真蛋白的測定

ljs3611 · 發(fā)表于 2009-7-22 09:11:47

方法一，鹽析法
①試劑
1．硫酸銅溶液：10%，稱取50.00g硫酸銅加水溶解，并稀釋至500ml
2．氫氧化鈉溶液：2.5%，稱取12.50g氫氧化鈉，加水溶解，并稀釋至500ml
3．鹽酸標準溶液：0.05mol/L
②真蛋白測定
精確稱取樣品1g左右，置于250ml燒杯中，加50ml蒸餾水，于電爐上加熱煮沸，加入20ml10%硫酸銅溶液，再在攪拌下緩緩加入20ml2.5%氫氧化鈉溶液，搖勻。從電爐取下，室溫放置2小時。沉淀物用中速定性濾紙傾瀉法過濾。并用少量70℃以上熱水多次洗滌燒杯和沉淀物，直至濾液無so2+4離子（用5%BaCl2溶液檢驗無沉淀），連沉淀物一起放入80℃干燥箱中烘至略潮，和入凱氏定氮燒瓶中，消化，測定其中的蛋白質含量（同粗蛋白的測定），同時進行空白測定。另取樣品0.5g進行粗蛋白的測定。
方法二：測非蛋白氮（NP）法
①NP的測定
稱取15g左右樣品（精確到0.1mg）,準確加入100ml5% 三氯乙酸溶液，浸泡振蕩2h ,靜置過濾，精確量取10－20ml濾液定氮（消化時可加2－3滴正辛醇作消泡劑），同時做空白實驗。
②NP的計算
同粗蛋白質（CP）的計算
③真蛋白質（TP）的計算
TP%＝CP%－NP%
真蛋白質的比率＝TP%/CP%*100%
一般來講，真蛋白質的比率應符合下列數(shù)值：
進口魚粉應≥80%，國產(chǎn)魚粉≥75%。