硼氫化物還原光度法測(cè)定預(yù)混料中總砷方法的改進(jìn)

麥海因

羅
楊(貴州省獸藥飼料監(jiān)察所)



硼氫化物還原光度法測(cè)定預(yù)混料中總砷含量，是通過將樣品經(jīng)酸消解或干灰化破壞有機(jī)物，使砷呈離子狀態(tài)存在，在酒石酸環(huán)境中，硼氫化鉀將砷離子還原成氫化砷(AsH3)氣體，在密閉裝置中，被Ag-DDTC三氯甲烷溶液吸收，形成黃色至棕紅色銀溶膠，其顏色深淺與砷含量成正比，用分光光度計(jì)比色測(cè)定。
該方法的關(guān)鍵在于發(fā)生氫化物時(shí)溶液的酸度，加入酒石酸溶液前，pH值在4~5時(shí)，測(cè)得值與實(shí)際值相吻合。
GB/T13079-1999方法中的酸度控制是采用在試樣溶液中加入2滴甲基橙指示劑，用氨水(1：1)調(diào)pH值至橙黃色，再滴加鹽酸溶液，至剛好變紅色。但由于試樣溶液本身有顏色：用干灰化法處理的樣品多呈紅色，用鹽酸溶樣法處理的樣品有的呈綠色，有的呈紅色，致使調(diào)節(jié)pH值時(shí)很難觀察到指示劑顏色的突變?，F(xiàn)在我們不用甲基橙指示劑，改用精密pH試紙，簡(jiǎn)化了操作，易于觀察，且結(jié)果重現(xiàn)性。穩(wěn)定性。準(zhǔn)確性均較好。
1
儀器設(shè)備及試劑
砷化氫發(fā)生及吸收裝置
UV330紫外分光光度計(jì)   高溫爐    電爐  分析天平
精密pH試紙  氨水溶液   酒石酸溶液   硼氫化鉀片   鹽酸溶液   抗壞血酸   砷標(biāo)準(zhǔn)溶液   二乙氨基二硫代甲酸銀(Ag-DDTC)-三乙胺-三氯早烷吸收溶液   乙酸鉛棉花
注：以上試劑勻按GB/T13079-1999方法配制
2 樣品來源

2002年貴州省獸藥監(jiān)察所定檢產(chǎn)品123批。
3.測(cè)定方法
3.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制
準(zhǔn)確吸取砷標(biāo)準(zhǔn)溶液(10ug/ml)0.00ml，0.50ml，1.00ml，1.80ml，5.00ml，10.00ml置發(fā)生瓶中，加水至44ml， 加入6.0ml酒石酸溶液。
準(zhǔn)確吸取5.00ml吸收液于吸收瓶中，連接好發(fā)生吸收裝置，于發(fā)生器中迅速加入硼氫化鉀1片，立即蓋緊蓋子，反應(yīng)時(shí)輕輕搖動(dòng)發(fā)生器2~3次，待反應(yīng)完畢后再加入第2片。待反應(yīng)結(jié)束后，以原吸收液為參比，在520nm處測(cè)定其吸收度。測(cè)定結(jié)果見表1。
表1
520nm處不同濃度下的吸收度

序號(hào)	濃度(ug/ml)	吸收度
1	0.0000	0.0037
2	5.0000	0.1389
3	10.0000	0.2652
4	18.0000	0.4828
5	50.0000	1.3060
6	100.0000	2.7868

根據(jù)表1數(shù)據(jù)計(jì)算，得線性回歸方程A=0.02769C-0.01405，r=0.9994，n=6。可見，濃度在0.0ug/ml~100.0ug/ml之間，在520nm波長(zhǎng)處，溶液的吸收度與濃度的關(guān)系符合郎伯-比爾定律。
3.2
樣品的測(cè)定
稱取樣品約1g，精密稱定，置30ml瓷坩鍋中，低溫碳化完全后轉(zhuǎn)入高溫爐中，于550C恒溫灰化3小時(shí)，取出冷卻，慢慢加入10ml鹽酸溶液，待激烈反應(yīng)后煮沸并轉(zhuǎn)移至砷化氫發(fā)生器中，加水至30ml左右，加入1g抗壞血酸溶解后，用氨水溶液調(diào)pH值為4~5，加入6.0ml酒石酸溶液，用水稀釋至50ml。
準(zhǔn)確吸取5.00ml吸收液于吸收瓶中，連接好發(fā)生吸收裝置，于發(fā)生器中迅速加入硼氫化鉀1片，立即蓋緊蓋子，反應(yīng)時(shí)輕輕搖動(dòng)發(fā)生器2~3次，待反應(yīng)完畢后再加入第2片。待反應(yīng)結(jié)束后，以原吸收液為參比，在520nm處測(cè)定其吸收度。用此方法檢驗(yàn)預(yù)混劑123批，檢驗(yàn)結(jié)果見表2。
表2
520nm處測(cè)定其吸收度

≤10mg/kg	10~50mg/kg	50mg/kg以上
110批	12批	1批

4 回收率試驗(yàn)
在已經(jīng)準(zhǔn)確測(cè)定了濃度的樣品溶液中，加入一定量的砷標(biāo)準(zhǔn)溶液，依法測(cè)定，結(jié)果見表3。
表3
回收率實(shí)驗(yàn)結(jié)果

序號(hào)	加入量 (ug/ml)	測(cè)得量(ug/ml)	回收率	平均回收率	RSD
1	5	5.1	102%	98%	2.7%
2	10	9.7	97%
3	15	14.7	98%
4	20	19.1	96%

5 穩(wěn)定性試驗(yàn)：
上述樣品每間隔30分鐘測(cè)定1次，測(cè)定結(jié)果無明顯變化，穩(wěn)定性較好。
6
修改后方法與原方法測(cè)定結(jié)果比較
表4 兩種方法實(shí)驗(yàn)結(jié)果比較

樣品編號(hào)	原方法測(cè)定結(jié)果	本方法測(cè)定結(jié)果
1	2.2 mg/kg	2.3 mg/kg
2	0.5 mg/kg	0.5 mg/kg
3	1.4 mg/kg	1.3 mg/kg
4	1.1 mg/kg	1.1 mg/kg

7 結(jié)論
修改后方法與原方法測(cè)定結(jié)果無顯著差異，修改后的方法更為簡(jiǎn)便快捷，易于操作，且結(jié)果準(zhǔn)確，穩(wěn)定性、重現(xiàn)性均較好。

訾川益

收藏了，按照樓主的方法試試。