陳煥春：偽狂犬病根除計(jì)劃

jefflelele · 發(fā)表于 2010-9-15 22:19:23

　　偽狂犬病是當(dāng)今危害全球養(yǎng)豬業(yè)最嚴(yán)重的豬病, 給養(yǎng)豬業(yè)造成了巨大的經(jīng)濟(jì)損失。西方發(fā)達(dá)國家大多在90年代相繼制定和啟動(dòng)了該病的根除計(jì)劃, 并取得了很好的成效。該病在我國廣泛存在并嚴(yán)重發(fā)病, 損失巨大?！?九五”期間我們承擔(dān)了國家科技部中國生物工程開發(fā)中心生物技術(shù)攻關(guān)項(xiàng)目“ 偽狂犬病基因缺失疫研制”課題。經(jīng)過五年的辛勤勞動(dòng), 利用本室從我國華中地區(qū)發(fā)病豬病料分離鑒定篩選到抗原性和免疫原性強(qiáng)、在細(xì)胞上增殖滴度高的豬偽狂犬病毒鄂A株為親本材料, 成功研制出偽狂犬病毒gG和gE兩株單基因缺失滅活疫苗用于種豬免疫, TK/gG和TK/gE兩株雙基因缺失弱毒疫苗用于仔豬和育肥豬的免疫。相比較而言, gG和TK/gG疫苗的免疫原性和免疫效果要略高于gE和TK/gE疫苗。前者對(duì)當(dāng)前我國偽狂犬病正處在高發(fā)病率時(shí)期使用更為合適。但考慮到我國馬上要加人世貿(mào)組織(WTO), 因歐洲和美國部分地區(qū)大多使用的TK/gE基因缺失疫苗, 考慮到將來我國動(dòng)物出口便于與國際接軌, 因而我們也研制了TK/gE基因缺失疫苗, 供用戶在使用時(shí)選擇。同時(shí)我們也研制成功區(qū)分強(qiáng)弱毒感染的鑒別診斷方法:gG-ELISA（酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)）和gE-ELISA,gG-LAT(乳膠凝集試驗(yàn))和gE-LAT。經(jīng)查新和專家鑒定，以上這些產(chǎn)品在國內(nèi)都是首次研制成功。而用基因工程表達(dá)產(chǎn)物建立的gG和gE乳膠凝集鑒別診斷方法在國際上也是首次, 填補(bǔ)了國內(nèi)外空白, 該方法具有操作簡便, 便于基層和現(xiàn)場使用, 其敏感性高、特異性強(qiáng), 是最理想的鑒別診斷方法。上述基因缺失疫苗經(jīng)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)比較和臨床大面積中試應(yīng)用證明, 從產(chǎn)生抗體水平高、時(shí)間快和免疫效果等方面均優(yōu)于國內(nèi)外同類產(chǎn)品。尤其是TK/gG雙基因缺失弱毒疫苗可經(jīng)肌肉注射或滴鼻進(jìn)行仔豬的超前免疫和發(fā)病仔豬的緊急預(yù)防注射, 可在24小時(shí)內(nèi)產(chǎn)生明顯的作用, 具有藥到病除的效果。鑒于上述基因缺失疫苗和鑒別診斷方法技術(shù)與產(chǎn)品均已成熟和針對(duì)我國豬偽狂犬病近年來的實(shí)際情況, 特提出我國豬偽狂犬病的根除計(jì)劃,并希望首先能在規(guī)?；B(yǎng)豬場試行和實(shí)施。

偽狂犬病根除計(jì)劃方案

　　根據(jù)不同的豬場、不同情況和實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)情況,選擇不同的方案與措施。

　　偽狂犬病毒是屬于高度潛伏感染的病毒, 而且這種潛伏感染隨時(shí)都有可能被體內(nèi)外和環(huán)境變化的應(yīng)激因素刺激而引起疾病爆發(fā), 同時(shí)基因缺失弱毒疫苗注射帶有野毒潛伏感染的動(dòng)物時(shí), 由于活病毒之間發(fā)生基因交換和重組的可能性, 加上種豬飼養(yǎng)的時(shí)間長（3-4）年, 因此這種可能性和機(jī)率就會(huì)增大, 而且國內(nèi)外都有因注射弱毒疫苗而引起偽狂犬病爆發(fā)的例子。因此在西方發(fā)達(dá)國家如德國嚴(yán)格規(guī)定種豬只允許使用滅活疫苗。美國在其偽狂犬病的根除計(jì)劃中, 也規(guī)定種豬只允許使用滅活疫苗。根據(jù)以上這些特點(diǎn), 因此我們建議在我國種豬也只能使用基因缺失滅活疫苗。我們專門研制了針對(duì)種豬用的單基因缺失濃縮滅活疫苗。尤其是單gG基因缺失滅活疫苗對(duì)病毒的免疫原性幾乎完全沒有什么影響。因?yàn)間G是病毒的非結(jié)構(gòu)蛋白基因, gG蛋白是病毒繁殖時(shí)分泌到細(xì)胞培養(yǎng)的上清中與病毒免疫原性無關(guān)該基因缺失后, 對(duì)病毒的免疫原性沒有什么影響, 但又可以作為鑒別診斷。

　　育肥用的仔豬和架子豬可以使用雙基因缺失的弱毒疫苗。我室研制的TK/gG和TK/gE雙基因缺失弱毒疫苗都是缺失了偽狂犬病毒的主要毒力基因TK, 該基因缺失疫苗可用作于新生仔豬未吃初乳的超前免疫, 尤其是TK/gG缺失疫苗可用于發(fā)病仔豬的緊急預(yù)防接種, 具有明顯的急救和預(yù)防效果。也可用于斷奶仔豬和生長育肥豬的免疫, 可預(yù)防各種年齡豬的偽狂犬病, 具有明顯的促生長作用。由于育肥豬的生長周期短6個(gè)月左右,因此不存在病毒重組變異和返強(qiáng)的危險(xiǎn)。

　?。ㄒ唬┓N豬及種豬場的根除計(jì)劃

　　（1）在沒有使用過疫苗的豬場, 先作普遍血清學(xué)檢查, 如果發(fā)現(xiàn)血清學(xué)陽性豬, 最好是能將血清學(xué)陽性豬與血清學(xué)陰性豬分群飼養(yǎng)。然后將血清學(xué)陽性豬和血清學(xué)陰性都用基因缺失滅活濃縮疫苗注射,所有豬普遍注射一次疫苗后, 間隔4-6周再加強(qiáng)免疫一次。以后血清學(xué)陰性豬群按每半年注射一次,血清學(xué)陽性豬群每4 個(gè)月注射一次, 然后每半年進(jìn)行一次血清學(xué)鑒別檢查, 凡是注射疫苗血清學(xué)陽性的豬歸為健康群, 凡是野毒感染血清學(xué)陽性豬歸為另一群, 逐步縮小和有計(jì)劃的淘汰野毒感染豬群, 逐步達(dá)到完全健康無野毒感染的豬群。直到最后根除消滅偽狂犬病。

　?。?）對(duì)已經(jīng)注射過疫苗的豬場, 首先將疫苗完全換成濃縮單基因缺失滅活疫苗。免疫程序按每個(gè)月注射一次。每半年進(jìn)行一次血清學(xué)鑒別檢查, 逐步開始分群將基因缺失疫苗免疫血清學(xué)陽性豬視為健康群分開飼養(yǎng), 將野毒感染血清學(xué)陽性豬分為另一群分開飼養(yǎng), 逐步淘汰和縮小野毒感染豬群, 最后建立完全健康無野毒感染的豬群。

　?。? ）以上述經(jīng)過規(guī)則免疫后的種豬所生仔豬留作種用的仔豬在100日齡時(shí)作一次偽狂犬病普通血清學(xué)檢查, 凡是抗體陰性者留作種用。對(duì)檢出的抗體陽性者作進(jìn)一步的鑒別血清學(xué)檢查, 對(duì)野毒感染陰性者同樣可用作種用, 對(duì)強(qiáng)毒感染陽性者淘汰作為肥豬用, 不能作為種豬用。對(duì)偽狂犬病抗體檢測(cè)陰性豬和野毒感染陰性豬等留作種用的仔豬用偽狂犬病濃縮單基因缺失滅活疫苗在100-110日齡接種一次, 再到130-140日齡時(shí)加強(qiáng)免疫一次, 以后按種豬的免疫程序每半年注射一次濃縮基因缺失滅活疫苗。同時(shí)每半年抽血樣進(jìn)行一次鑒別血清學(xué)檢查, 如發(fā)現(xiàn)野毒感染血清學(xué)陽性豬應(yīng)及時(shí)隔離淘汰處理, 以保持豬群無野毒感染, 安全健康。

　?。?）對(duì)種用仔豬經(jīng)上述檢測(cè), 發(fā)現(xiàn)和分群隔離的野毒感染血清學(xué)陽性豬, 立即注射滅活疫苗或基因缺失疫苗, 最好是間隔4-6周注射2次, 作為育肥豬飼養(yǎng)出欄。
（5）以上是在種豬群和種豬場進(jìn)行偽狂犬病根除計(jì)劃的最佳方案。但考慮到我國養(yǎng)豬業(yè)的實(shí)際情況, 一般豬場的養(yǎng)豬數(shù)量都已達(dá)到滿負(fù)荷的程度, 豬舍和欄圈都比較緊張, 對(duì)采取隔離分群有困難時(shí), 此種情況在沒有注射過疫苗的場先進(jìn)行抗體檢測(cè), 確定有無感染存在, 或是已經(jīng)注苗的場先將疫苗更換為濃縮單基因缺失滅活疫苗, 再按前述的種豬及種豬場的免疫程序進(jìn)行免疫。即抗體陰性豬首先作兩次基礎(chǔ)免疫, 其間隔4-6周。然后每半年注射一次。如是野毒感染陽性豬群先作兩次基礎(chǔ)免疫后,再每4個(gè)月免疫一次, 直至野毒感染抗體消失后, 改為每半年一次。對(duì)已經(jīng)免疫過的豬群, 則將疫苗更換成濃縮單基因缺失疫苗就行。然后按每半年抽血檢查一次。逐步縮小野毒感染的豬。這就是要比前述的采取分群隔離的措施達(dá)到凈化根除的目的要慢一些。

　?。?）對(duì)正在爆發(fā)偽狂犬病的豬場, 種豬除進(jìn)行兩次間隔4-6周基礎(chǔ)免疫外種豬應(yīng)在配種前注射一次, 產(chǎn)前一個(gè)月加強(qiáng)免疫一次, 均使用濃縮的單基因缺失的滅活疫苗。育肥豬用基因缺失弱毒疫苗進(jìn)行兩次免疫。如仔豬發(fā)病用基因缺失疫苗緊急預(yù)防接種效果顯著。

　?。?）對(duì)新引進(jìn)的種豬, 要進(jìn)行嚴(yán)格的檢疫, 最好是要引進(jìn)偽狂犬病抗體陰性豬或野毒感染抗體陰性豬, 引到本場后, 隔離飼養(yǎng)2個(gè)月, 抽血樣檢查, 抗體或野毒感染抗體為陰性者再與本場其它豬混群飼養(yǎng)。與其它豬群一樣, 每半年作一次檢查。對(duì)于檢測(cè)出的野毒感染陽性豬要嚴(yán)格隔離, 注射疫苗后, 看情況能否作為種用, 最好是將其淘汰不作種豬用。

　?。?）豬場要進(jìn)行定期嚴(yán)格的消毒管理措施, 最好是使用2%的氫氧化鈉燒鹼溶液或酚類消毒劑。豬舍、欄圈的清洗消毒最要選擇氣候干燥和具有陽光照射下進(jìn)行, 效果最佳。

　?。?）豬場嚴(yán)格禁止養(yǎng)狗、養(yǎng)貓、養(yǎng)雞, 嚴(yán)格禁止狗、貓、雞和其它鳥類及動(dòng)物進(jìn)人豬舍。在豬場內(nèi)要進(jìn)行嚴(yán)格的滅鼠措施。消滅鼠類帶毒傳播疾病的危

　　險(xiǎn)。

　?。?0）要嚴(yán)格禁止人員和車輛等進(jìn)人豬場, 避免因人員和機(jī)械帶毒傳播疾病。

　?。?1）在公里方圓范圍內(nèi)的相關(guān)豬場都必須統(tǒng)一采取同樣措施, 因?yàn)閭慰袢】稍诜綀A公里范圍內(nèi)通過空氣傳播。

　　（二）育肥豬場偽狂犬病的根除計(jì)劃

　　上述種豬及種豬場的根除計(jì)劃措施完全適用于育肥豬場。育肥豬場種豬的偽狂犬病根除計(jì)劃措施與前上述的種豬的根除計(jì)劃措施是完全一樣的。不同的只是在育肥豬方面, 首先應(yīng)對(duì)育肥豬群在70-100日齡的豬進(jìn)行偽狂犬病血清學(xué)檢測(cè), 如發(fā)現(xiàn)有抗體陽性或野毒抗體陽性豬, 所有的豬只都應(yīng)注射疫苗。經(jīng)過規(guī)則免疫的種豬所生的仔豬, 一般在60-70日齡注射一次基因缺失弱毒疫苗, 間隔4-6周后再加強(qiáng)免疫一次。一般情況下在育肥豬場種豬育肥豬都應(yīng)進(jìn)行免疫。如只免疫種豬, 大量的育肥感染病毒, 在那里大量增殖病毒并向豬舍內(nèi)排毒, 直接威脅著種豬, 因而種豬的免疫效果受到影響。此外育肥豬感染偽狂犬病毒后, 雖不表現(xiàn)出典型的臨床癥狀和發(fā)生死亡, 但可明顯的引起呼吸道癥狀, 增重遲緩, 飼料報(bào)酬降低, 推遲出欄, 其間接經(jīng)濟(jì)損失也是巨大的。經(jīng)實(shí)驗(yàn)室的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)和臨床上的觀察證實(shí), 感染了偽狂犬病毒的育肥豬群, 注射疫苗與不注苗其增重相差約1/3。即注射疫苗豬比未注射疫苗豬在同等飼養(yǎng)條件下多增1/3, 可見育肥豬應(yīng)該進(jìn)行偽狂犬病免疫的重要性。