在養(yǎng)豬生產(chǎn)中,由于疾病的復(fù)雜和混合感染的普遍,經(jīng)常運(yùn)用實(shí)驗(yàn)室診斷試驗(yàn)評(píng)估豬群的健康狀況,監(jiān)測(cè)豬群對(duì)免疫接種的血清學(xué)反應(yīng),監(jiān)測(cè)疾病控制與凈化程序的進(jìn)展和成效。實(shí)驗(yàn)室的診斷試驗(yàn)結(jié)果在養(yǎng)豬生產(chǎn)中具有很重要的指導(dǎo)意義,但很多因素會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)室診斷試驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生不同程度的影響,有時(shí)甚至產(chǎn)生與生產(chǎn)實(shí)際情況差距很大的情況,如不能正確運(yùn)用實(shí)驗(yàn)室診斷結(jié)果指導(dǎo)生產(chǎn),將在養(yǎng)豬生產(chǎn)中造成損失,有時(shí)甚至是不可挽回和影響深遠(yuǎn)的。 造成診斷試驗(yàn)結(jié)果差異來自于實(shí)驗(yàn)(試驗(yàn))和樣本兩個(gè)方面。 1.1 實(shí)驗(yàn)(試驗(yàn))的差異 1.1.1
所有實(shí)驗(yàn)室的建立都是根據(jù)當(dāng)時(shí)的歷史條件及應(yīng)用需要來建立的,實(shí)驗(yàn)室之間的試驗(yàn)條件并不是完全標(biāo)準(zhǔn)化,在不同的試驗(yàn)條件下,針對(duì)同一樣本的檢測(cè)結(jié)果很可能存在著差異。 由于不同技術(shù)人員之間存在著專業(yè)水平和操作技術(shù)的差異,或同一技術(shù)人員在不同時(shí)間對(duì)試驗(yàn)結(jié)果的解釋差異,甚至在試驗(yàn)中發(fā)生樣本混淆、記錄錯(cuò)誤和樣本交叉污染等情況都有可能造成結(jié)果的差異。 在實(shí)驗(yàn)室診斷試驗(yàn)中,很多疾病的檢測(cè)都是使用工業(yè)化生產(chǎn)的試劑盒,不同生產(chǎn)廠家所生產(chǎn)的試劑盒,由于在進(jìn)行敏感性和特異性試驗(yàn)時(shí)所確定的臨界值不是完全相同,故不同廠家生產(chǎn)的試劑盒所檢測(cè)的結(jié)果也可能有差異。 由于感染豬和非感染豬的試驗(yàn)結(jié)果會(huì)有部分重疊,因此臨界值的確定會(huì)影響檢測(cè)結(jié)果。當(dāng)降低臨界值會(huì)提高敏感性,其代價(jià)是降低了特異性,檢測(cè)結(jié)果中假陽(yáng)性真陰性的豬只比例會(huì)增加,反之亦然。 作為SPF豬場(chǎng)因?yàn)樾枰3諷PF豬場(chǎng)的狀態(tài),那么高敏感性的試驗(yàn)是十分必要的。但若是陽(yáng)性場(chǎng)為了凈化某一特定病原而采用了高敏感性試劑盒,被淘汰豬只中假陽(yáng)性真陰性的比例會(huì)增高,付出的代價(jià)就會(huì)較大。 感染豬的血清學(xué)反應(yīng)情況取決于感染劑量,感染豬的臨床情況,持續(xù)時(shí)間及其它并發(fā)感染等。 一般來說,采樣進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)時(shí),都是采取發(fā)生嚴(yán)重臨床癥狀的豬只,值得注意的是,抗體水平最高時(shí),并不一定是感染劑量最高的時(shí)候,所以應(yīng)科學(xué)地確定采樣的個(gè)體,采樣個(gè)體應(yīng)該具有典型的臨床癥狀。 大部分豬場(chǎng)采血時(shí)都是采耳靜脈的血,這種方法的優(yōu)點(diǎn)是簡(jiǎn)單易行,技術(shù)要求不高,缺點(diǎn)是易污染,時(shí)間長(zhǎng),血量少,為了減少因采血的污染造成檢測(cè)結(jié)果的差異,建議使用真空采血管或一次性注射器進(jìn)行前腔靜脈采血。 采組織樣時(shí),一定要根據(jù)準(zhǔn)備檢測(cè)病原的要求采樣,部位要準(zhǔn)確,而且要盡量做到無菌采樣,否則也會(huì)造成結(jié)果差異。 不同的樣本很容易在制作時(shí)造成交叉污染,這樣也會(huì)造成結(jié)果差異,應(yīng)使用一次性器具或經(jīng)嚴(yán)格消毒的器具。 應(yīng)根據(jù)樣本的防腐保存的具體要求分別使用甲醛、酒精、凍干或冷藏等方法進(jìn)行保存,運(yùn)輸時(shí)應(yīng)根據(jù)路途長(zhǎng)短而確定包裝方法、冰塊的多少,防止樣本變質(zhì)。 3 綜合評(píng)估實(shí)驗(yàn)室診斷試驗(yàn)結(jié)果 在養(yǎng)豬生產(chǎn)中,幾乎所有的傳染病都是由多種病因引起的,這也是豬場(chǎng)暴發(fā)傳染病時(shí)比較難以控制,引起高死亡率的原因。在進(jìn)行檢測(cè)時(shí)可能會(huì)發(fā)現(xiàn)很多感染病原體同時(shí)存在,其實(shí)環(huán)境和管理因素在顯露疾病的臨床表現(xiàn)及確定疾病對(duì)生產(chǎn)性能的影響方面起到核心作用,因此在送檢樣本時(shí),應(yīng)明確試驗(yàn)的目的是為了證實(shí)或排除某種潛在的致病性病原,還是確定病原體在疾病過程中的作用。 在獲得檢測(cè)結(jié)果之后,應(yīng)根據(jù)豬只臨床狀況和有關(guān)的傳染病原和其它因素在疾病發(fā)生中所處的相對(duì)重要性來綜合分析實(shí)驗(yàn)室的結(jié)果。 由于獲得的檢測(cè)結(jié)果有可能會(huì)受到以上那么多因素的影響,為了取得對(duì)豬場(chǎng)有實(shí)際指導(dǎo)意義的檢測(cè)結(jié)果,提出幾點(diǎn)建議: 4.1 選擇具有良好內(nèi)、外部質(zhì)量控制程序并具有豐富的做相關(guān)病原或試驗(yàn)工作的實(shí)驗(yàn)室,可一份樣本送多個(gè)實(shí)驗(yàn)室,再在某一實(shí)驗(yàn)室做重復(fù)性試驗(yàn),以期獲得較為準(zhǔn)確的結(jié)果。 4.2 采樣之前與有關(guān)專家確定合適的樣本來源、數(shù)量、類型及正確的送檢方法。 4.4 獲得檢測(cè)結(jié)果時(shí)應(yīng)考慮陽(yáng)性試驗(yàn)結(jié)果和陰性試驗(yàn)結(jié)果的預(yù)測(cè)值 |