尼龍袋法評(píng)定單胃動(dòng)物飼料營(yíng)養(yǎng)價(jià)值研究進(jìn)展

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　　尼龍袋法評(píng)定單胃動(dòng)物飼料營(yíng)養(yǎng)價(jià)值研究進(jìn)展

　　戴 燚，曹 娟，李昌茂，劉代強(qiáng)，楊正德

　　[摘 要] 飼料營(yíng)養(yǎng)價(jià)值的準(zhǔn)確評(píng)價(jià)是研究動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)需要和進(jìn)行日糧配方的前提和基礎(chǔ)。在評(píng)定飼料營(yíng)養(yǎng)價(jià)值的方法中，尼龍袋法測(cè)定結(jié)果同體內(nèi)試驗(yàn)具有良好的可比性、重復(fù)性好、操作相對(duì)簡(jiǎn)單，便于大批樣品的研究，在評(píng)定飼料營(yíng)養(yǎng)價(jià)值方面被廣泛采用。但是，尼龍袋法由于受試驗(yàn)材料、操作程序、試驗(yàn)動(dòng)物內(nèi)環(huán)境等諸多因素的影響而造成測(cè)定結(jié)果的許多不確定性。本文綜述尼龍袋技術(shù)評(píng)定單胃動(dòng)物飼料營(yíng)養(yǎng)價(jià)值及影響測(cè)定結(jié)果的因素方面的研究進(jìn)展。
　　[關(guān)鍵詞] 尼龍袋技術(shù);營(yíng)養(yǎng)價(jià)值;飼料
　　Nylon Bag Technique evaluates monogastric animal feed nutritional value research progress
　　DAI Yi1，CAO Juan1，LI Changmao1,LIU Daiqiang1,YANG Zhengde2
　　(1.Animal Sciences College，Guizhou University，Guiyang 550025，P.R.China;2.Corresponding author， Institute of Animal Nutrition and Feed， Guizhou University，Guiyang 550025，P.R.China)
　　Abstract: The feed nutritional value accurate appraisal is studies the animal nutrition to need with to carry on daily grain formula the premiseand the foundation. In evaluates the feed nutritional value in the method, Nylon Bag Technique determination result has the good commeasurability, the duplication with in vivo experiment good, the operation is relatively simple, is advantageous for the large quantities of samples research, is evaluating the feed nutritional value aspect widely to use. But, Nylon Bag Technique because is experimented the material, in the operation sequence, the experimental animal the environment and so many factors influences creates the determination result many not determinism. This article summarizes Nylon Bag Technique to evaluate monogastric animal feed nutritional value and the influence determination result factor aspect research progress.
　　Key words: Nylon Bag Technique;Nutritional value;feed
　　飼料營(yíng)養(yǎng)價(jià)值的準(zhǔn)確評(píng)價(jià)是研究動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)需要和進(jìn)行日糧配方的前提和基礎(chǔ)。在評(píng)定飼料營(yíng)養(yǎng)價(jià)值的方法中，尼龍袋法(Nylon Bag Technique)和動(dòng)物的消化過(guò)程緊密結(jié)合，其測(cè)定結(jié)果同體內(nèi)試驗(yàn)具有良好的可比性，且重復(fù)性好、操作相對(duì)簡(jiǎn)單，便于大批樣品的研究，在評(píng)定飼料營(yíng)養(yǎng)價(jià)值(特別是蛋白質(zhì)和氨基酸營(yíng)養(yǎng))方面被廣泛采用，Orskov和McDonald等還提議建立尼龍袋法的飼料養(yǎng)分標(biāo)準(zhǔn)數(shù)據(jù)庫(kù)。但是，尼龍袋法由于受試驗(yàn)材料、操作程序、試驗(yàn)動(dòng)物內(nèi)環(huán)境等諸多因素的影響而造成測(cè)定結(jié)果的許多不確定性。本文就尼龍袋技術(shù)在單胃動(dòng)物飼料的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值評(píng)定及影響測(cè)定結(jié)果的因素方面的研究進(jìn)展作一綜述。
　　1　尼龍袋技術(shù)的發(fā)展概況及特點(diǎn)
　　1.1　尼龍袋技術(shù)的發(fā)展概況
　　尼龍袋法作為測(cè)定飼料消化率的一門(mén)技術(shù)已有較長(zhǎng)歷史，早在1938年Quin等發(fā)現(xiàn)用絲做的袋子可部分被降解，而人造纖維則完全不會(huì)被降解，于是后來(lái)將材料換成了人造纖維。1972年，Schoeman等利用尼龍袋法評(píng)定了甲醛對(duì)瘤胃中蛋白質(zhì)的降解作用。1977年，Mehrez 和Orskov 建議用尼龍袋法作為常規(guī)方法來(lái)測(cè)定基礎(chǔ)日糧及蛋白質(zhì)補(bǔ)充料的降解，他們用多個(gè)袋子，分別發(fā)酵不同的時(shí)間，而后取出，這樣可以對(duì)降解進(jìn)行數(shù)量描述。在國(guó)內(nèi)，馮仰廉首先用尼龍袋法測(cè)定了幾種精料的消失率[1]。
　　尼龍袋法從廣義上可分為體外法和體內(nèi)法兩種。體外法是將裝有被測(cè)樣品的尼龍袋在體外一定條件(消化酶、緩沖液等)下進(jìn)行培養(yǎng)，以考察袋內(nèi)物質(zhì)的變化。體內(nèi)法根據(jù)位置的不同，又可分為原位法(in situ)和活動(dòng)尼龍袋法(MNBT)[2]。采用尼龍袋技術(shù)評(píng)價(jià)動(dòng)物對(duì)飼料的利用研究可以追溯到18世紀(jì)，涉及動(dòng)物主要包括豬、牛和羊。根據(jù)研究所采用的方法和手段，將其分為肛門(mén)收樣期、瘺管期和數(shù)學(xué)模型期，其中數(shù)學(xué)模型期的建立是以前兩個(gè)時(shí)期為基礎(chǔ)。
　　1.2　尼龍袋技術(shù)的特點(diǎn)
　　肛門(mén)收樣期主要特點(diǎn)是不用作手術(shù)，直接從糞中收集樣品袋;瘺管期的主要特點(diǎn)是將尼龍袋送入動(dòng)物特定部位，研究袋中養(yǎng)分消失情況;數(shù)學(xué)模型期的主要特點(diǎn)是擬定估測(cè)蛋白質(zhì)動(dòng)態(tài)降解率的方程，從而使靜態(tài)研究轉(zhuǎn)向符合動(dòng)物自身狀況的動(dòng)態(tài)研究。
　　2 尼龍袋技術(shù)評(píng)定單胃動(dòng)物飼料養(yǎng)分利用率
　　2.1　消化率的評(píng)定
　　測(cè)定單胃動(dòng)物飼料養(yǎng)分消化率的傳統(tǒng)方法包括全收糞法和指示劑法，兩種方法均耗費(fèi)耗時(shí)量大。為了克服傳統(tǒng)方法的不足，在前人的基礎(chǔ)上將尼龍袋技術(shù)運(yùn)用于單胃動(dòng)物，創(chuàng)建出活動(dòng)尼龍袋技術(shù)(Moble nylon bag technique,MNBT)，并建立了MNBT的操作程序[3]。
　　其操作程序?yàn)椋河镁W(wǎng)孔孔徑為48μm的單纖絲尼龍制作25×40mm2小袋，將1g粉碎粒度為1.0mm待測(cè)飼料樣品裝入尼龍袋，置于盛有500ml的0.01N鹽酸和胃蛋白酶溶液的燒杯中，將燒杯于37℃水浴振蕩2.5小時(shí),溶液pH為2.0，胃蛋白酶含量為377.4 IU/L。將尼龍袋從燒杯中取出，通過(guò)十二指腸瘺管引入體重為40kg左右的健康豬體內(nèi)，待尼龍袋通過(guò)消化道后從糞中回收尼龍袋，用干紙巾輕輕揩去袋子表面糞便，冷凍干燥，測(cè)定袋內(nèi)剩余物質(zhì)中待測(cè)養(yǎng)分的含量，計(jì)算待測(cè)飼料養(yǎng)分消化率[3]。
　　采用MNBT和全收糞法分別測(cè)定飼料GE消化率比較。Sauer等用MNBT和全收糞法比較測(cè)定了3個(gè)品種大麥的GE消化率，兩種方法測(cè)定結(jié)果非常接近。而De Lange對(duì)燕麥、大麥、小麥和玉米的測(cè)定結(jié)果表明，用MNBT所測(cè)得的GE消化率比全收糞法低12個(gè)百分點(diǎn)(P<0.01),其因可能是MNBT缺乏唾液淀粉酶的消化有關(guān)。Darroch等采用MNBT，研究了生長(zhǎng)豬不同麥殼含量對(duì)大麥能量消化率的影響，結(jié)果表明隨著被測(cè)樣品中麥殼含量的提高，其DE呈線(xiàn)性下降(DE=251.956-9.407GE-0.114Hulls,n=5,r2=0.97)。預(yù)測(cè)總能消化率(ED)和DE模型分別為：ED(%)=265.168-9.677GE-0.334ADF(r2=0.97);DE(MJ/kg)=30.91-0.810GE-0.057ADF(r2=0.98)或DE(MJ/kg)=51.60-1.867GE-0.036NDF(r2=0.97)。Beames等采用MNBT建立了用大鼠能量表觀(guān)消化率(AED)預(yù)測(cè)豬AED的回歸方程，其回歸系數(shù)r2=0.97[4]。近幾年來(lái)譙仕彥等比較了MNBT和指示劑法測(cè)定GE消化率的結(jié)果，表明前者僅比后者高1%[5]。綜述不同研究結(jié)果可以看出，MNBT與傳統(tǒng)方法所測(cè)定的GE消化率之間高度相關(guān)，可通過(guò)建立回歸方程對(duì)MNBT法的測(cè)定值進(jìn)行校正。
　　2.2 蛋白質(zhì)、氨基酸消化率評(píng)定
　　采用MNBT評(píng)定豬飼料蛋白質(zhì)、氨基酸消化率的嘗試，近幾年測(cè)定結(jié)果都不很理想，主要是某些飼料的測(cè)定結(jié)果與回腸末端收糜法存在較大差異。Sauer將待測(cè)樣品在胃內(nèi)或體外培養(yǎng)(2.5h)后，再經(jīng)十二指腸瘺管放入體內(nèi)，考察豬對(duì)豆粕(SBM)、肉骨粉(MBM)蛋白質(zhì)小腸消化率的影響，并與常規(guī)法比較，結(jié)果表明胃內(nèi)培養(yǎng)后用MNBT所測(cè)得的結(jié)果比常規(guī)法明顯偏低;而體外培養(yǎng)與常規(guī)法所得結(jié)果基本一致[6]。Yin等比較了體外不同培養(yǎng)時(shí)間(2.5h，4.0h)的玉米、稻谷、魚(yú)粉的MNBT和回腸末端食糜法測(cè)定CP表觀(guān)消化率(DCP)的差異，結(jié)果發(fā)現(xiàn)除魚(yú)粉外，隨著培養(yǎng)時(shí)間延長(zhǎng)，MNBT的DCP提高，而回腸末端食糜法測(cè)定的DCP影響不顯著。綜述前人研究結(jié)果表明，不同飼料(原料)CP表觀(guān)消化率MNBT(Y)和全收糞法(X)測(cè)定結(jié)果高度相關(guān)(Y=5.54±0.97X r2=0.925),MNBT能很好地估測(cè)蛋白質(zhì)補(bǔ)充料和豆科籽實(shí)等高蛋白質(zhì)含量飼料的CP消化率，但對(duì)于谷物籽實(shí)及其副產(chǎn)品，兩種方法測(cè)定結(jié)果存在較大差異(7%～11%)[7]。造成這種差異的原因，一方面可能與尼龍袋受內(nèi)源影響或外源污染有關(guān);另一方面由于尼龍袋難以通過(guò)胃的幽門(mén)部，采用MNBT測(cè)定時(shí)必須分胃和小腸消化兩個(gè)階段，而前一階段的消化不可能完全模擬自然條件下胃的消化過(guò)程。同時(shí)，日糧中纖維素水平對(duì)測(cè)定結(jié)果有影響，當(dāng)飼料無(wú)氮浸出物大于55%時(shí),MNBT和全收糞法測(cè)定結(jié)果差異顯著[8]。
　　采用MNBT分別從糞和(或)回腸末端取袋測(cè)定飼料氨基酸消化率。飼料顆粒大小顯著影響MNBT測(cè)定的氨基酸消化率結(jié)果。顆粒越小，消化率越高。這可能與袋中待測(cè)飼料缺乏物理消化有關(guān)。采用MNBT測(cè)定了玉米、大麥、菜粕、豆粕、棉粕和3種混合日糧的氨基酸回腸表觀(guān)消化率(AIDAA),并與回—直腸吻合術(shù)(IRAT)的AIDAA結(jié)果進(jìn)行比較，發(fā)現(xiàn)二者之間存在較強(qiáng)的相關(guān)關(guān)系(r2=0.5～0.90)(見(jiàn)表1)[9]。
　　研究結(jié)果表明，MNBT是一種測(cè)定AIDAA非常有希望的方法，克服了回腸食糜收集過(guò)程中需要大量人力、物力、財(cái)力的缺點(diǎn)[10]。MNBT只要尼龍袋的孔徑、胃的預(yù)消化和洗滌等方面實(shí)行標(biāo)準(zhǔn)化，對(duì)營(yíng)養(yǎng)研究領(lǐng)域特別是飼料蛋白質(zhì)氨基酸的評(píng)定將產(chǎn)生積極的意義。
　　2.3 飼料粗纖維營(yíng)養(yǎng)價(jià)值的評(píng)定
　　采用MNBT可以較容易的評(píng)定日糧纖維在消化道各部位的降解情況，同時(shí)還可以測(cè)定纖維組分對(duì)其它養(yǎng)分利用率的影響。Robertson等曾用MNBT測(cè)定了高低兩種戊糖含量的飼料(谷糠和蕪菁)在豬盲腸中的消化率，結(jié)果表明蕪菁中的纖維幾乎可以全部被降解，而谷糠中的纖維在盲腸中很難降解。蕪菁中木糖的降解率要比谷糠中的木糖降解率低。采用常規(guī)法和MNBT，比較細(xì)胞壁成分對(duì)其它養(yǎng)分表觀(guān)消化率的影響，結(jié)果表明添加同樣的日糧纖維，常規(guī)法測(cè)定的纖維對(duì)日糧能量和蛋白質(zhì)表觀(guān)消化率的影響結(jié)果要比MNBT小。因此常規(guī)法測(cè)定的單一飼料細(xì)胞壁成分對(duì)其它養(yǎng)分消化率影響的結(jié)果不能代表全價(jià)日糧的情況[11]。飼料中的粗纖維在MNBT法和常規(guī)法測(cè)定過(guò)程中起著兩種不同的作用，在MNBT法中，尼龍袋中的粗纖維具有與海綿相類(lèi)似的作用，可以從環(huán)境中吸收大量的內(nèi)源代謝物，從而導(dǎo)致飼料表觀(guān)消化率偏低。在常規(guī)法中，飼料中的粗纖維可加速腸道上皮細(xì)胞的脫落，也可以導(dǎo)致表觀(guān)消化率偏低。兩種方法所測(cè)結(jié)果的差異可以通過(guò)減少尼龍袋中的樣品量加以適當(dāng)克服[12]。
　　表1 MNBT(X)法與IRAT(Y)法所測(cè)AIDAA的回歸關(guān)系[9]

項(xiàng)目	截距	斜率	r2	n
Thr	-7.65	1.06	0.79 ②	9
Val	8.24	0.89	0.81 ②	9
Met	32.5	0.58	0.66 ②	9
Ileu	33.6	0.56	0.67 ②	9
Leu	15.6	0.80	0.70 ②	9
Phe	9.48	0.88	0.66 ②	9
His	19.7	0.75	0.50 ①	9
Arg	-12.5	1.15	0.90 ②	9
Asp	12.4	0.82	0.59 ①	9
Ser	7.70	0.90	0.78 ②	9
Glu	14.1	0.83	0.76 ①	9
Gly	16.6	0.77	0.76 ②	9
Ala	28.8	0.61	0.64 ②	9
Pro	15.6	0.87	0.64 ②	9
Tyr	-21.6	1.22	0.78 ②	9

　　注：①P<0.05 ; ②P<0.01
　　2.4 MNBT的影響因素及改進(jìn)措施
　　影響尼龍袋法的因素較多，如孔徑大小、基礎(chǔ)日糧、待測(cè)樣品、洗滌程序、微生物污染等同樣影響MNBT的測(cè)定結(jié)果。但是，由于單胃動(dòng)物和反芻動(dòng)物消化生理上存在的明顯差異，采用MNBT時(shí)，選擇恰當(dāng)?shù)膮?shù)對(duì)保證測(cè)定結(jié)果的準(zhǔn)確性和可比性相當(dāng)重要。需要特別指出的是由于尼龍袋無(wú)法通過(guò)豬的幽門(mén)部位，因此，MNBT必須有模擬胃的預(yù)消化過(guò)程。Cherian等對(duì)尼龍袋體外孵化的條件進(jìn)行了系統(tǒng)研究，認(rèn)為pH為2.0預(yù)消化4h，酶活377IU/l，樣品0.5g時(shí)得到的結(jié)果與常規(guī)法最為接近[13]。研究表明除了魚(yú)粉外，預(yù)處理2.5h和4h對(duì)多數(shù)飼料的消化率沒(méi)有影響，但為了保險(xiǎn)起見(jiàn)仍推薦將所有飼料預(yù)處理時(shí)間定為4h[5]。
　　尼龍袋的回收方法也是影響測(cè)定結(jié)果的重要因素之一。通常方法是將一定時(shí)間內(nèi)排出的尼龍袋從糞便中分離出來(lái)，棄去受尿液污染和破損的尼龍袋，并盡量去除袋外的污物，經(jīng)冷凍干燥后，切開(kāi)尼龍袋，回收其中的消化殘?jiān)M(jìn)行分析。為了克服回收過(guò)程中糞、尿?qū)Υ奈廴?，譙仕彥等提出改進(jìn)的MNBT法測(cè)定的DM、GE以及CP的消化率與指示劑法的測(cè)定結(jié)果相當(dāng)一致。MNBT法僅將DM消化率低估了1%，GE消化率高估了1%[8]。
　　3　尼龍袋法評(píng)定單胃動(dòng)物飼料營(yíng)養(yǎng)價(jià)值的優(yōu)缺點(diǎn)
　　3.1 尼龍袋法的優(yōu)點(diǎn)
　　尼龍袋技術(shù)將待測(cè)飼料和動(dòng)物體內(nèi)環(huán)境緊密結(jié)合，其所得的結(jié)果和體內(nèi)法具有很好的可比性，具有測(cè)定速度快、所需樣品小、費(fèi)用低、可操作性強(qiáng)等特點(diǎn)。
　　用于豬飼料養(yǎng)分消化率測(cè)定的MNBT是一種體內(nèi)法和體外法相結(jié)合的新方法，研究結(jié)果表明，用它來(lái)估測(cè)飼料DM、GE及蛋白質(zhì)消化率，其結(jié)果與常規(guī)法相當(dāng)一致;也是估測(cè)飼料氨基酸消化率最有希望的方法，并可以克服某些單一飼料適口性差所帶來(lái)的測(cè)定困難[14]。
　　3.2 尼龍袋法的缺點(diǎn)
　　尼龍袋法能有效估測(cè)飼糧的消失速度以及潛在的降解率，但是其缺點(diǎn)為:一次只能測(cè)定少量樣本，而且需要至少3頭瘺管動(dòng)物來(lái)消除動(dòng)物間的個(gè)體差異。因此,導(dǎo)致該方法不適合在實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行大量樣本的常規(guī)分析;另外，應(yīng)用該技術(shù)時(shí)，消化初期階段樣本的流失以及微生物對(duì)品質(zhì)不同的粗飼料的附著情況會(huì)使試驗(yàn)結(jié)果失真。通過(guò)對(duì)尼龍袋法和兩步法的比較，發(fā)現(xiàn)前者會(huì)高估飼料消化率[15] 。所以雖然尼龍袋法目前已被廣泛應(yīng)用, 但仍有待改進(jìn)。
　　4 尼龍袋法的研究前景
　　尼龍袋法在評(píng)定飼料營(yíng)養(yǎng)價(jià)值時(shí)，其操作過(guò)程受基礎(chǔ)日糧、尼龍袋孔徑大小、操作程序以及微生物等因素的影響，只有在對(duì)這些影響因素深入了解并加以控制時(shí)，才能使該方法得以合理利用。建立和完善規(guī)范化、標(biāo)準(zhǔn)化的操作程序(特別是豬飼料養(yǎng)分評(píng)定)對(duì)提高不同實(shí)驗(yàn)室之間所測(cè)結(jié)果的可比性是非常必要的。
　　尼龍袋法用于單胃動(dòng)物飼料養(yǎng)分生物學(xué)效價(jià)的評(píng)定中，需探索確立單胃動(dòng)物標(biāo)準(zhǔn)化測(cè)定程序;瞬間培養(yǎng)樣品微粒損失所造成的誤差;以及對(duì)高蛋白含量樣品的評(píng)定問(wèn)題(同標(biāo)準(zhǔn)化的碳水化合物相結(jié)合進(jìn)行測(cè)定);另外，尼龍袋法用于飼料除干物質(zhì)、蛋白質(zhì)、纖維外其它養(yǎng)分(如礦物質(zhì)、維生素)效價(jià)的評(píng)定方面作進(jìn)一步的探討和深入研究[3]。
　　[參 考 文 獻(xiàn)]
　　[1] 方熱軍，王康寧，印遇龍，尼龍袋技術(shù)評(píng)定飼料營(yíng)養(yǎng)價(jià)值研究進(jìn)展。飼料工業(yè)。2003(12)：47-52。
　　[2] 鐘華宜,印遇龍等，回直腸吻合豬十二指腸活動(dòng)尼龍袋測(cè)定飼料回腸消化率初探。動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)報(bào)。2000(4)：8～13。
　　[3] 譙仕彥，李德發(fā)，P.A.Thacker，活動(dòng)尼龍袋技術(shù)測(cè)定豬飼料養(yǎng)分消化率的方法學(xué)改進(jìn)。動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)報(bào)2002(1)：13～18。
　　[4] 徐紅蕊，趙國(guó)琦等，尼龍袋法評(píng)價(jià)啤酒糟和麥芽根發(fā)酵飼料。當(dāng)代畜牧。2005(8)：25-26。
　　[5] 鐘華宜。測(cè)定豬飼料氨基酸利用率的體外法研究進(jìn)展。中國(guó)畜牧雜志。2004(2)：39-41。
　　[6] 李杰，李秋玫等，秸稈生物處理技術(shù)研究(五)—尼龍袋法測(cè)定粗飼料養(yǎng)分瘤胃48h的消失率。黑龍江畜牧獸醫(yī)。2000(4)：17～18。
　　[7] de Lange C F ,W C Sauer ,L A den Hartog ,J Huisman. 2001. Methodological studies with the mobile nylon bag technique in pigs[J] . Livest . Prod . Sci . ,29 :213-225.
　　[8] Sauer W C , den Hartog L A , Huisman J , van Leeuwen P , de Lange C F M. 1999. The evaluation of the mobile nylon bag technique for determining the apparent protein digestibility in a wide variety of feedstuffs for pigs[J]. J Anim . Sci . ,67 :432-440.
　　[9] Wusheng Yin, Emmanuel O. Akala and Robert E. Taylor.2007. Growth performance and nitrogen metabolism in weaned pigs fed diets containing different sources of starch[J]. Livest .Prod .Sci. ,15 :73-76.
　　[10] Cor J. M. Arts, Piet van Leeuwen .1997. In vitro binding of estrogens by dietary fiber and the in vivo apparent digestibility tested in pigs[J].Livest .Prod .Sci . ,5:621-628.
　　[11] C. S. Darroch, F. X. Aherne, J. Helm, W. C. Sauer and S. Jaikaran.1998. Effects of dietary level of barley hulls and fibre type on protein and energy digestibilities of Condor hulless barley in growing swine[J]. Anim . Feed Sci .Technol . ,9:173-182.
　　[12] R. J. Dewhurst, D. Hepper and A. J. F. Webster.1995. Comparison of in sacco and in vitro techniques for estimating the rate and extent of rumen fermentation of a range of dietary ingredients[J]. Anim . Feed Sci .Technol . ,2:211-229.
　　[13] B. Mupeta, M. R. Weisbjerg, T. Hvelplund and J. Madsen.1997. Digestibility of amino acids in protein rich tropical feeds for ruminants estimated with the mobile bag technique[J]. Anim . Feed Sci .Technol . ,9:271-280.
　　[14] Han M S ,Froset h J A.2003.The use of a mobile nylon bag technique wit h dual-cannulated pigs in feed digestibility studies[J].J A nim.Sci.,71(Supplement 1):157.
　　[15] Young L G, A GLow , W H Close. 1991. Digestion and metabolism techniques in pigs[A]. In :E R Miller ,D E Ullrey and A J Lewis (Eds).Swine Nutrition[C].But terworth-Heinemann,Boston ,Mass ,P623-63.

donghaijun2009

好文章，收藏了。