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7樓
發(fā)表于 2009-2-23 01:47:41
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生化黃腐酸對奶牛體細(xì)胞數(shù)及生產(chǎn)性能影響的研究
錫效旺1 孫少華1 韓立霞1
1.河北農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科技學(xué)院 保定 071001
摘要：通過對奶牛飼喂生化黃腐酸試驗(yàn)，研究其對奶牛生產(chǎn)性能、血液生化指標(biāo)及體細(xì)胞計(jì)數(shù)的影響，進(jìn)一步研究奶牛乳房炎的抗病力。選擇50頭泌乳奶牛，進(jìn)行分組試驗(yàn)。結(jié)果表明，添加生化黃腐酸的試驗(yàn)組奶牛的產(chǎn)奶量較對照組提高了5.99%,乳脂率提高8.50%,體細(xì)胞數(shù)下降了40.09%，蛋白率變化不明顯；奶牛血清中SOD含量提高了3.6%，GSH-PX含量提高了7.72%，LDH含量降低9.3%，MDA變化不明顯，奶牛白細(xì)胞維持正常，兩組各項(xiàng)指標(biāo)差異均不顯著（p＞0.05）。綜合指標(biāo)分析表明：飼喂生化黃腐酸具有提高奶牛泌乳性能，減少奶牛體細(xì)胞計(jì)數(shù)，增強(qiáng)機(jī)體抗病力的效果。
關(guān)鍵詞：生化黃腐酸；奶牛；體細(xì)胞數(shù)；生產(chǎn)性能；生化指標(biāo)
Study on the Effect of Biochemical Fulvic Acid on Somatic cell count
and Milk Performance of Dairy Cow
Xi xiao-wang Sun shao-hua Han li-xia
(College of Animal Science and Technology, Agricultural University of Hebei, Baoding, 071001.)
Abstract: Study to feed biochemical fulvic acid(BFA) influence milk performance,blood biochemical indicators , somatic ceel count and mastitis resistibility of dairy cows .Selectting 50 lactation cows were divided into test group and control group. Research results showed that milk yield , milk fat percentage and SOD ,GSH-PX content in serum for dairy cow of BFA test group were increased 5.99% , 8.50% 3.6% and 7.72% respectively than the control group.Somatic cell count, LDH content in serum for dairy cow of BFA test group dropped 40.09% and 9.3% respectively than control group. Milk protein percentage , MDA content in serum and WBC of blood for dairy cow of BFA test group did not change significantly. The all test index are not significantly different (p> 0.05). The experiment of feeding BFA for dairy cows showed that BFA enhance the body resistance and milk performance.
Key words: Biochemical fulvic acid; Dairy cows; Somatic cell count; Performance; Biochemical indicators
前言
乳房炎是危害奶牛業(yè)健康發(fā)展的重要疾病，每年臨床性乳房炎發(fā)病率為15%~20%，隱性乳房炎發(fā)病率為46%~85.7%，不僅造成產(chǎn)奶量降低4%~20%，而且鮮乳品質(zhì)大大下降，美國每年每頭乳房炎損失225美元，中國約為1200~3600元。由于隱性乳房炎難以發(fā)現(xiàn)，使牛場造成的經(jīng)濟(jì)損失更難以估計(jì)[1]【2】。因此，預(yù)防和治療乳房炎就成為當(dāng)前奶牛場的重要工作。乳中體細(xì)胞計(jì)數(shù)（Somatic cell count，SCC）是反映乳房是否炎癥（包括隱性乳房炎）的一個(gè)重要指標(biāo)，乳房感染程度越高，乳中體細(xì)胞數(shù)越多。據(jù)研究，臨床性乳房炎與SCC呈高度相關(guān)性（r=0.5~0.7） [3] [4]。因此各國把測定奶牛體細(xì)胞數(shù)作為奶牛乳房炎抗性的選擇性狀和監(jiān)測指標(biāo)。國際奶牛聯(lián)合會規(guī)定：SCC在20-40萬為隱型乳房炎，50萬以上為臨床型乳房炎。據(jù)報(bào)道奶牛日產(chǎn)奶量與隱性乳房炎發(fā)病程度呈極顯著負(fù)相關(guān)[4]。乳汁中體細(xì)胞數(shù)越高,泌乳量減少的越多。
乳房炎傳統(tǒng)的治療方法主要使用抗生素等藥物,其結(jié)果不僅因藥物殘留造成鮮乳的廢棄，而且長時(shí)間使用抗生素類藥物會使奶牛產(chǎn)生抗藥性，影響藥效。因此，一種預(yù)防和治療乳房炎，且無藥物殘留的生態(tài)型制劑，生化黃腐酸也就應(yīng)運(yùn)而生了。
生化黃腐酸（Biochemical Fulvic Acid,BFA）是一種有機(jī)物經(jīng)微生物發(fā)酵而產(chǎn)生的大分子聚合物，內(nèi)含多種具有生物活性的抗病因子及氨基酸、維生素等營養(yǎng)物質(zhì)。其生物活性具有消炎、止血、收斂、抗過敏、調(diào)整胃腸機(jī)能、增強(qiáng)機(jī)體免疫能力的功效，日糧中少量添加有防病保健及增產(chǎn)作用[5]。孫少華等[6]發(fā)現(xiàn)利用生化黃腐酸添加劑治療奶牛乳房炎，治愈率達(dá)80%以上；張螢蕾等[7]也報(bào)道了日糧中添加生化黃腐酸BFA粉可顯著降低臨床乳房炎發(fā)病率及隱性乳房炎檢出率,從而提高奶牛產(chǎn)奶量,可提高牛奶品質(zhì),降低治療費(fèi)用,增加效益。谷子林等[8]進(jìn)行的試驗(yàn)表明,生化黃腐酸可提高機(jī)體的非特異性免疫力,增加白細(xì)胞數(shù)量和吞噬細(xì)胞活性,同時(shí)具有止血和收斂作用。本實(shí)驗(yàn)通過給泌乳期奶牛添加生化黃腐酸，研究其對奶牛體細(xì)胞數(shù)和生產(chǎn)性能以及血液生化指標(biāo)的影響,進(jìn)而達(dá)到降低體細(xì)胞數(shù)、預(yù)防乳房炎，提高生產(chǎn)性能的目的。
1實(shí)驗(yàn)材料和方法
1.1 試驗(yàn)地點(diǎn)和時(shí)間
試驗(yàn)地點(diǎn)設(shè)在唐山市蘆臺天成奶牛場，試驗(yàn)時(shí)間為2008年3月8日至5月10日，試驗(yàn)期為兩個(gè)月。
1.2試驗(yàn)牛的選擇和分組
唐山蘆臺天成奶牛場選擇50頭泌乳前中期的健康荷斯坦牛，根據(jù)產(chǎn)奶量，體細(xì)胞數(shù)，胎次和泌乳天數(shù)等相近的原則分為試驗(yàn)組和對照組，每組25頭。實(shí)驗(yàn)前進(jìn)行T檢驗(yàn)，各項(xiàng)指標(biāo)差異不顯著后進(jìn)行試驗(yàn)。
1.3 飼養(yǎng)管理
唐山蘆臺天成奶牛場飼喂全價(jià)混合標(biāo)準(zhǔn)日糧，由TMR機(jī)械投喂，日投3次、擠奶3次，生化黃腐酸分2次添加到早晚飼喂的奶牛全混合日糧中，每頭每天15克。
1.4 血樣、乳樣的采集與測定
試驗(yàn)?zāi)膛＞捎脭D奶機(jī)擠奶，試驗(yàn)期每月定期采集一次乳樣送河北省良種站DHI測定中心進(jìn)行DHI分析，測定乳脂率，乳蛋白率和乳中的體細(xì)胞數(shù)。試驗(yàn)期前和試驗(yàn)期后每頭奶牛各采集一次血樣，分離血清，用于奶牛血液生理生化指標(biāo)測定。
1.5 試驗(yàn)材料
1.5.1 生化黃腐酸粉劑由深州綠源牧業(yè)公司提供。
1.5.2 生化分析試劑盒：超氧化物歧化酶（SOD）測試盒、谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-PX）測試盒、乳酸脫氫酶（LDH）測試盒和丙二醛（MDA）測試盒及測定方法均由南京建成生物工程研究所提供。
1.5.2血常規(guī)及白細(xì)胞數(shù)均由河北大學(xué)附屬醫(yī)院分析測定
1.6 統(tǒng)計(jì)分析
在數(shù)據(jù)處理過程中采用了通用的產(chǎn)犢季節(jié)劃分標(biāo)準(zhǔn)和泌乳階段劃分標(biāo)準(zhǔn)[9]。
表1 產(chǎn)犢季節(jié)和泌乳階段劃分標(biāo)準(zhǔn)
產(chǎn)犢季節(jié) 水平 泌乳階段 水平
春（3、4、5） 1 前期（0～15） 1
夏（6、7、8） 2 盛期（16～100） 2
秋（9、10、11） 3 中期（101～200） 3
冬（12、1、2） 4 后期（201～305） 4
305天以上—— 5
為了消除胎次、產(chǎn)犢季節(jié)、泌乳階段對產(chǎn)奶量、乳成分及體細(xì)胞計(jì)數(shù)的影響，構(gòu)建了最小二乘線性模型[10][11]。其線性模型為：
Y =µ + z + t + c + m +e
其中Y-各性狀的觀察值；µ-各性狀最小二乘均值；z-試驗(yàn)分組效應(yīng)； t-胎次效應(yīng)； c-產(chǎn)犢季節(jié)效應(yīng)；m-泌乳階段效應(yīng)；e－殘差效應(yīng)。
應(yīng)用Excel對所測數(shù)據(jù)進(jìn)行T檢驗(yàn)和利用SAS軟件對所測數(shù)據(jù)做最小二乘法分析。
2 結(jié)果與分析
2.1 生化黃腐酸對奶牛產(chǎn)奶量、乳成分及體細(xì)胞數(shù)的影響
表2 天成奶牛場奶牛產(chǎn)奶量及體細(xì)胞數(shù)最小二乘均值及差異顯著性檢驗(yàn)
產(chǎn)奶量(kg) 體細(xì)胞數(shù)(萬個(gè)/ml)
項(xiàng)目 試驗(yàn)前 試驗(yàn)后 差值 P 試驗(yàn)前 試驗(yàn)后 差值 P
試驗(yàn)組 34.58±2.33 26.89±2.44 -7.69 0．04 43.65±16.9 18.23±9.1 -25.4 0.009
對照組 35.95±2.56 25.37±2.35 -10.58 0．005 39.78±18.5 30.43±8.8 -9.35 0.08
差值 -1.37 1.52 ＋2.89 -3.9 -12.2 －16.05
F 0.28 0.25 0.04 1.16
P 0.60 0.62 0.80 0.29
注：試驗(yàn)組、對照組各25頭； 橫向?yàn)門檢驗(yàn)，縱向?yàn)樽钚《藱z驗(yàn)。
從表2可以看出，試驗(yàn)前后的兩組奶牛產(chǎn)奶量均下降，且差異均顯著（p＜0.05）。其中試驗(yàn)組測定日下降7.69kg/頭，對照組下降10.58kg/頭，試驗(yàn)組下降較對照組下降緩慢，少下降2.89kg/頭日。在試驗(yàn)后比較，試驗(yàn)組平均產(chǎn)奶量比對照組提高1.52kg/頭日，提高了5.99%,但差異不顯著（p＞0.05）；試驗(yàn)組體細(xì)胞數(shù)比對照組減少了12.2萬個(gè)/ml,但差異不顯著（p＞0.05）。與試驗(yàn)前比較，試驗(yàn)組和對照組的體細(xì)胞數(shù)均有所下降，試驗(yàn)組下降25.4萬個(gè)/ml（p＜0.05）,對照組下降9.35萬個(gè)/ml（p＞0.05）,但試驗(yàn)組較對照組下降明顯，多減少體細(xì)胞數(shù)為16.05萬/ml。
表3 天成奶牛場奶牛乳成分最小二乘均值及差異顯著性檢驗(yàn)
乳脂率（%） 乳蛋白率（%）
項(xiàng)目 試驗(yàn)前 試驗(yàn)后 差值 P 試驗(yàn)前 試驗(yàn)后 差值 P
試驗(yàn)組 3.15±0.23 3.29±0.23 0.14 0.03 3．10±0.06 3．03±0.06 －0.07 0.21
對照組 3.12±0.25 2.94±0.22 -0.18 0.42 3.04±0.07 2．97±0.07 -0.07 0.26
差值 0.03 0.35 ＋0.32 0.06 0.06 0
F 0.02 3.63 1.19 0.68
P 0.90 0.06 0.28 0.42
注：試驗(yàn)組、對照組各25頭。橫向?yàn)門檢驗(yàn)，縱向?yàn)樽钚《藱z驗(yàn)。
從表3中可以看出，在試驗(yàn)后，試驗(yàn)組測定日乳脂率較對照組增加0.35個(gè)百分點(diǎn),提高了 11.9%，差異不顯著（p＞0.05）；試驗(yàn)組乳蛋白率較對照組增加0.06個(gè)百分點(diǎn)，提高了1.97%，差異不顯著（p＞0.05）。與試驗(yàn)前對比，試驗(yàn)組乳脂率升高了0.14個(gè)百分點(diǎn)（p＜0.05），而對照組降低了0.18個(gè)百分點(diǎn)，即試驗(yàn)組相對提高了0.32個(gè)百分點(diǎn)；乳蛋白率試驗(yàn)前后對比，兩組均同步有所下降，但差異不顯著（p＞0.05）。
2.2生化黃腐酸對奶牛血液生化指標(biāo)的影響
2.2.1唐山蘆臺天成奶牛場生化黃腐酸對奶牛血液生化指標(biāo)的影響
表4 生化黃腐酸對奶牛血液生化指標(biāo)的影響
項(xiàng)目 試驗(yàn)組（25） 對照組（25） P值（t檢驗(yàn)）
白細(xì)胞WBA（U/L） 8.8±1.23 12.4±2.65 0．06
超氧化物歧化酶SOD（U/mL） 133.69±19.49 129.1±21.33 0．23
谷胱甘肽過氧化物酶GSH-PX（U/L） 395.23±175.35 366.90±184.56 0．30
乳酸脫氫酶LDH（U/L） 3908.46±1341.94 4306.97±2753.16 0．12
丙二醛MDA (mmol/ml) 4.42±2.18 3.79±1.65 0．14
注：試驗(yàn)組對照組各25頭
從表4可以看出，唐山蘆臺天成奶牛場試驗(yàn)組奶牛血清中SOD含量比對照組提高了3.60%，GSH-PX含量提高了7.72%，奶牛血清中LDH比對照組降低了9.3%，MDA有所提高，但差異均不顯著（p＞0.05）；生化黃腐酸并且能使奶牛白細(xì)胞維持在正常的范圍內(nèi)。
3 效益分析
表2和表3分析結(jié)果表明，添加生化黃腐酸后，試驗(yàn)組比對照組每頭奶牛平均每天增產(chǎn)1.52千克，平均乳脂率提高0.35個(gè)百分點(diǎn),平均蛋白率提高0.07個(gè)百分點(diǎn)，體細(xì)胞數(shù)減少12.2萬個(gè)/ml，達(dá)到國家一級鮮奶的要求。若按現(xiàn)在市場鮮奶價(jià)格每千克2.8元，生化黃腐酸每頭奶牛每天投入0.6元（＝15克/頭日×0.04元/克）計(jì)算，則每頭牛每日凈增加收入為3.66元（＝1.52kg×2.8元/kg－0.6元/日），若按泌乳期305天計(jì)算，一個(gè)泌乳期每頭牛僅因產(chǎn)奶量增加就可多增收1116.3元，經(jīng)濟(jì)效益十分顯著。另外通過添加生化黃腐酸，降低了奶牛因乳房炎的淘汰率，延長了奶牛的利用年限，降低了生產(chǎn)成本。
4 討論
4.1利用最小二乘線性模型剔除系統(tǒng)環(huán)境效應(yīng)
本試驗(yàn)利用最小二乘分析法，對奶牛的胎次、泌乳階段和產(chǎn)犢季節(jié)進(jìn)行了校正，剔除了系統(tǒng)環(huán)境效應(yīng)的影響，使奶牛產(chǎn)奶量、乳脂率、乳蛋白率和體細(xì)胞數(shù)值準(zhǔn)確、可靠，達(dá)到了最佳線性無偏估計(jì)。
4.2生化黃腐酸對奶牛產(chǎn)奶量和乳成分的影響
從表2和表3可以看出，添加生化黃腐酸后試驗(yàn)組奶牛的平均產(chǎn)奶量較對照組每天上升了1.52kg/頭，并且乳脂率、乳蛋白率較對照組也有所升高，這與高靜、吳子申等[12]報(bào)道的奶牛投喂生化黃腐酸后平均產(chǎn)奶量，乳脂率提高變化趨勢基本一致。通過試驗(yàn)前后奶牛產(chǎn)奶量的對比分析還可以看出，由于接近夏季且到泌乳后期，雖然試驗(yàn)組和對照組產(chǎn)奶量均有所下降，但試驗(yàn)組奶牛平均產(chǎn)奶量較對照組下降緩慢，少下降2.89千克，證明了生化黃腐酸對于維持奶牛的高產(chǎn)性能也有重要作用。
另外，為了保證試驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，我們還對蘆臺天成奶牛場飼喂生化黃腐酸的大牛群與未飼喂的大牛群共82頭（試驗(yàn)群38頭，對照群44頭）進(jìn)行了DHI數(shù)據(jù)資料分析（試驗(yàn)前各項(xiàng)指標(biāo)檢驗(yàn)差異均不顯著（p＞0.05））。大群的試驗(yàn)前后對比說明試驗(yàn)結(jié)果變化趨勢同小組試驗(yàn)結(jié)果一致，測定日產(chǎn)奶量試驗(yàn)群比對照群少下降0.78千克（試驗(yàn)群－6.94kg，對照群－7.72kg），試驗(yàn)群的乳脂率和乳蛋白率較試驗(yàn)前分別提高了0.54和0.07個(gè)百分點(diǎn)，而對照群乳脂率則下降0.25個(gè)百分點(diǎn)，乳蛋白率未變。試驗(yàn)后，試驗(yàn)群乳脂率和乳蛋白率較對照群分別提高0.47（3.26%-2.79%；P﹤0.05）和0.04（3.10%－3.06%；P＞0.05）。進(jìn)一步證明了生化黃腐酸具有提高奶牛產(chǎn)乳量和乳質(zhì)量的作用。
4.3生化黃腐酸對奶牛體細(xì)胞數(shù)及乳房炎的影響
抗病力通過表2可以明顯的看到投喂生化黃腐酸后，試驗(yàn)組奶牛的體細(xì)胞數(shù)明顯低于對照組12.2萬，并且維持在18.2萬的較低水平，達(dá)到國家一級奶的要求。在同一牛場的大群82頭試驗(yàn)也同樣說明了試驗(yàn)群比對照群體細(xì)胞數(shù)少43.73萬/ml（33.26－76.99），且對照群患乳房炎牛頭數(shù)增多，也進(jìn)一步證明生化黃腐酸有減少奶牛體細(xì)胞數(shù)，降低乳房炎發(fā)病率的功效。
4．4生化黃腐酸對奶牛免疫力的影響
從表4看出，投喂生化黃腐酸后，奶牛血清中的SOD、GSH-PX有所升高，LDH下降、MDA有升高。另外我們在保定宏康奶牛場對26頭奶牛飼喂生化黃腐酸的進(jìn)一步試驗(yàn)證明，其結(jié)果同蘆臺牛場一致，試驗(yàn)組奶牛血清中SOD、GSH-PX比對照組分別提高1.7％(153.74:151.23)和1.53％(357.28:351.91),MDA下降22.7％（1.50：1.94），但差異不顯著（p＞0.05）。說明奶牛主要通過提高SOD、GSH-PX酶的抗氧化活性來及時(shí)消除體內(nèi)過剩自由基對機(jī)體組織的危害[13]。并且據(jù)生化黃腐酸的體外抗菌實(shí)驗(yàn)研究表明生化黃腐酸在體外不能殺菌,但內(nèi)服卻具有抗菌作用,而且無任何副作用[14]。其主要是誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生干擾素，激活網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)增強(qiáng)非特異性免疫，對病原微生物產(chǎn)生強(qiáng)大抵抗力。說明生化黃腐酸對奶牛維持正常的生理機(jī)能和增強(qiáng)免疫力有重要作用。
致謝：河北省良種工作站倪俊卿副主任和馬亞濱提供奶牛DHI數(shù)據(jù)，蘆臺天成奶牛場劉煥君場長幫助飼養(yǎng)試驗(yàn)。
參考文獻(xiàn)：
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附錄
1.供試?；厩闆r見表1，2。
表1 唐山蘆臺天成供試?；厩闆r
項(xiàng)目 平均胎次 平均泌乳天數(shù) 平均產(chǎn)奶量 平均乳脂率 SCC（萬個(gè)/ml）
試驗(yàn)組（25） 3.28±1.43 158.2±52.7 34.58±2.33 3.15±0.23 43.65±16.9
對照組（25） 3.04±1.06 165.5±50.6 35.95±2.56 3.12±0.25 39.78±18.5
P值 0．25 0．31 0．60 0．79 0．95
注：括號內(nèi)為牛頭數(shù)
表2 保定宏康供試牛基本情況
項(xiàng)目 平均胎次 平均泌乳天數(shù) 平均產(chǎn)奶量 平均乳脂率 SCC（萬個(gè)/ml）
試驗(yàn)組（13） 1.92±0.75 150.7±72.6 14.70±5.42 4.22±0.91 51.4±54.7
對照組（13） 1．92±1.03 150.4±73.3 13.15±5.48 4.25±1.36 50.2±59.0
P值 0．37 0．24 0．21 0．18 0．65
注：括號內(nèi)為牛頭數(shù)
2.大群分析比較
表3 天成奶牛場大群牛產(chǎn)奶量及體細(xì)胞數(shù)LSM值及顯著性檢驗(yàn)
產(chǎn)奶量(kg) 體細(xì)胞數(shù)(萬個(gè)/ml)
項(xiàng)目 試驗(yàn)前 試驗(yàn)后 差值 P 試驗(yàn)前 試驗(yàn)后 差值 P
試驗(yàn)組 29．20±1.67 22.26±1.98 -6.94 0．002 29.71±11.1 33.26±20.3 3.55 0．28
對照組 31．96±1.70 24.24±2.05 -7.72 5．7*10-5 24.12±11.3 76.99±21.0 52.87 0．14
差值 -2.76 -1.98 5.59 -43.73
F 2.24 0.80 0．21 3.73
P 0．14 0．37 0．65 0．06
注：試驗(yàn)組38頭，對照組44頭橫向?yàn)門檢驗(yàn)，縱向?yàn)樽钚《藱z驗(yàn)，均值為最小二乘均值。
表4 天成奶牛場大群奶牛乳成分LSM值及差異顯著性檢驗(yàn)
乳脂率 蛋白率
項(xiàng)目 試驗(yàn)前 試驗(yàn)后 差值 P 試驗(yàn)前 試驗(yàn)后 差值 P
試驗(yàn)組 2.72±0.37 3.26±0.16 0.54 0．19 2.96±0.11 3.10±0.06 0.07 0．24
對照組 3.04±0.37 2.79±0.16 -0.25 0．07 3.06±0.11 3.06±0.07 0 0．07
差值 -0.32 0.47 -0.1 0.04
F 0．63 7．61 0．66 0.30
P 0．43 0．007 0．42 0．59
注：試驗(yàn)組38頭，對照組44頭橫向?yàn)門檢驗(yàn)，縱向?yàn)樽钚《藱z驗(yàn)，均值為最小二乘均值。
3. 保定宏康奶牛場生化黃腐酸對奶牛血液生化指標(biāo)的影響
表5 生化黃腐酸對奶牛血液生化指標(biāo)的影響
項(xiàng)目 試驗(yàn)組（13） 對照組（13） P值
白細(xì)胞WBA（U/L） 7.28±1.95 6.8±1.50 0．26
超氧化物歧化酶SOD SOD（U/mL） 153.74±16.65 151.23±20.27 0．34
谷胱甘肽過氧化物酶GSH-PX（U/L） 357.28±30.96 351.91±44.50 0．36
MDA (mmol/ml) 1.50±1.11 1.94±1.47 0．20
注：試驗(yàn)組對照組各13頭 |
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