維生素E機(jī)制的研究

lishanwen

　　摘要: 本文從不同側(cè)面、不同層次介紹了VE對動(dòng)物機(jī)體免疫的方式及機(jī)制。主要內(nèi)容包括：特異性細(xì)胞免疫途徑、特異性體液免疫途徑、細(xì)胞因子途徑、免疫繼代途徑、疫苗佐劑途徑、內(nèi)分泌途徑、非特異性細(xì)胞免疫途徑、免疫系統(tǒng)生長發(fā)育途徑等。
      關(guān)鍵詞：VE 免疫功能 免疫途徑
      引言
      近年來的研究表明：當(dāng)機(jī)體VE處于臨界水平或輕度缺乏時(shí)，動(dòng)物可不表現(xiàn)臨診癥狀，但其免疫功能受到不同程度的損害，對疾病的易感染性增加，給予動(dòng)物高于生理需要量的VE可顯著提高其免疫應(yīng)答。VE這種對動(dòng)物免疫系統(tǒng)功能的促進(jìn)作用引起了廣大學(xué)者的關(guān)注并進(jìn)行了廣泛的研究，本文就VE增強(qiáng)動(dòng)物免疫力機(jī)制的研究情況做一簡單的介紹。
       一 通過免疫繼代效應(yīng)
       研究者早就發(fā)現(xiàn)：飼糧中添加高劑量的VE可增強(qiáng)種母雞IgG等抗體向雛雞的轉(zhuǎn)移和提高巨噬細(xì)胞的吞噬力。翟少偉等（2001）明確提出：VE對畜禽體液免疫有繼代效應(yīng)。Tackson等(1978)報(bào)道：母雞日糧中添加450mg/kgVE，可使更多的免疫球蛋白傳遞給雛雞，并提高雛雞的原發(fā)性免疫反應(yīng)。Nockels等(1979)證實(shí)給雞飼喂高水平VE，后代雞體內(nèi)的抗體水平增加。Babinszky(1991)報(bào)道：母豬日糧中補(bǔ)充VE后，可提高一日齡仔豬血清中IgG水平，其仔豬在一周齡時(shí)吞噬細(xì)胞的活性也增高。Haq(1996)報(bào)道：母雞日糧中添加一定量VE，可使后代雞在1~7日齡時(shí)的抗體水平顯著高于對照組。
      二 作為疫苗佐劑
      Tengtdy等（1983）在做綿羊接種實(shí)驗(yàn)時(shí)發(fā)現(xiàn)：VE作為疫苗佐劑對抗體生成量的影響要比日糧中  添加VE的反應(yīng)大得多。Franchini等（1991）將VE與礦物油混合作為細(xì)菌或病毒滅活抗原的免疫佐劑，發(fā)現(xiàn)VE可明顯提高上述抗原的免疫應(yīng)答。Hogan等（1993）在不同階段用含5mlVE佐劑的大腸桿菌J5菌苗接種奶牛，結(jié)果提高了其血清IgM濃度；同時(shí)還發(fā)現(xiàn)VE和弗氏不完全佐劑（FIA）混合物接種組較僅用FLA5ml接種組減弱了注射部位組織的氧化損傷，提高了血清和乳中的IgG濃度，延長了抗體反應(yīng)的持續(xù)時(shí)間。何潔（1995）在研究仔雞MD免疫增強(qiáng)劑時(shí)發(fā)現(xiàn)：加VE制劑組的免疫后、攻毒前外周血T細(xì)胞數(shù)量升高最快。李泰萬等（1995）在ND油苗加入一定量硒和VE作佐劑對120天的蛋雞進(jìn)行免疫，結(jié)果表明ND抗體的形成量大大增加， Tengerdy等（1991）、曹永長等（1996）、Franchini(1996) 也有相關(guān)報(bào)道。
      三 對免疫器官的影響
      VE是胸腺、脾臟和法氏囊等免疫組織器官生長發(fā)育的必需因子，當(dāng)VE缺乏時(shí)，這些器官的正常生長發(fā)育會(huì)受到抑制，其免疫功能也會(huì)受到損傷甚至完全喪失。Corwin(1982)指出：VE能促進(jìn)脾細(xì)胞的分裂(脾細(xì)胞能刺激T細(xì)胞的反應(yīng)性)。Tengerdy等（1973）研究發(fā)現(xiàn)：動(dòng)物采食VE之后，機(jī)體內(nèi)合成抗體的細(xì)胞數(shù)明顯增加，使脾臟重量明顯增大。Dietest等（1983）報(bào)道顯示：VE缺乏時(shí)，家禽胸腺、脾臟和法氏囊的生長發(fā)育明顯受到抑制，并導(dǎo)致這些組織的損傷性變化。Marsh(1986)給雞喂缺乏VE 和添加130mg/kg VE的日糧，結(jié)果顯示缺乏VE的雞脾臟重量減少了27.1mg，法氏囊的重量減少56.4mg。Marsh(1987)又報(bào)道，若在缺乏VE的同時(shí)缺乏微量元素Se，會(huì)導(dǎo)致以上皮細(xì)胞逐漸退化和淋巴細(xì)胞耗竭為特征的法氏囊嚴(yán)重病變和胸腺輕度病變的組織病理學(xué)變化。Van,Dman(1993)明確指出：隨著日齡的增加，雞血液和肝臟中VE含量逐漸降低，故應(yīng)提高VE的添加量來增加胸腺和法氏囊的重量。
      四 對細(xì)胞因子的影響
      細(xì)胞因子是免疫細(xì)胞和非免疫細(xì)胞合成和分泌的小分子多肽類因子，主要有白細(xì)胞介素—1、血清干擾素、一氧化氮等，它們可以促進(jìn)耙細(xì)胞增殖和分化，增強(qiáng)抗感染和細(xì)胞的殺傷力，促進(jìn)或抑制其它細(xì)胞因子和膜表面分子的表達(dá)等。Stabel等發(fā)現(xiàn)：VE能使刀豆球蛋白A刺激的閹牛單核細(xì)胞的白細(xì)胞介素—1的mRNA表達(dá)提高55%，由此認(rèn)為VE可能是免疫興奮劑，它通過增加白細(xì)胞介素—1活化B細(xì)胞和T細(xì)胞。Gebremichae等（1984）研究也表明：VE可通過對白細(xì)胞介素—1的上調(diào)作用而激活T細(xì)胞和B細(xì)胞。Franchini等（1990）報(bào)道顯：雞的日糧中添加VE可提高血清干擾素的水平。Gore（1997）等研究發(fā)現(xiàn)：向孵化前3天的雞胚中注射10IUVE ，雞孵化后巨噬細(xì)胞經(jīng)細(xì)胞粘多糖體外刺激后，可產(chǎn)生較多的一氧化氮，而后者如前所述是一重要的免疫調(diào)節(jié)因子，對腫瘤和細(xì)菌有較強(qiáng)的殺傷能力。Lyon等（1997）研究顯示：動(dòng)物機(jī)體在感染病毒后，巨噬細(xì)胞中的一氧化氮的合成受阻，添加VE后一氧化氮的濃度增加，其原因可能是VE增加了一氧化氮合成酶的活性或者是增加了巨噬細(xì)胞膜受體對活化刺激原的親和力。
      五 通過抗氧化對生物胞膜的保護(hù)作用
      抗氧化作用是VE的基本功能之一。研究表明：在體內(nèi)生物膜上，免疫細(xì)胞膜上的VE含量最高，并且免疫細(xì)胞膜上的磷脂分子中不飽和脂肪酸含量也高。自由基如NO-、O2- 等在體內(nèi)的產(chǎn)生不可避免，機(jī)體在疾病、應(yīng)激等異常狀態(tài)下，它的產(chǎn)生會(huì)過量，會(huì)攻擊膜上的磷脂分子中不飽和脂肪酸，后者一旦發(fā)生脂質(zhì)過氧化反應(yīng)，細(xì)胞膜的性質(zhì)、免疫細(xì)胞的結(jié)構(gòu)就會(huì)發(fā)生改變，從而影響其正常免疫機(jī)能的發(fā)揮。許多研究表明VE對免疫細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)有較強(qiáng)的保護(hù)作用。Putnam等(1987)報(bào)道：VE能抑制細(xì)胞膜內(nèi)過氧化反應(yīng)，且可能是細(xì)胞膜內(nèi)最重要的抗氧化劑。Rice等（1988）論述：VE不僅可以解毒自由基，還可以去除形成脂質(zhì)過氧化物的潛在來源。Monahan等（1994）研究得出：在Fe2+存在的情況下，飼喂a-生育酚日糧豬的肌肉微粒體在熒光各向性上明顯沒有變化，即在日糧中添加VE，用Fe2+誘導(dǎo)產(chǎn)生自由基的情況下，微粒體的膜穩(wěn)定性沒有受到影響。
      Buckley等（1995）指出：VE定位于細(xì)胞膜的脂質(zhì)雙層上，并因此提供了在脂質(zhì)過氧化反應(yīng)開始和延伸階段控制膜脂質(zhì)過氧化的手段。劉麗玲（2000）用自制的VE膠囊飼喂亞臨床VE缺乏的奶牛，結(jié)果表明：血清超氧化物歧化酶（SOD）和總抗氧化能力（A—AOC）明顯升高（P<0.01），而脂質(zhì)過氧化物產(chǎn)物丙二醛（MDA）含量顯著降低（P<0.01）。
      六 通過對內(nèi)分泌的影響
      前列腺素（PG）尤其是PGE2對免疫反應(yīng)有抑制作用，它主要抑制T細(xì)胞的功能，還能直接抑制淋巴細(xì)胞的毒性、抑制抗體和細(xì)胞因子的產(chǎn)生。前列腺素是以花生四烯酸為前體，在細(xì)胞膜上由環(huán)加氧酶、過氧化物酶等多種酶組成的酶系催化下合成的。J.N.Bird(1998)報(bào)道：VE 能通過防止花生四烯酸過氧化作用抑制PG前體的合成，從而降低脾臟和法氏囊中具有免疫抑制性的PG合成。Tengerdy等證明：日糧中添加3х10-4VE后，PGE1和PGE2都有下降。Lawence等報(bào)道：被大腸桿菌感染的雛雞添加VE后，這些雛雞滑液囊內(nèi)PGE1和PGE2濃度降低。Bryant等（1980）、Likoff等（1981）、Nochels(1988)、Aziz等（1996）都得出了相同結(jié)論。Meydani(1995)報(bào)道：PGE2的增加主要原因是環(huán)加氧酶活性的增加，VE可以通過抑制環(huán)加氧酶的活性來減少PGE2的生成量。又有報(bào)道：PG合成部位在細(xì)胞膜上，而合成酶系在微粒體中，VE可能通過影響微粒體亞細(xì)胞膜的完整性來影響合成PG的酶系向細(xì)胞質(zhì)中釋放PG，從而影響PG合成。
      皮質(zhì)醇也是一種免疫抑制劑。皮質(zhì)醇在體內(nèi)是由膽固醇經(jīng)過一系列反應(yīng)轉(zhuǎn)變而成的，據(jù)認(rèn)為細(xì)胞內(nèi)環(huán)磷酸腺苷（CAMP）含量增高可加速膽固醇轉(zhuǎn)化為孕烯醇酮，這是皮質(zhì)醇合成中的一個(gè)限速步驟，而高劑量的VE可通過減少PG生成來降低細(xì)胞內(nèi)腺苷酸環(huán)化酶的活性，使淋巴細(xì)胞內(nèi)CAMP濃度下降，進(jìn)而使皮質(zhì)醇的生成減少。甲狀腺素也是一種對機(jī)體免疫功能有重要促進(jìn)調(diào)節(jié)作用的物質(zhì)。李小林等（1996）在研究不同VE水平的基礎(chǔ)日糧對肉雞應(yīng)激前后免疫及內(nèi)分泌影響時(shí)發(fā)現(xiàn)：在30日齡時(shí)，最高劑量VE組T3濃度達(dá)到3.63±1.08ng/ml，顯著高于對照組和其它實(shí)驗(yàn)組，兩個(gè)中劑量組T3也顯著高于對照組；人工應(yīng)激后第20天得出類似的結(jié)論。文杰（1995）提出VE提高了雞的免疫力和增強(qiáng)了雞的抗病力是因?yàn)閂E緩解了由腎上腺素引起的免疫抑制。
      七 對特異性細(xì)胞免疫的影響（T細(xì)胞介導(dǎo)）
細(xì)胞免疫是指由免疫細(xì)胞在體內(nèi)發(fā)揮效應(yīng)以清除異物的免疫應(yīng)答，是由多個(gè)細(xì)胞系共同完成的。廣義上包括吞噬細(xì)胞的吞噬作用和K細(xì)胞、NK細(xì)胞的細(xì)胞毒作用，以及T淋巴細(xì)胞介導(dǎo)的特異性細(xì)胞免疫，狹義的細(xì)胞免疫指后者。T淋巴細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞免疫由兩類不同的T細(xì)胞參與，一種是遲發(fā)型超敏細(xì)胞（TDH, CD4+），與抗原反應(yīng)后分泌細(xì)胞因子，后者再吸引、活化其它免疫細(xì)胞；另一種是細(xì)胞毒性T細(xì)胞（TC ，CD8+），對靶細(xì)胞有特異殺傷作用。本小節(jié)僅介紹VE對狹義細(xì)胞免疫的作用。Chang等（1990）證實(shí)：補(bǔ)飼VE的雞，其胸腺淋巴細(xì)胞CD8+比例增加。Kramer等（1991）報(bào)道：補(bǔ)充VE促進(jìn)了不同動(dòng)物T細(xì)胞增殖。Kcwdley等（1992）研究顯示：VE缺乏使T細(xì)胞的活化、分化和繁殖力下降，導(dǎo)致細(xì)胞免疫效應(yīng)降低。文杰等（1996）實(shí)驗(yàn)表明：日糧中高水平的VE（80mg/kg）可以提高28 日齡肉雞血液淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率。Erf(1996)研究報(bào)道：飼糧中添加5萬IU/T，10萬IU/TvE后，7周齡時(shí)其胸腺及脾臟中CD4+比例增加，并且提高了血液中的CD4+ ：CD8+的比例。Wuryastuti等、Meydanl（1997）、Tanka等（1979）等等都得到相似結(jié)果。
      八 對特異性體液免疫的影響（B細(xì)胞介導(dǎo)）
      特異性體液免疫是B細(xì)胞介導(dǎo)，由抗原呈遞細(xì)胞、免疫調(diào)節(jié)細(xì)胞和效應(yīng)細(xì)胞組成的多細(xì)胞系完成的免疫應(yīng)答過程。其本質(zhì)是抗原抗體反應(yīng)，抗體是一類免疫球蛋白，抗體的存在、充分與否以及抗體的效價(jià)將直接影響到特異性體液免疫功能。Refftt用副流感-3病毒再次接種飼喂加VE、硒或兩者均加的混合物日糧的羔羊，加VE組的抗體生成量明顯高于其它組。Hayek等（1989）觀察到產(chǎn)前給母豬注射VE和硒都能提高初乳的IgM含量。文杰等（1996）報(bào)道：日糧中添加80mg/kgVE較添加20mg/kg VE能明顯提高肉用仔雞血清新城疫抗體效價(jià)。Reddy等（1987）對剛出生犢母牛補(bǔ)加VE（125IU），明顯增強(qiáng)了犢牛對庖疹病毒-1的再次抗體反應(yīng)。Hemingwai（1991）對犢牛補(bǔ)加VE后，其血清IgG濃度比未添加組有升高的趨勢。Plyashchenko等(1985)研究表明：在低VE母豬日糧中添加VE可改善仔豬的體液免疫反應(yīng)。Hidiroglou(1992,1995)研究顯示：牛補(bǔ)飼VE后，血清IgG、IgM都高于對照組。Heinzerling（1974）、Ellis等(1976) 、Reddy等（1986）、Broke等(1989)、Mazija等（1992）Nockels（1993）等等都得到了類似的結(jié)論。
      九 對非特異性細(xì)胞免疫的影響（吞噬細(xì)胞）
      Heinzerling等（1974）研究發(fā)現(xiàn)：日糧中添加300mg/kgVE，可使吞噬細(xì)胞的活動(dòng)機(jī)能提高5~6倍。
      Tengerdy(1977)報(bào)道：飼料中含300mg/kgVE的雞，其單核巨噬細(xì)胞對大腸桿菌的清除率增加。Cyang等（1984）和Hogan(1990)指出：反芻動(dòng)物缺乏VE和硒可使其多行核噬中性白細(xì)胞活性受抑，日糧添加VE可增強(qiáng)牛噬中性白細(xì)胞殺傷金黃色葡萄菌和大腸桿菌的能力。Hogan等（1992）在日糧硒濃度較高的條件下研究發(fā)現(xiàn)：產(chǎn)前注射VE（3000IU）組奶牛噬中性白細(xì)胞殺菌能力明顯高于未添加的對照組，而日糧添加沒有這樣的效果。Weiss等（1992）指出奶牛分娩時(shí)，噬中性白細(xì)胞中的VE含量與其殺菌能力呈直線正相關(guān)。孫文兵等（1997）研究得出：VE對老化肝臟KC（一種吞噬細(xì)胞）磷脂功能有明顯的調(diào)理作用。Gore等（1997）研究顯示：向孵化前3天的雞胚中注射10IU的VE，孵化后7天注射綿羊紅細(xì)胞，巨噬細(xì)胞的百分比和其吞噬綿羊紅細(xì)胞數(shù)都有增加。Politis等（1995）、Ndiweni（1995）等都得到了類似結(jié)論。后補(bǔ)充VE，提高了后代雞的被動(dòng)免疫功能.。
      十 通過分裂素的途徑
       分裂素是一類能促進(jìn)T細(xì)胞活化成致敏T細(xì)胞或效應(yīng)T細(xì)胞，并產(chǎn)生細(xì)胞免疫應(yīng)答的生物活性物質(zhì)。研究表明：植物凝結(jié)素(PHA)、刀豆素A(ConA)和白細(xì)胞介素-2（IL-2）等都能誘導(dǎo)分裂素的產(chǎn)生。有報(bào)道顯示：在缺乏VE時(shí)，PHA、ConA和IL-2誘導(dǎo)的分裂素降低，也就是說缺乏VE使T細(xì)胞的活化、分化和增殖下降，導(dǎo)致細(xì)胞免疫效應(yīng)下降。Corwin和Schloes(1980)論述：在鼠科淋巴細(xì)胞中VE直接作為分裂素，通過誘導(dǎo)其它分裂素如脂多糖(LPS), ConA和PHA增加淋巴細(xì)胞增殖。Rddy等(1987)對剛出生的母犢補(bǔ)加不同較高水平的VE，均明顯增強(qiáng)了PHA、ConA、及脂多糖等刺激引起淋巴細(xì)胞的增殖反應(yīng)(P<0.05) 。Sheffy等(1979)報(bào)道：缺乏VE削弱了動(dòng)物免疫系統(tǒng)抗感染的反應(yīng)，嚴(yán)重降低了淋巴細(xì)胞對促細(xì)胞分裂劑的反應(yīng)性，反之，添加一定量的VE可提高此反應(yīng)性。Langweiler等（1981）、Spallholz等（1973）、Larsen等（1981）則報(bào)道：VE提高了淋巴細(xì)胞對有絲分裂抗原和抗體滴度的增生性應(yīng)答。Peplowski等（1981）也發(fā)現(xiàn)：VE能增加凝集素的效價(jià)。
      結(jié)語
      VE在體內(nèi)免疫的作用形式還有許多其它提法，如非特異性非細(xì)胞免疫途徑、基因系統(tǒng)、酶系統(tǒng)等，我想這些都是各研究者從不同側(cè)面、不同層次考察的結(jié)果，VE在體內(nèi)免疫途徑及其機(jī)制從根本上說還不清楚，各種途徑、機(jī)制在許多方面是相互聯(lián)系、相互交叉的（如本文），但這些或多或少能給我們點(diǎn)滴提示