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光合細菌培養(yǎng)基配方

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發(fā)表于 2010-10-13 09:04:52 | 只看該作者 回帖獎勵 |倒序瀏覽 |閱讀模式
  光合細菌培養(yǎng)基配方
  光合細菌是兼性厭氧的,不同的光合細菌用的培養(yǎng)基不一樣我現(xiàn)在就在做關于光合細菌的問題,這幾中細菌都是常見的細菌,培養(yǎng)基在許多微生物上后面都有,光合細菌的富集培養(yǎng)基是:
  NH4Cl0.1g NaHCO3 0.1g KH2PO4 0.02g CH3COONa 0.1-0.5g MgSO4.7HO2 0.02g
  NaCl0.05-0.2g 三生長因子1ml 微量元素溶液1ml 蒸餾水97ml PH7.0
  生長培養(yǎng)基加氮源(谷氨酸鈉)和碳源(乙酸.丙酸.丁酸鹽等)及可.其他菌的分離只要選擇不同的培養(yǎng)基就可以選擇分離啊
  光合細菌富集純化詳見網(wǎng)易網(wǎng)盤
  光合細菌培養(yǎng)基配方
  氯化氨1克,磷酸氫二鉀0.5克,氯化鎂0.2克,氯化鈉2克,酵母膏0.1克,水900毫升。
  各成份溶解后15磅滅菌20分鐘,然后無菌的加入過濾的碳酸氫鈉5.0克/50毫升水;50毫升過濾的乙醇。用過濾的0.1N磷酸調(diào)PH=7.0即可。
  響應面設計法優(yōu)化光合細菌培養(yǎng)基配方。培養(yǎng)基成分中醋酸鈉和蛋白胨對于光合細菌的生長影響最為顯著,最優(yōu)培養(yǎng)基配方為:醋酸鈉1.145g/L、蛋白胨0.055g/L、碳酸氫鈉0.6g/L、硫代硫酸鈉0.4g/L、氯化鈉0.3g/L、硫酸鎂0.1g/L、磷酸二氫鉀0.05g/L。在此條件下,光合細菌生長最為良好,經(jīng)過5d培養(yǎng)以后,培養(yǎng)液OD600可以達到0.5以上
  光合細菌(含生產(chǎn)工藝)
  優(yōu)良的光合細菌菌種的外觀質(zhì)量是啥樣?
  一般優(yōu)良的光合細菌菌種和產(chǎn)品的外觀質(zhì)量有以下幾點:
  1、外觀上看比較均勻,基本無上下分層。 相反,市場上有許多光合細菌是上下分層的,包括我中心初期的產(chǎn)品也是這樣,上層比較清淡,下層則比較深厚,上層顏色淺,下層顏色深,最底層可能還會有一層黑黑的沉淀。
  而優(yōu)秀的光合細菌菌種和產(chǎn)品,上下都是比較均勻的,沒有較明顯的分層,顏色比較均勻,外觀看起來也悅目。(當然,除了培養(yǎng)基溶解時,會與硬水中的重金屬離子反應產(chǎn)生的絮裝沉淀除外)
  這種上下無分層,顏色均勻,不是靠加懸浮劑,或增稠劑而造成的,而是自然培養(yǎng)出來的,不加任何修飾而成的。少數(shù)地方,由于水質(zhì)的原因,可能會產(chǎn)生稍稍的差別。
  2、沒有粘壁現(xiàn)象。 很多市場上的產(chǎn)品都有粘壁現(xiàn)象,即在容器的壁上形成一層紅紫色的顏色層,就象是油漆一樣,洗不掉,抹不去。這主要是在培養(yǎng)過程中形成的,也有在保存過程中形成的。
  優(yōu)秀的光合細菌菌種和產(chǎn)品,應該是沒有一絲一毫的粘壁現(xiàn)象。所以外觀上看起來質(zhì)量也更好。
  3、顏色的深度比較深。 根據(jù)國家質(zhì)量標準,可以用721分光光度計,測量A660nm處的吸光值,如果大于1.5,則說明,濃度一般都在30億/毫升以上,好的光合細菌菌種和產(chǎn)品都在1.5以上。
  4、顏色鮮艷無雜色。 優(yōu)秀的菌種和產(chǎn)品,不僅顏色深,而且,比較鮮艷,沒有雜色,比如是大紅色,血紅色,或是深紫色,看起來是很悅目的,沒有不良的雜色,或是暗暗的顏色。
  5、保存期限長。 可以保存夏天3月以上,冬天6月以上。在期限內(nèi)外觀基本無變化。保持80%以上的活力。
  6、培養(yǎng)周期短,接種量少。 好的菌種,接種量在10--20%即可,我中心推崇20%接種量,培養(yǎng)條件好的,可只用10%接種量,都可以在3--5天內(nèi)培養(yǎng)好(條件是用白熾燈培養(yǎng), 溫度在30--37度),或在7天培養(yǎng)好(條件是用太陽光照培養(yǎng),陽光充足時,僅是白天照射培養(yǎng),液體溫度在30--38度,晚上不培養(yǎng))。
  而市場上很多菌種要50%以上接種量,當然,在有條件情況下,用大接種量是有好處的,在有條件的情況下,我中心也推薦您用30%的接種量,能更穩(wěn)妥,更快地培養(yǎng)成功。
  7、基本不存在雜菌污染 在保證清潔培養(yǎng)的情況下,一般不存在雜菌污染的情況,當然,這也與培養(yǎng)基配方技術有一定關系。
  8、可以無限制地循環(huán)培養(yǎng)下去。 不僅可以無限制地循環(huán)培養(yǎng)下去,而且,性能不變,質(zhì)量不減。當然,這也與培養(yǎng)基配方技術有一定關系。
  小規(guī)模光合細菌燈光培養(yǎng)中用60--100瓦白熾燈較好
  在實驗室用紙箱法培養(yǎng)光合細菌時,要用到白熾燈(注意,不能用日光燈,日光燈的光波不適合培養(yǎng)光合細菌,所以日光燈是沒有用的),以前做的試驗由于是用 500*500*350mm的小紙箱,所以有40瓦的白熾燈就可以維持箱內(nèi)溫度在35℃左右,甚至到40℃,用40瓦的白熾燈培養(yǎng),一般需要5天以上才能 長得非常深紅色。
  后來用到了700*700mm的大紙箱,我們才改用60瓦的白熾燈,發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)的時間可以大大縮短了,而且進入冬季后,紙箱中的溫度只能維持到25℃,我們 發(fā)現(xiàn),即使是在25℃的箱內(nèi)溫度下,也只要培養(yǎng)4天左右就長得非常深紅色了,所以我們分析,可能是60瓦以上的白熾燈的光波更加適合于光合細菌的生長繁 殖,所以我們建議各位用戶,改用60瓦的白熾燈,可以大大提高培養(yǎng)的成功率,和大大縮短培養(yǎng)的時間。
  如果是夏天,若用60瓦的白熾燈太熱,可以在紙箱上戮大量孔洞,用于散熱,維持箱內(nèi)溫度在35度左右。
  光合細菌發(fā)生劑的用法(即光合細菌的生產(chǎn)工藝)
  一、光合細菌生長所需的營養(yǎng)條件 用“光合細菌發(fā)生劑”生產(chǎn)的終端產(chǎn)品:光合細菌液,PSB細胞濃度達到30--100億/毫升,生產(chǎn)成本只要0.30元/公斤,而使 用價值可達到2元/公斤,投入產(chǎn)出比達到1:6--12以上。做成的液體產(chǎn)品,密封保存在通氣干燥處,可保質(zhì)達1年以上。
  二、光合細菌生長所需環(huán)境條件 有了營養(yǎng)全面的“光合細菌發(fā)生劑”,還必須有一個良好的培養(yǎng)環(huán)境條件,才能生產(chǎn)出優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品出來。PSB所需的環(huán)境條件有以下幾個:
  1:培養(yǎng)介質(zhì),含雜菌較少的清潔淡水。地下水、河水、海水等,硬度低的水更好(如河水),選取水源時,最好先做幾種水源的對比試驗,使用哪里的水源在培養(yǎng)試驗中最先變成紅色(生長良好),就選用哪里的水作為生產(chǎn)用水。自來水取自河水,硬度低,雜菌少,只要菌種能耐漂白粉殺菌劑,用自來水比其它水反而更好更快。您不妨做一次自來水的試驗。 2:酸堿度,PH值在8~8.5為最好,光合細菌的適應PH范圍在6~10之間。
  3:溫度,以28~36℃為最適生長溫度,其適應的生長溫度范圍為15~41℃。
  4:光照強度,以3000~4000勒克斯(LX)為最佳,即每25公斤菌液需要用相當于60瓦左右的白熾燈作光源,而太陽光照為最好且不要成本。宜春專利中心提供光合細菌發(fā)生劑。 三、光合細菌成品的生產(chǎn)
  1、培養(yǎng)液的配制 將購得的我中心的光合細菌發(fā)生劑取一公斤,放入一個干凈的容器中,加入100公斤水,攪拌均勻,直到發(fā)生劑(培養(yǎng)基)溶化為止。若容器不夠大,則可以少配一點。
  注意事項:水源一定要選擇好,含菌量較低的清潔淡水、海水或加粗食鹽的淡水。從經(jīng)濟、實用的角度考慮,地下水(井水)含菌量低,為最佳水源,另外,若當?shù)?自來水含氯較低,也可用,效果很好;清潔的地表水也可使用;含氯量較高的自來水應敞口放置兩三天或調(diào)PH值至偏堿后使用;蒸餾水及純凈水固然很好,但成本 太高,可用于提純菌種。
  選擇容器:少量生產(chǎn)可用透明度較高的白色或透明塑料桶、玻璃容器。大量生產(chǎn)可用水泥池、水泥船,也可臨時開挖土池,墊上雙層塑料膜防漏防渾濁,培養(yǎng)液的深度為30公分最佳。
  2、培養(yǎng)方式有以下三種:
  (1)做小試驗培養(yǎng)的方法
  容器為:1.25升的飲料瓶,即小規(guī)模生產(chǎn)方法,由于飲料瓶的量小,瓶子透明度好,又密封,所以培養(yǎng)環(huán)境好,需要的接種量也少, 比較簡單。
  設備為:光照箱,用一個大的紙箱,放一個40瓦的白熾燈懸掛在箱子的空中(注意防火),紙箱內(nèi)壁四周,堆放著已裝好了培養(yǎng)液并 接了種的飲料瓶,這樣,既達到了保溫到25—40度的效果,又達到了光照的效果。 較大的箱子要用60瓦的白熾燈,一般一個箱子,可 放這種飲料瓶8個以上,即一次可生產(chǎn)約10公斤/箱。 燈泡與瓶子的距離不超過20厘米。夏天,可撤去紙箱,以防溫度過高,春秋秋 天,也要在紙箱四周鉆孔以散熱。
  操作規(guī)程如下:
  配料:培養(yǎng)液為1%濃度的發(fā)生劑溶液,接種量為20%,注意水源必須一干凈衛(wèi)生,最好用地下水,自來水可以試用一下, 第一次做試驗時,要多選擇幾種水源同時做,以確定哪種水源最好,最先轉成紅色的水源最好,可確定為今后的生產(chǎn)用水。
  培養(yǎng):在箱子內(nèi),打開白熾燈,照幾天即可,一般可達到溫度在35度,控制在30--40度之內(nèi),所以要密切注意溫度不要過高,第一次培養(yǎng)可能需要5天以上,一定要注意,每天要搖晃兩次,這很重要,菌種適應了貴地的水源后,一般只需要2天即可長成深紅色。
  培養(yǎng)成熟標準:以培養(yǎng)液長成深紅色為準,這時一般成品的光合細菌濃度可達到30--100億/毫升。 (2)用塑料桶進行大規(guī)模生產(chǎn) 或用培養(yǎng)蝦苗用的塑料袋來做效果更好。一袋20公斤的樣子。
  例如容器選用25公斤裝的大塑料桶,由于條件不如做小試驗的培養(yǎng)方法好,所以接種量要達到至少20%以上的量。即往大塑料桶中加入22.5公斤的配制好的培養(yǎng)液(即1%的培養(yǎng)基溶液),再加入2.5公斤的菌種液,搖勻。
 ?、倮锰柲芘囵B(yǎng): 把上述塑料桶放到太陽底下曬即可,只要注意:夏季氣溫過高,若用太陽作為光照能源,則應采取部分遮陽(用黑色的遮陽塑料網(wǎng)),通風的降溫措施,以防光合細 菌快速老化死亡;冬天則氣溫低,則要采取搭建一個塑料暖棚增溫的方法,把塑料桶放入暖棚內(nèi)曬太陽即可;春秋季則可直接放在太陽底下不用管即可。總之要使之 溫度在25度--36度之間最好。過些日子它自然會長成深紅色的成品。經(jīng)方法即是懶漢培養(yǎng)工藝法, ②利用白熾燈作為光能生產(chǎn):在一個容器內(nèi)懸掛一個白熾燈,容器內(nèi)裝的培養(yǎng)液深度不得大于30公分,燈泡與液面距離不得大于20公分。
  (3)用塑料膜做的池子來大規(guī)模生產(chǎn)
  您還可以這樣利用太陽能大規(guī)模培養(yǎng)(以培養(yǎng)2噸菌液為例):
  選擇陽光充足的地方,開挖一土池(長5米、寬1.8米、深0.4米),有現(xiàn)成的水泥池更好。墊上塑料薄膜,然后再鋪上桶狀塑料薄膜,并將其一端密封,從 另一端加入1.8噸配制好的培養(yǎng)液,和0.2噸的菌種,一共2噸,排盡薄膜中空氣后,再將該端密封。保持適當?shù)臏囟龋烊绻麥囟冗^低,搭建透明塑料薄膜 棚增溫。這樣,幾天后,菌液培養(yǎng)成熟。長成深紅色。
  也可以在室外挖一個土坑,深40厘米,墊上 一層塑料薄膜,再倒入培養(yǎng)液,液面上再蓋一層塑料薄膜,以免與大量空氣接觸,造成污染雜菌,再用太陽照射培養(yǎng)成熟,天氣冷就搭塑料棚升溫。 當然這一套裝置也可放于室內(nèi),用每半平方料一個60瓦白熾燈照射,燈與液面距離小于25厘米,溫度不夠,也要搭一個室內(nèi)塑料棚,棚內(nèi)放一爐火即可保溫到 30度以上。
  四、光合細菌固態(tài)產(chǎn)品的生產(chǎn) 將高濃度PSB菌液用蛭石粉或沸石粉吸附后,陰干或風干粉碎即得粉狀固體PSB產(chǎn)品??砂b出廠,便于運輸和售賣。也更象一個產(chǎn)品了。一般售價可達到2元/公斤以上,光合細菌︰沸石粉=1︰3~4。也可用其它載體來做 干燥吸附劑,如草炭、硅藻土等。
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發(fā)表于 2010-10-13 09:13:39 | 只看該作者
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板凳
發(fā)表于 2010-10-13 09:15:37 | 只看該作者
學習一下
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地毯
發(fā)表于 2010-10-13 09:53:19 | 只看該作者
路過,學習了
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發(fā)表于 2010-10-28 02:06:19 | 只看該作者
這個配方?jīng)]有任何實用之處?。?!借鑒一下還可以
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6
發(fā)表于 2010-10-28 06:36:36 | 只看該作者
路過,學習了
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