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材料:癥狀典型動(dòng)物的淋巴結(jié),肺,脾,肝臟等病原含量較多的組織。
藥品:分析純甲醛、青鏈霉素、0.9%生理鹽水。
器皿:小型組織搗碎機(jī)一臺(tái)、手術(shù)刀、量筒、盆、漏斗、2000毫升量杯、手術(shù)剪、解剖刀、5升的窄口瓶,紗布。
制作過(guò)程:
1、采集病料。無(wú)菌采集癥狀典型的病豬的淋巴結(jié),肺,脾肝臟等組織。
2、分離細(xì)菌:挑取病變比較明顯的部位分離細(xì)菌,細(xì)菌的分離按照常規(guī)的細(xì)菌分離方法分離。
3、搗碎病料:把采集或者送檢的病料近可能的剪碎,越碎越好。按照重量比加入滅菌的生理鹽水(1:3)在組織搗碎機(jī)里面搗碎組織。
4、過(guò)濾:將上步制成的物分三次過(guò)濾,第一次用一層沙布過(guò)濾,第二次用 兩層沙布過(guò)濾,第三次用四層沙布過(guò)濾。(第一次的濾渣丟棄,濾液待用),之后用加入濾液總體積的0.8%的甲醛。放入37℃溫箱放置2-3d,期間每鎘三小時(shí)搖晃一次。
5、細(xì)菌的擴(kuò)大培養(yǎng):根據(jù)實(shí)際情況,挑選分離的細(xì)菌擴(kuò)大培養(yǎng)。當(dāng)渾濁度足夠時(shí)加入總體積的0.8%的甲醛滅活,滅活2-3天。
6、活菌檢測(cè):為了檢測(cè)培養(yǎng)物是否滅活徹底,吸取50微升到相應(yīng)的平板上,37℃溫箱放置1天,觀測(cè)是否有細(xì)菌生長(zhǎng)。
7、分裝自家苗:把細(xì)菌培養(yǎng)物與組織濾液混合,在加入一定量的滅菌生理鹽水,配制到一定濁度,分裝。
8、自家苗的安全檢測(cè):抽取0.5ML,1ML自家苗,腹腔注射昆明小白鼠,觀測(cè)2d.在觀測(cè)期間小鼠沒有任何不適的癥狀出現(xiàn),說(shuō)明,制作的疫苗可以安全下線。
使用方法:
1、先用自家苗注射一兩窩小豬,觀察兩天,看有沒發(fā)生過(guò)敏、或注部位發(fā)生炎。如果沒有上述反應(yīng)說(shuō)明自家苗制作成功。
2、使用量:母豬產(chǎn)前4 周注射4毫升/頭;乳豬:7-9日齡肌注1ML,15-18日齡注射2毫升; 小豬(30-35日齡):3毫升/頭。 |
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