實(shí)驗(yàn)室監(jiān)控的主要疾病

湖南九鼎 · 發(fā)表于 2010-11-18 16:02:24

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湖南九鼎科技（集團(tuán)）有限公司陳建華0730-8719310郵編：414000

當(dāng)前豬場(chǎng)所發(fā)疾病復(fù)雜，多呈混合感染、并發(fā)感染、或是繼發(fā)感染狀況，這給臨床的疾病準(zhǔn)確判斷帶來(lái)很大的困難，很多情況下必須要借助實(shí)驗(yàn)室工作。所以說(shuō)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)是豬場(chǎng)疫病防控中的重要一環(huán)。

第一部分、疾病的診斷方式

一、臨診綜合診斷

1、流行病學(xué)診斷

2、臨診診斷

3、病理解剖學(xué)診斷

二、實(shí)驗(yàn)室診斷

1、病理組織學(xué)診斷

2、微生物學(xué)診斷

①病料的采集

②病料涂片、鏡檢

③分離培養(yǎng)和鏡檢

④動(dòng)物接種試驗(yàn)

3、免疫學(xué)診斷

①血清學(xué)試驗(yàn)

②變態(tài)反應(yīng)

4、分子生物學(xué)診斷（基因診斷）

PCR技術(shù)、核酸探針、DNA芯片

科學(xué)的策略是：定期的抗體監(jiān)測(cè)，才是豬病檢測(cè)的重點(diǎn)。只有種豬群的穩(wěn)定才是整個(gè)豬場(chǎng)穩(wěn)定的前提！種豬群疾病的控制是整個(gè)豬場(chǎng)疾病控制的前提和基礎(chǔ)。

第二部分、需要重點(diǎn)監(jiān)控的三種主要傳染病

目前九鼎實(shí)驗(yàn)室能檢測(cè)的三大重點(diǎn)病毒性疾病：

1、豬瘟（SF、HC）

2、偽狂犬（PR）

3、藍(lán)耳?。≒RRS）

同時(shí)還應(yīng)重點(diǎn)關(guān)注與藍(lán)耳病密切相關(guān)聯(lián)的兩個(gè)病毒：

1、圓環(huán)病毒（PCV2）

2、細(xì)小病毒（PPV）

一、豬瘟

豬瘟是一種急性、熱性和高度接觸的病毒性傳染病。其特征為發(fā)病急，高熱稽留和細(xì)小血管壁變性，引起全身泛發(fā)性小點(diǎn)出血，脾梗死。

1、HCV病毒特性

（1）黃病毒科
瘟病毒屬
單股RNA

（2）與牛病毒性腹瀉病毒（BVDV）之間的基因組序列有高度同源性，抗原關(guān)系密切，既有血清學(xué)交叉反應(yīng)，又有交叉保護(hù)作用。

（3）目前仍認(rèn)為豬瘟病毒為單一血清型。

（4）HCV毒力只有強(qiáng)弱之分。

（5）病毒復(fù)制的主要部位是扁桃體。

2、胎盤(pán)傳播

（1）豬瘟病毒能通過(guò)母豬胎盤(pán)屏障而感染胎兒，胚胎期感染病毒后出生的仔豬表面健康，但對(duì)豬瘟疫苗發(fā)生免疫耐受，免疫后不能產(chǎn)生豬瘟病毒抗體，并持續(xù)數(shù)月排出大量的豬瘟病毒。

（2）豬瘟免疫失敗時(shí)有發(fā)生，是由于亞臨床感染豬瘟病毒的懷孕母豬，病毒經(jīng)胎盤(pán)感染胎兒所致，早期感染多發(fā)生流產(chǎn)，中期感染則產(chǎn)弱仔，出生后出血先天性震顫，這些豬可終身帶毒，形成持續(xù)感染，具有免疫耐性，抗體水平低，用這樣的豬留種增加豬瘟的不穩(wěn)定性。

（3）妊娠10天內(nèi)受到豬瘟弱毒感染時(shí)可造成胚胎吸收。

（4）妊娠15~25天之間，發(fā)生畸形。

（5）60天后感染則產(chǎn)出最多的木乃伊胎。

（6）90天感染時(shí)死胎發(fā)生最多。

（7）產(chǎn)前一星期感染不影響胎兒成活，但新生仔豬體內(nèi)可分離到病毒，誘導(dǎo)免疫耐受。

3、特征性的病變

（1）以多發(fā)性出血為特征的敗血癥變化。

（2）淋巴結(jié)水腫、出血，呈大理石樣或紅黑色外觀。

（3）急性：脾臟表面及邊緣出血性梗死。

（4）慢性：回盲瓣口、盲腸、結(jié)腸常有特征性的壞死和潰瘍變化，呈紐扣狀。（纖維素性壞死性腸炎）。

豬瘟血清學(xué)檢測(cè)的目的：

1、母源抗體消長(zhǎng)規(guī)律，確定合適的首免日齡。

2、評(píng)估疫苗免疫效果。

3、定期檢測(cè)，監(jiān)控豬群抵抗力。

4、種豬群的豬瘟凈化。

4、豬瘟的根除凈化

定期以熒光抗體試驗(yàn)等方法逐頭檢查種豬，及時(shí)發(fā)現(xiàn)帶毒豬并立即淘汰，建立新的無(wú)帶毒健康種豬群，培育健康后代，經(jīng)過(guò)多次反復(fù)檢測(cè)淘汰，豬瘟就可以得到凈化。

二、偽狂犬

屬于急性傳染??；新生仔豬表現(xiàn)神經(jīng)癥狀，還可侵害消化系統(tǒng)；成年豬常為隱性感染；妊娠母豬可引起流產(chǎn)、死胎及呼吸道癥狀，無(wú)奇癢；流產(chǎn)多發(fā)生于妊娠中期，感染病毒后短期內(nèi)即流產(chǎn)；懷孕后期感染引起死胎、木乃伊、弱仔。

1、臨診特點(diǎn)

（1）新生仔豬：突然發(fā)病，體溫升高，精神不振，全身發(fā)抖，運(yùn)動(dòng)不協(xié)調(diào)，呈轉(zhuǎn)圈運(yùn)動(dòng)或劃水樣，同時(shí)有嘔吐，腹瀉。

（2）3~4周齡：發(fā)熱，精神萎頓，發(fā)抖，運(yùn)動(dòng)不協(xié)調(diào)，痙攣，嘔吐，腹瀉，極少康復(fù)，耐過(guò)豬常有后遺癥。

（3）成年豬：多數(shù)呈隱性感染，僅表現(xiàn)發(fā)熱，精神差，嘔吐腹瀉，若懷孕母豬可發(fā)生流產(chǎn)。

2、病毒特性

（1）皰疹病毒、線(xiàn)狀雙股DNA。

（2）只有一個(gè)血清型，但不同的分離株毒力有一定差距。

（3）病毒最初定位于扁桃體。在感染的最初24小時(shí)內(nèi)可從頭部神經(jīng)節(jié)、脊髓及腦橋中分離到病毒。

（4）病毒會(huì)發(fā)生基因重組現(xiàn)象。

3、偽狂犬疫苗

（1）與病毒毒力有關(guān)的基因（如胸苷激酶TK、核苷酸還原酶RR、蛋白激酶PK等）基因缺失不影響病毒的復(fù)制。

（2）世界上第一個(gè)獲準(zhǔn)使用的基因缺失苗就是偽狂犬病病毒的TK基因缺失苗，在此基礎(chǔ)上缺失不影響免疫原性的某個(gè)糖蛋白基因（如gE），可進(jìn)一步減低病毒毒力，但不影響病毒的復(fù)制。

（3）利用gE基因缺失的疫苗免疫動(dòng)物，檢測(cè)gE抗體就可區(qū)分野毒感染與疫苗接種動(dòng)物。

（4）目前，TK-/gE-雙基因缺失的疫苗是國(guó)際通用的較理想的疫苗。

（5）豬場(chǎng)要做偽狂犬病的凈化必須要用帶有g(shù)E基因缺失的疫苗。

（6）由于基因缺失疫苗免疫動(dòng)物后不產(chǎn)生針對(duì)缺失蛋白的抗體，而自然感染動(dòng)物則具有該抗體，因此在臨診上可以區(qū)分缺失疫苗免疫的動(dòng)物與野毒感染的動(dòng)物。

注意：一般無(wú)本病豬場(chǎng)禁用疫苗；研究證明，當(dāng)豬同時(shí)接種兩種不同的基因缺失疫苗后，病毒會(huì)發(fā)生基因重組現(xiàn)象，這應(yīng)引起注意；因此在同一個(gè)動(dòng)物體中只準(zhǔn)使用一種基因缺失苗，以避免疫苗毒株間的重組。

狂犬疫苗滴鼻

滴鼻免疫有獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)：

（1）、滴鼻與不受母源抗體干擾。滴鼻免疫走的是粘膜免疫的路子，母源抗體游離于組織液血漿淋巴液中，粘膜表面不存在抗體，這抗體就中和不掉滴進(jìn)去的病毒，不會(huì)影響疫苗發(fā)揮作用。

（2）、滴鼻可以封鎖豬豬感染通路。偽狂犬病毒遵守“病毒占位規(guī)則”，即先到病毒入侵的細(xì)胞，其他病毒“無(wú)權(quán)入侵”，出生當(dāng)天滴鼻，基因缺失苗中的病毒，搶占了仔豬的呼吸道上皮細(xì)胞，隔絕了日后的野毒感染。

（3）、在母源抗體存在的情況下，再實(shí)施滴鼻免疫，不僅是預(yù)防仔豬典型偽狂犬的問(wèn)題，更重要的是凈化偽狂犬的問(wèn)題，減少偽狂犬野毒所引起的各種損失。

（4）、滴鼻免疫，指的是用偽狂犬gE基因缺失苗滴鼻免疫。

（5）、出生當(dāng)天滴，不要非等到第3天。

PRV血清學(xué)檢測(cè)的目的：

（1）、檢測(cè)野毒感染，用于疾病凈化。

（2）、評(píng)估免疫接種。

（3）、目前凈化技術(shù)最為成熟的黃金組合（ PRV-gB和PRV-gI抗體檢測(cè)）。

4、偽狂犬凈化與根除計(jì)劃

利用基因缺失苗進(jìn)行免疫，采取配套的鑒別診斷方法，對(duì)豬群進(jìn)行野毒感染的抗體檢測(cè)和監(jiān)測(cè)，再根據(jù)野毒感染陽(yáng)性率高低，分別制定全群（或部分）淘汰、再引種、高強(qiáng)度免疫、免疫與淘汰凈化方案，培養(yǎng)和建立后備種豬群，在種豬群中逐步凈化偽狂犬，為商品豬場(chǎng)提供健康的種豬。

三、藍(lán)耳病

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豬繁殖與呼吸綜合“征”

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單鏈、不分節(jié)段的正鏈RNA

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高度接觸性傳染病

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寒冷季節(jié)多發(fā)

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往往繼發(fā)細(xì)菌性感染如豬鏈球菌和副豬嗜血桿菌等

1、藍(lán)耳病毒特性

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同一基因型的PRRSV毒株之間存在著較廣泛的變異，有基因突變、缺失和插入現(xiàn)象。

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不同基因型的病毒有重組現(xiàn)象。

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PRRSV毒株之間差異很大，只有很少的交叉反應(yīng)性。

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早期針對(duì)PRRSV的抗體，特別是亞中和水平的PRRSV特異性抗體對(duì)病毒的復(fù)制具有增強(qiáng)效應(yīng)，這種抗體依賴(lài)性增強(qiáng)作用是PRRSV的一個(gè)重要生物學(xué)特性。

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感染豬在若干星期內(nèi)抗體存在的同時(shí)出現(xiàn)病毒血癥。

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高致病性毒株感染可造成不同階段豬的高發(fā)病率和高死亡率。

2、PRRS--豬群分類(lèi)--感染模式/病毒循環(huán)

為什么要進(jìn)行PRRS抗體的檢測(cè)？

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要想控制PRRS，首先要了解畜群的穩(wěn)定狀態(tài)和病毒循環(huán)規(guī)律，才能在必要時(shí)加以干預(yù)。

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豬場(chǎng)可以通過(guò)藍(lán)耳病發(fā)生的臨床表現(xiàn)以及抗體水平的檢測(cè)來(lái)判斷豬場(chǎng)的狀況，采取相適應(yīng)的措施。

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策略性的免疫：最好在病毒感染前4周進(jìn)行。

3、疫苗

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滅活疫苗：安全性高，但免疫效果差，需要多次免疫，適用于母豬和種公豬配種前和每年的常規(guī)免疫。

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活疫苗：免疫效果好，可適用于仔豬和保育豬免疫接種，但存在散毒和毒力返強(qiáng)的危險(xiǎn)。

4、藍(lán)耳與圓環(huán)

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豬圓環(huán)病毒2型已成為豬繁殖與呼吸綜合征病毒共感染的主要病原之一

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由于藍(lán)耳病毒與圓環(huán)病毒等免疫抑制性疾病的相關(guān)聯(lián)性，所以在商品豬藍(lán)耳病活躍的情況下，要想達(dá)到控制藍(lán)耳，除了適時(shí)做好藍(lán)耳病疫苗外，還必須嚴(yán)格控制圓環(huán)病毒病，也就是一定要做好圓環(huán)病毒疫苗。

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美國(guó)大多數(shù)養(yǎng)豬場(chǎng)只做圓環(huán)病毒2型疫苗，少數(shù)豬場(chǎng)做藍(lán)耳病疫苗，美國(guó)凈化了豬瘟和偽狂犬后，采用只免疫圓環(huán)病毒的方法也能很好地控制藍(lán)耳病毒和圓環(huán)病毒導(dǎo)致的疫病。

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藍(lán)耳病疫苗根據(jù)各豬場(chǎng)需要謹(jǐn)慎接種，同時(shí)把重點(diǎn)放在防控圓環(huán)病毒上。與其把防控重點(diǎn)放在難度大變異快的藍(lán)耳病上，不如先控制圓環(huán)病毒。

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當(dāng)前行業(yè)已經(jīng)摸索出各種控制圓環(huán)病毒病的方法，其中接種圓環(huán)病毒疫苗和使用中草藥做預(yù)防保健是實(shí)用有效方法。

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豬克環(huán)（梅里亞）滅活苗
25頭份/瓶、1725元/瓶、69元/頭

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清瘟敗毒散、扶正解毒散、合生素101等

第三部分、相關(guān)聯(lián)的二個(gè)病毒

一、圓環(huán)病毒

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主要特征為體質(zhì)下降、消瘦、貧血、黃疸、生長(zhǎng)發(fā)育不良、腹瀉、呼吸困難、母豬繁殖障礙；腎、脾臟及全身淋巴結(jié)的高度腫大、出血和壞死。

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本病還可導(dǎo)致豬群產(chǎn)生嚴(yán)重的免疫抑制，從而容易導(dǎo)致繼發(fā)或并發(fā)其他傳染病。

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區(qū)分圓環(huán)病毒與圓環(huán)病毒病

1、致病特性

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PCV2感染可引起豬斷奶后多系統(tǒng)衰弱綜合征（PMWS）、皮炎腎病綜合征（PDNS）、母豬繁殖障礙等，此外，還可能與增生性腸炎、壞死性間質(zhì)性肺炎（PNP）、豬呼吸道綜合征（PRDC）、仔豬先天性震顫、增生性壞死性腸炎等有關(guān)。

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一些病原體如豬細(xì)小病毒、豬繁殖與呼吸綜合征病毒、豬多殺性巴氏桿菌、豬肺炎支原體、鏈球菌和副豬嗜血桿菌等與PCV2有協(xié)同致病作用。

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免疫刺激、環(huán)境因素、不同階段的豬混養(yǎng)以及其他應(yīng)激因素也是發(fā)病誘因。

2、診斷

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病毒分離與鑒定

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間接免疫熒光技術(shù)

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免疫組化技術(shù)

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PCR技術(shù)

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ELISA方法主要用于血清中的PCV2抗體，其結(jié)果只能作參考，因豬健康帶毒比例較高。

3、防控

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1、加強(qiáng)飼養(yǎng)管理

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2、免疫預(yù)防

有用于商品豬的疫苗—桿狀病毒表達(dá)PCV2的衣殼蛋白、表達(dá)PCV2衣殼蛋白的PCV1嵌合病毒