，烘至前后兩次重量差不超過0.001g為止。
17.3.2　抽濾雜質(zhì)：稱取混勻試樣15-20g（W）于燒杯中，加入20-25ml石油醚，用玻璃棒攪拌使試樣溶解，傾入漏斗中，用石油醚將燒杯中的雜質(zhì)干凈的洗入漏斗內(nèi)，再將石油醚分?jǐn)?shù)次抽洗雜質(zhì)，洗至無油跡為止。
17.3.3 烘干雜質(zhì)：用脫脂棉揩凈漏斗外部，在105℃下烘至恒重（W1）。
17.3.4　結(jié)果計算
雜質(zhì)（%）＝W1/W*100
雙試驗結(jié)果允許相對平均偏差不超過0.04%。
18　油的酸價
酸價指中和1克油脂中的游離脂肪酸所需氫氧化鉀的毫克數(shù)。
18.1　儀器和用具
滴定管、250ml錐形瓶、試劑瓶、容量瓶、移液管、稱量瓶、天平。
18.2　試劑
18.2.1　0.1mol/L氫氧化鉀（或氫氧化鈉）標(biāo)準(zhǔn)溶液。
18.2.2　中性乙醚-乙醇（2：1）混合溶劑：臨用前用0.1mol/L堿液滴定至中性。
18.2.3　1%酚酞乙醇溶液。
18.3　操作方法
稱取均勻試樣3-5克（W）于錐形瓶中，加入混合50ml，搖動使試樣溶解，再加入三滴酚酞指示劑，用0.1mol/L堿液滴定至出現(xiàn)微紅色在30秒不消失，記下消耗的堿液毫升數(shù)（V）。
18.4　結(jié)果計算
酸價＝V*C*56.1/W
其中：C為堿液的濃度；
56.1為氫氧化鉀溶液的當(dāng)量濃度。