偽狂犬病理研究進展

牛莫王 · 發(fā)表于 2010-3-4 09:44:25

偽狂犬?。?/font>Pseudorabies, PR）或稱奧耶斯基病（Aujeszky’s disease, AD），是由皰疹病毒科、α皰疹病毒亞科中的偽狂犬病毒（PRV或ADV）所致的一種急性傳染病[1,18]。PRV可引起多種家畜、實驗動物和野生動物發(fā)病，已證實有35種動物可被感染，包括豬、牛、綿羊、兔、狗、水貂、雪貂、狐貍、貓和大鼠等[1－4，18]。除豬以外的其它動物感染PRV后，臨床上以發(fā)熱、奇癢和急性腦脊髓炎為特征，且具有高度致死性[2，18]。豬是PRV的主要宿主，成年豬一般為隱性感染，但終身帶毒和排毒，成為本病的主要傳染源，在本病的傳播過程中具有重要意義[1，2]。

1
豬偽狂犬病的流行現(xiàn)狀

目前本病在世界范圍內(nèi)普遍發(fā)生，已有44個國家和地區(qū)報道發(fā)生PR[7,67]。隨著規(guī)?；?a href="http://m.ffers.com.cn/pigs/" target="_blank" class="relatedlink">養(yǎng)豬的不斷發(fā)展和強毒株的出現(xiàn)，PR的發(fā)生和流行日趨嚴重，現(xiàn)在已成為對全球養(yǎng)豬業(yè)危害最大的傳染病之一，每年給養(yǎng)豬業(yè)造成了巨大的經(jīng)濟損失[4]。

在我國，劉永純（1947）首次報道了貓偽狂犬病的自然病例[7]。其后陸續(xù)報道了豬、牛、羊、犬、鹿、水貂等多種動物的偽狂犬病[17]。迄今已有21個省市報道發(fā)生了豬偽狂犬病[5，6，8，9－16]，并已先后分離到多株PRV毒株，已報道分離到的毒株有閩A、陜A、京A、AKW、SR、YN、DQ－8401、S、Y株等[21－24]。1996年，陳煥春等從我國某些規(guī)?；i場大批死亡的新生仔豬的腦及內(nèi)臟器官中分離并鑒定了一株PRV毒株，命名為鄂A株（EA strain of pseudorabies virus）[3，17]。。方六榮、陳煥春等（1998）[25]、盤寶進（1997）[10]、黃駿明（1996）[6]等進行了豬偽狂犬病血清流行病學調(diào)查，證明PR在我國流行相當嚴重。

2.
豬偽狂犬病的病理學研究現(xiàn)狀

2.1
病原及分子生物學

PRV與人單純皰疹病毒（HSV）、傳染性牛鼻氣管炎病毒（IBRV）、禽傳染性喉氣管炎病毒（ILTV）等均屬皰疹病毒科、α皰疹病毒亞科[1，2]。PRV由145kb的線狀雙股DNA和一封閉的核衣殼組成，核衣殼外還有2層以上蛋白質(zhì)囊膜[1]。囊膜中含有8種主要的糖蛋白，即gE、gB、gC、gI、gD、gG、gH、gL[1，17,18,]，這些糖蛋白的主要功能是：參與病毒進入細胞過程，參與細胞的融合，參與病毒吸附細胞過程以及參與病毒從細胞的釋放[27]。PRV的毒力主要與編碼gE、gC、gI和TK（胸腺嘧啶激酶）的基因有關(guān)[17，18]，其中TK對毒力的影響最大[27],因TK存在有利于病毒感染神經(jīng)元和使病毒復(fù)制[18]。糖蛋白gB、gC、gD在誘導(dǎo)機體產(chǎn)生免疫反應(yīng)中最為重要，這些糖蛋白的單克隆抗體可使小鼠和豬獲得保護性免疫[18,26,55]。

2.2
不同毒株致病性的差異

目前認為PRV只有一個血清型，但是各分離株在毒力和所致病理變化方面存在較大差異[1]。

2.2.1
不同毒株在毒力上的差別。20世紀60年代以前，PR分離株對豬的毒力不強[7]。Basinger（1979）在美國分離的毒株對豬的毒力很強，但是對牛和羊的感染力甚低[53]。目前區(qū)分強毒株和弱毒株的方法是采用限制性內(nèi)切酶對病毒的基因組進行酶切，經(jīng)電泳比較基因圖譜。

2.2.2
PRV不同毒株所致的病理學變化的差異。強毒株可在中樞神經(jīng)系統(tǒng)及其他臟器中增殖，因而具有很強的致病性，而一般認為，低毒力毒株具有嚴格的嗜神經(jīng)性，不在中樞神經(jīng)系統(tǒng)以外發(fā)生病理變化。這與其毒力基因的缺失及某些糖蛋白（如gⅢ）的缺失有關(guān)[60,63,64]。Pol等（1991）建立了一種體外感染豬鼻粘膜的方法，比較研究了不同毒力的PRV毒株對鼻粘膜感染在病理形態(tài)上的差異[59]。張斌等（1992）比較了3株PRV毒株引起仔豬病理變化的差異，發(fā)現(xiàn)Shope株滴鼻全部死亡，主要引起肺和小腦病變；閩A株主要引起壞死性扁桃體炎，S株主要引起肝炎和壞死性胃腸炎[28]。Parker（1997）用TK基因缺失疫苗接種后備母豬后，發(fā)生了輕度至中度的局灶性壞死性卵巢炎[58]，這說明低毒力毒株對豬仍具有一定毒力。

2.3
PR的發(fā)病學

2.3.1
感染途徑
PR自然感染主要經(jīng)由上呼吸道發(fā)生（Gloster，1982）[18]。Gillespie（1996）[45]用PRV氣溶膠感染豬，發(fā)現(xiàn)感染豬的呼吸道癥狀及其他臨床表現(xiàn)與野外病例相似。通過腦內(nèi)、鼻咽腔、口腔、氣管、肌肉、胃等途徑接種均可引發(fā)人工感染（Grandel,1982）[18]。

PRV自然感染時，病毒最初在鼻咽部上皮和扁桃體內(nèi)皮下區(qū)域復(fù)制[56,64]，在人工感染時，病毒則在原發(fā)感染位置首先復(fù)制。病毒然后經(jīng)淋巴循環(huán)或上皮下基底層的神經(jīng)末梢向CNS擴散。PRV弱毒株和中等毒株的擴散范圍只局限于CNS，但強毒株則廣泛分布于全身，并可造成短期病毒血癥。豬在感染后通過鼻、口咽部、乳汁、排泄物和分泌物等途徑向外排毒[18]，但免疫豬或康復(fù)豬感染后排毒量較未免疫豬低，排毒時間縮短[18，31]。

2.3.2
傳播途徑
本病傳播最主要的途徑是通過呼吸道傳播，在相鄰的豬場之間和一個豬場內(nèi)，PRV主要通過空氣擴散和傳播。懷孕母豬感染PRV后能發(fā)生垂直傳播。豬在自然感染后2－3周從鼻、口腔向外持續(xù)排毒。感染母豬可通過乳汁將病毒傳給仔豬。經(jīng)陰道分泌物和精液也能引起感染[18]。

2.3.3
PRV的潛伏感染
象其它皰疹病毒一樣（如雞馬立克病毒、牛傳染性鼻氣管炎病毒），PRV一旦感染就很難從機體內(nèi)完全清除，從而呈現(xiàn)一種長期潛伏的狀態(tài)[5,]。潛伏狀態(tài)時病毒持續(xù)存在于三叉神經(jīng)節(jié)和扁桃體中[40,44,62,66]。豬經(jīng)野毒感染和弱毒疫苗免疫后均可導(dǎo)致潛伏感染。Gutekunst（1979）從實驗感染7個月后的三叉神經(jīng)節(jié)和扁桃體內(nèi)用DNA－RNA雜交的方法仍能檢測到PRV的基因組[49]。Macley（1984）用皮質(zhì)類固醇活化病毒后用常規(guī)的病毒分離及檢測方法檢測神經(jīng)和淋巴組織中PRV，Brown（1990）采用原位雜交檢測PRV潛伏感染情況，但是這些方法檢測靈敏度不高[29]。PCR技術(shù)是檢測PRV潛伏感染的較好手段，用此方法在三叉神經(jīng)節(jié)和嗅球中檢出率最高（周復(fù)春等，1997）[30,66]。

2.4
臨床癥狀

PR的臨床表現(xiàn)主要取決于毒株和感染量，最主要取決于感染豬的日齡[18]。PRV對肺和神經(jīng)組織嗜性較強，因此大多數(shù)臨床癥狀與這兩個器官系統(tǒng)的功能障礙有關(guān)。神經(jīng)癥狀多見于哺乳仔豬和斷奶仔豬，呼吸癥狀多見于育成豬和成年豬。

仔豬經(jīng)人工接種后30小時左右開始出現(xiàn)臨床癥狀，表現(xiàn)打噴嚏、咳嗽和輕微發(fā)熱，6－9天昏迷死亡[18]。Narita等（1984）用強毒接種5日齡仔豬，接種后第2天開始出現(xiàn)食欲減退，發(fā)熱等癥狀，接種后第6天出現(xiàn)死亡[56]。張斌等（1992）[28]，張桂云等（1997）[32]分別用強毒接種7日齡和15日齡的仔豬，接種后出現(xiàn)癥狀和出現(xiàn)死亡的時間與Narita（1984）報道的結(jié)果相似。說明新生仔豬感染強毒后，潛伏期一般為48小時以內(nèi)，癥狀持續(xù)時間約為7天左右。

新生仔豬感染PRV后，首先表現(xiàn)發(fā)熱、咳嗽、食欲減退并可出現(xiàn)便秘。隨后豬只明顯萎糜，無力，不愿吮乳，有時可表現(xiàn)過量流涎、嘔吐。繼而表現(xiàn)神經(jīng)癥狀，出現(xiàn)神經(jīng)癥狀的時間一般在感染后4－6天[28]?？上扔^察到被毛震顫，繼而出現(xiàn)肌肉痙攣、間歇性抽搐，共濟失調(diào)，后期麻痹，臥地不起，昏迷而死。2周齡的新生仔豬的死亡率可達100％。

成年豬感染癥狀輕微，主要表現(xiàn)為繁殖障礙[1，18]。懷孕母豬感染PRV后，病毒通過胎盤屏障感染胎兒，表現(xiàn)流產(chǎn)、產(chǎn)死胎、木乃伊胎，其中以產(chǎn)死胎為主，或產(chǎn)下弱仔。妊娠期或空懷期母豬感染后，均能造成母豬不能正常受孕，或?qū)遗洳辉?，或不發(fā)情。公豬感染后可引起生殖器官退行性變化，睪丸腫脹收縮，精液品質(zhì)發(fā)生改變，甚至喪失種用能力[5]。

斷奶豬和生長肥育豬自然感染后主要出現(xiàn)呼吸道癥狀，臨床表現(xiàn)發(fā)熱、厭食、呼吸困難，偶見神經(jīng)癥狀[18]。若繼發(fā)其它呼吸系統(tǒng)疾病，如放線桿菌性胸膜肺炎，可造成嚴重損失，因PRV可抑制肺巨嗜細胞的功能，降低豬只的抵抗力（Iglesias等，1989）[51]。

2.5
病理變化

2.5.1眼觀病變
新生仔豬和哺乳仔豬在自然感染和人工感染PRV時均表現(xiàn)明顯的眼觀病變[32,33,28,15,34,13]。仔豬可見明顯的腦膜充血水腫、腦脊液明顯增多。鼻粘膜和咽部廣泛充血，肺水腫、出血和小葉性肺炎，肺表面有時可見灰白色壞死灶（張斌等，1992；曾元根等，1996）[34]。病毒最初增殖的部位可見壞死性炎病變化，Narita等（1984）對新生仔豬人工感染PRV強毒后出現(xiàn)了特征性的扁桃體壞死[56]。淋巴結(jié)輕度充血或周邊出血。肝和脾的漿膜面下有時見有散在的黃白色皰疹樣壞死灶（Kluge和Mare，1976；張斌等，1992）[18，28]。腎臟柔軟腫脹，表面小點出血[28，34]。有時鼻鏡部糜爛[34，13，34]。由于PRV對日齡較大的豬致死性較弱，故成年豬的眼觀病變輕微。Narita（1984）報道了生長豬感染PRV發(fā)生了壞死性腸炎[57]。母豬因PR流產(chǎn)可見輕微子宮內(nèi)膜炎和壞死性胎盤炎。母豬妊娠期感染PRV，感染胎兒或新生仔豬的肝、脾可見壞死灶，肺和扁桃體有出血性壞死灶。公豬可發(fā)生陰囊炎（Kluge和Mare，1976）[54]。

2.5.2病理組織學變化

PRV經(jīng)不同途徑接種豬只所引起的病變分布有所不同。皮下接種在脊髓引起較嚴重的病變，鼻內(nèi)接種時嗅球與大腦皮質(zhì)病變明顯，口內(nèi)接種在三叉神經(jīng)和腦干發(fā)生嚴重病變[36,42]。

CNS主要表現(xiàn)為非化膿性腦脊髓炎和神經(jīng)節(jié)炎（Baskerville，1972）[45,46,61]，感染區(qū)域中出現(xiàn)以單核細胞為主的血管套和神經(jīng)膠質(zhì)結(jié)節(jié)，神經(jīng)元灶性壞死，膠質(zhì)細胞局灶性或彌漫性增生。腦膜和脊髓被膜因單核細胞浸潤而增厚[18]。張斌等（1992）發(fā)現(xiàn)，外周神經(jīng)纖維腫脹變性，星狀神經(jīng)節(jié)、半月神經(jīng)節(jié)的神經(jīng)元變性壞死，并在大腦、神經(jīng)節(jié)的神經(jīng)元、肺、扁桃體和淋巴結(jié)發(fā)現(xiàn)了嗜酸性核內(nèi)包涵體[28]。Becker（1967）發(fā)現(xiàn)了壁內(nèi)神經(jīng)節(jié)細胞、星狀神經(jīng)節(jié)和腹腔叢神經(jīng)節(jié)細胞壞死及核破裂[18]

淋巴結(jié)可見特性壞死和嗜中性粒細胞浸潤、淋巴成分增生和周邊出血和壞死性血管炎。扁桃體上皮細胞腫脹變性，上皮下有淋巴細胞、單核細胞浸潤[32]。脾呈壞死性炎癥[28，32]。肝可見局灶性壞死。肺部可見以肺泡病變?yōu)橹鞯某鲅苑窝?/font>[32]，或卡他性支氣管肺炎[13]。

2.5.3超微結(jié)構(gòu)變化
PRV的發(fā)育開始于細胞核內(nèi)，當其進入細胞質(zhì)時在核膜內(nèi)裝配囊膜而形成完整的病毒粒子[2]。病毒增殖時，由于其直接的細胞毒作用而使細胞變性壞死[56]。毒力不同的毒株在細胞間的擴散速度和裝配囊膜的方式存在差異[59]。強毒株較弱毒株的擴散速度要快。