蛋白指標(biāo)檢測(cè)遇到的幾個(gè)問(wèn)題!(急盼回復(fù),43樓又有新問(wèn)題)

徐徐0

最近用凱氏定氮法測(cè)定飼料粗蛋白,每次出的結(jié)果都與實(shí)際的數(shù)字相差好大
我找了一下原因,個(gè)人認(rèn)為可能產(chǎn)生結(jié)果誤差的在這幾方面:
指示劑:按國(guó)標(biāo)的方法配制了一份(溴鉀酚綠與甲基紅3:1體積混合),按照學(xué)校培訓(xùn)教材上面的也配制了一份(0.1%的甲基紅乙醇溶液與0.5%溴鉀酚綠乙醇溶液等體積混合)后面附上標(biāo)定標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度時(shí)加入指示劑的顏色
0.05mol/LHCL標(biāo)準(zhǔn)溶液:4.5mlHCL溶于1000ml水中
還有就是標(biāo)定濃度時(shí)需要用的基準(zhǔn)物:無(wú)水碳酸鈉(我用的是分析純級(jí)的)
在凱氏燒瓶中加入試樣的時(shí)候,部分試樣沾附在瓶壁,殘留于紙上!

我大概的查了能出錯(cuò)的幾個(gè)地方,指示劑做了2種,雖然顯示的顏色不一樣,但標(biāo)定的結(jié)果,得到的數(shù)字是一樣的!
標(biāo)準(zhǔn)溶液也重新做了一份,但最終檢測(cè)的結(jié)果,得出的蛋白數(shù)字跟實(shí)際還是相差太大!(測(cè)了幾個(gè)樣,棉粕只得到32個(gè)蛋白,實(shí)際是40左右;菜粕得到32左右,實(shí)際在36左右)

最近剛接觸檢測(cè)這事,碰上的問(wèn)題還不懂怎么解決,不知道我的描述是否清楚,只盼望搞同行的能幫忙疏通一下思路!
小弟我在此先謝過(guò)各位啦!

牛郎阿飛

樓主很會(huì)思考，繼續(xù)努力

徐徐0

多謝沙發(fā)的支持,頂上去,繼續(xù)尋求幫助!

五豐

標(biāo)定濃度時(shí)需要用的基準(zhǔn)物:無(wú)水碳酸鈉（注意：必須得優(yōu)級(jí)純或基準(zhǔn)級(jí)?。┳鰳?biāo)定用的無(wú)水碳酸鈉一定要在270~300°C的電熱箱里烘干至恒重，再有：一定要做3個(gè)以上的平行試樣，而且注意在電爐上加熱時(shí)的次數(shù)（一般是兩到三次，必須得把二氧化碳趕跑干凈！）計(jì)算結(jié)果的時(shí)候一定要看看幾份結(jié)果的相對(duì)平均偏差是不是在0.1%范圍內(nèi)，如果不是就得重做。

徐徐0

首先非常感謝五豐的回答,但我又有了幾個(gè)問(wèn)題
如果是從市場(chǎng)上剛買(mǎi)回來(lái)的那種無(wú)水碳酸鈉,還需要烘干這步驟么?
還有就是,我用的是蒸餾水,電爐加熱的次數(shù)是否沒(méi)必要那么多次啦?

469013250

無(wú)水碳酸鈉需要烘干的。

五豐

無(wú)論是什么時(shí)候買(mǎi)的無(wú)水碳酸鈉都必須經(jīng)過(guò)烘干這一步驟；實(shí)驗(yàn)用水一般都是指蒸餾水，電爐加熱的次數(shù)則要依據(jù)你滴定時(shí)溶液恰好由綠色變?yōu)榘底仙俜诺诫姞t上加熱煮沸兩分鐘，這時(shí)溶液不變色（不變回原來(lái)的綠色）才可以。

五豐

說(shuō)明一下，我一般都要進(jìn)行兩次加熱。一次加熱和三次加熱的現(xiàn)象也有過(guò)，但是不多，4次以上的就沒(méi)有出現(xiàn)過(guò)。

五豐

化學(xué)純、分析純與基準(zhǔn)試劑、優(yōu)級(jí)純差別很大的。所以你標(biāo)定溶液濃度一定要用基準(zhǔn)試劑或優(yōu)級(jí)純。

徐徐0

非常感謝五豐的作答,又學(xué)到了不少!
暗紫跟暗紅,哪個(gè)更準(zhǔn)確些?
最主要的問(wèn)題,實(shí)驗(yàn)結(jié)果跟實(shí)際偏差太大,會(huì)是在哪些地方出差錯(cuò)呢?
按說(shuō),AR的無(wú)水碳酸鈉和PT的只在標(biāo)定HCL濃度時(shí)用到,就"C"這一個(gè)數(shù)據(jù)而已(我用AR級(jí)的標(biāo)定0.05mol/l的HCL3份平行樣結(jié)果在0.05683左右,這個(gè)值是否偏高?),不可能影響到那么多的蛋白數(shù)字吧!(有時(shí)候相差10多個(gè)蛋白的)