請(qǐng)教各位老師關(guān)于飼料中鈣，磷，鹽分的測(cè)定方法(j具體點(diǎn))

yuanmeng · 發(fā)表于 2008-1-1 15:56:21

我是個(gè)初學(xué)飼料化驗(yàn)員，希望各位老師多加指點(diǎn)，謝謝！~```

激光打印機(jī) · 發(fā)表于 2008-1-1 19:43:38

在這里問你只能問關(guān)鍵點(diǎn)

真正學(xué)還是你們化驗(yàn)室的人帶你比較好

yxy0725 · 發(fā)表于 2008-1-2 15:56:25

飼料中粗蛋白質(zhì)、總磷、鈣連續(xù)測(cè)定方法
1　原理
　　H2SO4和H2O2都是強(qiáng)氧化劑，在高溫下放出新生態(tài)氧［O］，使飼料中的有機(jī)物破壞分解釋放出CO2、SO2、NH3及各種無機(jī)元素，其中CO2、SO2釋放到空氣中，NH3與H2SO4結(jié)合生成(NH4)2SO4，P、Ca等各種無機(jī)離子均能分別留在消化液中。反應(yīng)簡(jiǎn)式如下：
　　
1.1　粗蛋白質(zhì)測(cè)定　硫酸銨在強(qiáng)堿條件下，蒸餾使氨逸出，用硼酸吸收后，用標(biāo)準(zhǔn)酸滴定，測(cè)定氮的含量，乘以6.25為粗蛋白質(zhì)含量。
1.2　磷的測(cè)定　磷在酸性條件下，與釩鉬酸銨作用，形成黃色釩鉬酸銨(NH4)3PO4NH4VO3*16MoO3絡(luò)合物，在420 nm波長下比色，其磷含量與吸光度成正比。
1.3　鈣的測(cè)定　EDTA絡(luò)合滴定法，在待測(cè)液中加入鈣黃綠素指示劑，用EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液絡(luò)合滴定鈣進(jìn)行測(cè)定。
2　測(cè)定方法
2.1　樣品消化
2.1.1　試劑配制　雙氧水：分析純，含量30 %(市售原裝為30 %～34 %，不用配制，直接使用)。硫酸：化學(xué)純，含量為98 %，無氮。
2.1.2　消化步驟
　　稱取粉碎過40目篩的飼料樣品0.5～1 g，精確到0.0001 g，全部放入150～250 mL凱氏燒瓶中，加濃硫酸10 mL，搖勻，瓶口放一只小漏斗，在消化過程中起回流作用以減少硫酸的損失，放在500 W電爐上消煮20 min，使硫酸大量冒煙，消化液呈醬油色，此時(shí)將凱氏瓶取下稍冷卻(手摸不燙手)，逐滴向瓶?jī)?nèi)加H2O2 10～15滴，加熱消化，如此反復(fù)2～3次，直至瓶?jī)?nèi)溶液清徹透明為止。消化完畢后，待凱氏瓶冷卻，將瓶?jī)?nèi)消化液小心地轉(zhuǎn)移到100 mL容量瓶中，待溶液冷卻至室溫后，用蒸餾水定容至刻度，搖勻，該消化液可作粗蛋白質(zhì)、總磷、鈣的測(cè)定。同時(shí)做空白試驗(yàn)，以校正試劑的誤差。
2.2　粗蛋白質(zhì)測(cè)定
2.2.1　試劑配制　氫氧化鈉：化學(xué)純，含量40 %，40 g溶解在100 mL蒸餾水中。硼酸：分析純，含量2 %，2 g溶解在100 mL蒸餾水中。混合指示劑：甲基紅0.1 %乙醇溶液，溴甲酚綠0.5 %乙醇溶液，兩溶液等體積混合，用棕色瓶貯于陰涼處。0.05 mol/L鹽酸標(biāo)準(zhǔn)液：4.2 mL分析純濃鹽酸溶成1000 mL水溶液，用鄰苯二甲酸氫鉀法標(biāo)定。
2.2.2　氨的蒸餾與滴定　用半微量水蒸汽蒸餾法，取20 mL 2 %硼酸吸收液，加混合指示劑兩滴使冷凝管末端浸入。吸取10 mL樣品消化液于反應(yīng)室中，再加5 mL 40 %氫氧化鈉溶液，用少量水沖洗進(jìn)樣口，塞好進(jìn)樣口玻璃塞，防止漏氣，蒸餾4 min，冷凝管尖端稍高于吸收液面再蒸餾1 min，用蒸餾水沖洗冷凝管尖端，沖洗液與吸收液合并，立即用0.05 mol/L鹽酸溶液滴定，溶液由藍(lán)綠色突變?yōu)榛壹t色為終點(diǎn)，同時(shí)進(jìn)行空白測(cè)定。
2.2.3　計(jì)算
　　
　　式中：V2—滴定試樣時(shí)所需標(biāo)準(zhǔn)酸溶液體積，mL；V1—滴定空白時(shí)所需標(biāo)準(zhǔn)酸溶液體積，mL；N—鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液當(dāng)量濃度；W—樣品重量，g；0.0140—與1.00 mL鹽酸標(biāo)準(zhǔn)液(1.000 mol/L)相當(dāng)?shù)牡目藬?shù)；6.25—氮換算成蛋白質(zhì)的系數(shù)。
2.3　總磷的測(cè)定
2.3.1　試劑配制　釩鉬酸銨顯色劑：稱取偏釩酸銨1.25 g，加硝酸250 mL，另取鉬酸銨25 g，加蒸餾水400 mL溶解，冷卻后將此溶液倒入上述溶液，加水定容至1000 mL貯于棕色瓶中，若生成沉淀，則不能繼續(xù)使用。磷標(biāo)準(zhǔn)溶液：稱取KH2PO4(105 ℃烘干2 h，干燥器中冷卻)0.2195 g，溶于水，定量轉(zhuǎn)入1000 mL容量瓶中，加硝酸3 mL，用蒸餾水稀釋至刻度，搖勻，配成50 μg/mL的磷標(biāo)準(zhǔn)溶液。
2.3.2　測(cè)定步驟
2.3.2.1　標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制或求回歸方程式：準(zhǔn)確吸取0、1.0、2.0、5.0、10.0、15.0 mL磷標(biāo)準(zhǔn)溶液于50 mL容量瓶中，各加釩鉬酸銨顯色劑10 mL，用水稀釋至刻度，搖勻，常溫下放置10 min以上，以0溶液為參比，用10 mm比色池在420 nm波長下，使用分光光度計(jì)測(cè)定各溶液的吸光度。以磷含量為橫坐標(biāo)、吸光度為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線或求出回歸方程式。
2.3.2.2　試樣的測(cè)定：準(zhǔn)確吸取2～10 mL樣品消化液(含磷量50～750 μg)于50 mL容量瓶中，加入釩鉬酸銨顯色劑10 mL，以空白消化液作參比，按2.3.2.1的方法顯色和比色測(cè)定，測(cè)得試樣分解液的吸光度，用標(biāo)準(zhǔn)曲線查得或用回歸方程式求得試樣分解液的含磷量。
2.3.3　計(jì)算
　　
　　式中：m—試樣的質(zhì)量，g；X—由標(biāo)準(zhǔn)曲線查得或用回歸方程式求得試樣分解液的磷含量，μg；V—移取試樣分解液體積，mL。
2.4　鈣的測(cè)定
2.4.1　試劑配制　鹽酸羥胺：分析純。鹽酸：分析純，1+3(V1+V2)。氫氧化鉀溶液：分析純，200 g/L。三乙醇胺水溶液：分析純，1+1(V1+V2)。乙二胺水溶液：分析純，1+1(V1+V2)。
　　淀粉溶液(10 g/L)：稱取1 g可溶性淀粉于200 mL燒杯中，加5 mL水潤濕，加95 mL沸水?dāng)噭?，煮沸，冷卻備用(現(xiàn)配現(xiàn)用)?？兹甘G水溶液1 g/L。鈣黃綠素—甲基百里香酚藍(lán)指示劑：0.1 g鈣黃綠素與0.13 g甲基百里香酚藍(lán)、5 g氯化鉀研細(xì)混勻，貯存于磨口瓶中備用。鈣標(biāo)準(zhǔn)溶液(0.0010 g/mL)：稱取于105～110 ℃干燥至恒重的基準(zhǔn)碳酸鈣2.497 g，溶于40 mL鹽酸中，加熱趕除CO2，冷卻，用水轉(zhuǎn)移至1000 mL容量瓶中，稀釋至刻度。
　　EDTA標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液：稱取3.8 g EDTA于200 mL燒杯中，加200 mL水，加熱溶解冷卻后轉(zhuǎn)至1000 mL容量瓶中，用水稀釋至刻度。EDTA標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液的標(biāo)定：準(zhǔn)確吸取鈣標(biāo)準(zhǔn)溶液10.0 mL，按試樣測(cè)定法進(jìn)行滴定。EDTA標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液對(duì)鈣的滴定度按下式計(jì)算：
　　
　　式中：T—EDTA標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液對(duì)鈣的滴定度，g/mL；C—鈣標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度，g/mL；V—所取鈣標(biāo)準(zhǔn)溶液體積，mL；V0—EDTA標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液用量，mL。
2.4.2　測(cè)定步驟　準(zhǔn)確移取樣品消化液5～25 mL(含鈣量2～25 mg)，加水50 mL、淀粉溶液10 mL、三乙醇胺2 mL、乙二胺1 mL、1滴孔雀石綠，滴加氫氧化鉀溶液至無色，再過量10 mL，加0.1 g鹽酸羥胺(每加一種試劑都須搖勻)、加鈣黃綠素少許，在黑色背景下立即用EDTA標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液滴定至綠色熒光消失呈紫紅色為滴定終點(diǎn)。
2.4.3　計(jì)算
　　
　　式中：T-EDTA標(biāo)準(zhǔn)滴定液對(duì)鈣的滴定度，g/mL；V1—分取試樣分解液的體積，mL；V2—實(shí)際消耗EDTA標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液體積，mL；m—試樣質(zhì)量，g。
3.3　本方法操作與國標(biāo)法相比，只是樣品預(yù)處理與國標(biāo)法不同，其他與國標(biāo)法相同。