關(guān)于羅非魚的資料

澳洲雞肉粉

四川天添生物科技應(yīng)用有限公司
補充天添對羅非魚攝糖能力的影響


摘  要：選用體重約25.0g 羅非魚（Oreochroµis niloticus）240尾，隨機分為4個處理組，每組60尾，設(shè)3個重復(fù)，每個重復(fù)20尾。設(shè)計了2組蛋白含量分別為33%和29%左右的等能商業(yè)飼料為對照組，并在蛋白31%和29%的分別補充1g/kg的“天添”，研究飼料中添加“天添”對羅非魚生長性能、體形和糖代謝酶等的影響。養(yǎng)殖試驗期30天，結(jié)果表明：以生產(chǎn)性能、形體指標、生化指標等為判定依據(jù)，飼料中補充“天添”，在低蛋白高糖日糧中有明顯的促長效果。以丙酮酸激酶等糖代謝指標為判斷依據(jù)發(fā)現(xiàn)，“天添”的添加增強了羅非魚對糖類物質(zhì)的利用效率。
關(guān)鍵詞：“天添” 羅非魚 生長性能 糖代謝

前 言
魚類對糖利用能力是有限的，其利用能力的高低又隨魚的種類而異，一般草食性魚類和雜食性魚類對糖的利用能力較肉食性魚類高。分析其原因，草食性和雜食性魚類淀粉酶活性較高，并且分布在整個腸道；而肉食性魚類淀粉酶活性較低，僅僅在胰臟中可見到淀粉酶。從肝臟糖代謝酶活性看，肉食性魚糖原合成酶活性高，而糖分解酶活性低，因而對吸收的葡萄糖不能有效地利用，形成類似糖尿病的糖代謝。
對于魚類來說，糖具有節(jié)約蛋白質(zhì)的作用，當?shù)鞍踪|(zhì)與糖一起被攝入魚體時，在魚體內(nèi)儲留的氮比單獨攝入蛋白質(zhì)時要多。糖類節(jié)約蛋白質(zhì)的作用可能與葡萄糖是神經(jīng)組織和血細胞的首選氧化底物有關(guān)，而魚飼料中糖的存在可抑制糖異生作用，由此減少氨基酸的氧化消耗。在實際生產(chǎn)中，對于不同的養(yǎng)殖品種，加入合適的糖，最終的目的就是為了使糖盡可能的代替蛋質(zhì)成為能量物質(zhì)，降低蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)化為能量的比率，從而降低飼料成本，以利于魚類的健康和取得更好的經(jīng)濟效益。
本試驗設(shè)計了2種等能，不等氮的基礎(chǔ)飼料。在此前提下，補充一定量的“天添”，通過比較各處理組羅非魚生長性能和糖代謝指標等，初步判斷“天添”是否可以通過提高羅非魚對糖類物質(zhì)的利用從而促進羅非魚的生長，為“天添”在水產(chǎn)飼料中的實際應(yīng)用提供參考。

1 材料與方法
1.1試驗魚及試驗設(shè)計
試驗用羅非魚（O. niloticus）為當年人工繁殖的同一批苗種，購自重慶市銅梁縣溫泉漁場，試驗在西南大學水產(chǎn)系室內(nèi)循環(huán)養(yǎng)殖系統(tǒng)中進行。試驗前暫養(yǎng)1周，每天早、中、晚飼喂對照組飼料3次至飽食。試驗采用的養(yǎng)殖設(shè)施為橢圓形玻璃缸(總體積0.4m3，水體體積0.25 m3)。循環(huán)流水系統(tǒng)，曝氣自來水，進水速率大約為0.8 L/min。
試驗開始前停飼24 h。選擇體重相近(25 g左右)、體格健壯的幼魚240尾，隨機分配于12個養(yǎng)殖缸（4個處理組，每個處理組3個重復(fù)，每重復(fù)20尾），其中處理組1對照組，處理組2、3、4為試驗組，“天添”添加量均為1 g/kg（見表1），其中組1和組2的基礎(chǔ)日糧一致，組3和組4的基礎(chǔ)日糧一致。本試驗所使用的“天添”由四川天添生物科技應(yīng)用有限公司提供；使用時根據(jù)添加量用逐組稀釋的方法均勻混合于基礎(chǔ)飼料中。每天早、中、晚投喂3次，至飽食，投喂結(jié)束后30 min，吸出池內(nèi)殘餌及糞便。試驗共進行30d，試驗期間水溫25.0±1.0℃，pH7.5±0.5，溶氧≥5mg/L，氨氮<0.2mg/L，余氯<0.1mg/L。
表1  試驗設(shè)計
組    別        1        2        3        4
飼料蛋白含量        33        33        29        29
“天添”
（g/kg飼料）        0        1        0        1

1.2 試驗飼料
配制飼料前，飼料原料均經(jīng)粉碎機粉碎并全部過60目篩，制成直徑為1.5mm左右的顆粒飼料，在35℃鼓風干燥箱內(nèi)干燥24 h，置冰箱0℃保存。具體配方組成和營養(yǎng)成分分析見表2。
1.3 檢測指標及分析方法
1.3.1 生長速度
以鮮重的羅非魚體重變化、增重率和特定生長率等表示生長速度。增重率(%)＝( Wt-W0) / W0×100%；特定生長率(%/d)＝[(LnW t-LnWo) / d]×100%，W0和Wt分別表示養(yǎng)殖開始和結(jié)束時的羅非魚體重（g）。
1.3.2 飼料利用效率
以餌料系數(shù)和蛋白效率表示，餌料系數(shù)=投喂飼料量/魚體增重量；蛋白效率=( Wt-W0) / F×P%，F(xiàn)指飼料消耗量，P%指飼料蛋白質(zhì)含量。
1.3.3 形體指標
以肥滿度、內(nèi)臟指數(shù)（內(nèi)臟重與體重比）、肝胰臟指數(shù)（肝胰臟重與體重比）等指標對魚體形態(tài)進行評價。其中肥滿度=Wt / L3，L指對應(yīng)體重的魚體長（cm）。
1.3.4糖代謝酶活性等指標測定
1.3.4.1糖代謝酶活性測定
所有肝胰臟樣品解凍后加10倍的4℃緩沖液，冰浴勻漿，制成10%勻漿液。緩沖液參照蔡春芳[3]的方法配制。4℃、4000 r&#8226;min離心10min，取上清液一部分立即用于測定己糖激酶（HK）活性；另一部分上清液繼續(xù)在4℃、12000r&#8226;min-1離心20min，取上清液用于測定丙酮酸激酶（PK）活性，室溫下24h測定完畢。標準蛋白為牛血清白蛋白（購于南京建成生物有限公司）。

表2  羅非魚飼料配方及營養(yǎng)成分表（%）
        配方1        配方2
原料名稱        原料用量        原料用量
魚粉(CP62.5%)        8.00        8.00
大豆粕        22.00        3.80
菜籽粕        17.00        20.00
棉籽粕        17.50        20.00
米  糠        10.00        10.00
小麥麩        14.00        14.00
次  粉        3.00        10.50
面  粉        3.70        9.70
大豆油        1.00        1.00
磷酸二氫鈣        1.50        1.50
淡水魚維生素        0.10        0.10
淡水魚微量        0.50        0.50
氯化膽堿        0.15        0.15
Vc 酯        0.05        0.05
膨潤土        1.50        0.70
營養(yǎng)指標               
粗蛋白        33        28.9
粗脂肪        4.37        4.33
無氮浸出物        34.16        40.2
粗纖維        6.87        7.74
粗灰分        7.8        7.8
鈣        0.8        0.79
總  磷        1.36        1.35
1、預(yù)混料中維生素部分(每kg配合飼料提供（&micro;g））：VA：6000 IU/kg；VD: 2000 IU/kg；VE：50.0；VK：5.0；VB1：15.0；VB2：15.0；VB3：25.0；VB5：30.0；VB6：10.0；VB7：0.2；VB11：3.0；VB12：0.03。
2、預(yù)混料中礦物質(zhì)部分(每kg配合飼料提供（&micro;g））：NaCl：1.0；MgSO4&#8226;7H2O：15；NaH2P04&#8226;2H20：25；KH2PO4：32；FeSO4：2.5；乳酸鈣：3.5；ZnSO4&#8226;7H20：0.353；MnS04&#8226;4H20：0.162；CuSO4&#8226;5H2O：0.031；CoCl2&#8226;6H2O：0.01；KIO3：0.003。
3、Vc磷酸酯中Vc含量為25%。

己糖激酶（HK）活性測定采用G6PDH偶聯(lián)法，參照Tranulis等[4]和Panserat等的方法，但將葡萄糖濃度改為0.5mmol&#8226;L時測定，反應(yīng)時間為5min。酶活性單位定義：在30℃pH8.2下，每克組織蛋白在本反應(yīng)體系中每分鐘生成1mmol&#8226;L 的NADPH （輔酶Ⅱ，煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸）為一個活性單位。丙酮酸激酶（PK）活性測定參照Kirchner等和蔡春芳的方法。酶活性單位定義：在30℃pH7.4下，每克組織蛋白在本反應(yīng)體系中每分鐘將1&micro;mol的PEP（磷酸烯醇式丙酮酸鉀鹽）轉(zhuǎn)變成丙酮酸為一個酶活性單位。
1.3.4.2肝糖原測定
糖原測定采用蒽酮顯色法。A）可溶性糖的提取：在樣品中取0.4g肝，加入8ml三氯乙酸后放入離心機中離心15分鐘（3000轉(zhuǎn)/分），取上清液2ml加入6ml三氯乙酸，再在3000轉(zhuǎn)/分 條件下離心15分鐘，取上清液4ml并加入4ml的乙醇，靜置15分鐘后放入離心機中繼續(xù)離心15分鐘后將離心管小心翼翼的取出不要震蕩，將上清液去掉后的沉淀便為可溶性糖固體。B）顯色測定：將沉淀中加入8ml蒸餾水使之充分溶解后取1ml溶液于管中，并在試管中加入4ml的蒸餾水，將試管中5ml的溶液中取1ml于另外一只試管中，并加入4ml蒸餾水，在2支試管中加入蒽酮試劑（加入量為試管中溶液體積的2倍）。最后放入沸水中煮15分鐘，并流水冷卻，冷卻以后在620nm波長下測定吸光度。C）計算可溶性糖的含量：將測定的吸光度帶入標準曲線的公式中乘以800則為最后的糖含量（乘以800是因為所測的吸光度是溶液稀釋800倍以后的吸光度）。
肝糖原含量（mg.g-1）=（A+0.0021）/ 0.004×800 / 1000 / 0.4 （A為吸光度值）
1.3.5 數(shù)據(jù)分析
采用SPSS11.5統(tǒng)計軟件對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計學分析，先對數(shù)據(jù)作單因素方差分析(ANOVA)，處理間若有顯著差異，再作Duncan’s多重比較，P<0.05表示差異顯著。
2 試驗結(jié)果
2.1 對生長性能的影響
由表3可見，組1和3隨著飼料中蛋白含量的下降，羅非魚的增重率顯著下降，組3的增重率顯著低于其余各組（P<0.05）。低蛋白飼料中補充“天添”后，組4的增重率顯著高于組3（P<0.05），且與組1和2均無顯著性差異（P>0.05）。
特定生長率指標中，隨著飼料中蛋白含量的下降，羅非魚的特定生長率逐漸下降（組1和3），在低蛋白飼料（組3）中補充“天添”后，組4的特定生長率顯著提高（P<0.05），但與組1、2和4無顯著差異（P>0.05）。
飼料轉(zhuǎn)化效率方面各組間沒有顯著差異（P>0.05）。
飼料蛋白降低導(dǎo)致蛋白效率下降，補充一定劑量的“天添”后，蛋白效率有較為明顯的改善，組4的蛋白效率顯著高于組3（P<0.05）。
試驗各組的羅非魚成活率沒有顯著性差異（P>0.05）。






表3 “天添”對羅非魚生產(chǎn)性能的影響         n=3
　        增重率(%)        特定生長率        餌料系數(shù)        蛋白效率(%)        成活率(%)
                (％/d)                       
組1        190.59±5.04a        1.91±0.05a        1.31±0.07a        2.34±0.17ab        100
組2        203.99±4.57a        2.02±0.07a        1.25±0.05a        2.48±0.14a        100
組3        162.57±7.58b        1.74±0.08b        1.38±0.08a        2.15±0.15b        100
組4        187.21±15.14a        1.84±0.11a        1.33±0.11a        2.43±0.14a        100
注：同列數(shù)據(jù)肩標字母相同表示差異不顯著（P>0.05），字母不同表示差異顯著（P<0.05）。除特殊情況外，以下各表同。

2.2對形體指標的影響
水產(chǎn)養(yǎng)殖對飼料質(zhì)量的要求除了對水產(chǎn)動物生長速度和飼料利用率的影響，還對養(yǎng)殖魚體的形態(tài)特征也提出了要求，魚體體形不能太“臃腫”，也不能太瘦長。體形指標可以從魚的肥滿度、內(nèi)臟指數(shù)（內(nèi)臟重與魚體重比）等來進行初步判定。隨著飼料中蛋白含量的下降（組3），羅非魚的肥滿度相對組1顯著下降（P<0.05）。飼料中補充“天添”后，組4羅非魚的肥滿度得到有效改善，與組1和2無顯著差異（P>0.05）。
內(nèi)臟指數(shù)和肝胰臟指數(shù)各組間無顯著差異（P>0.05）。
表4  “天添”對羅非魚的體型的影響  n=3
　        肥滿度        肝胰臟指數(shù)        內(nèi)臟指數(shù)
組1        3.00±0.12a        2.04±0.33a        9.65±0.59a
組2        3.14±0.12a        1.63±0.16a        9.20±0.43a
組3        2.77±0.14b        1.84±0.19a        9.57±1.26a
組4        2.92±0.11ab        2.16±0.42a        9.76±0.77a
2.3 對糖代謝的影響
表5中可以看出，飼料蛋白含量的降低，及“天添”的補充（組4），對肝糖原的含量和肝己糖激酶（HK）的活性無顯著影響（P>0.05）。肝丙酮酸激酶（PK）活性隨飼料中蛋白含量的降低而逐步下降，其中組3的PK活性顯著低于組1和2（P<0.05），補充“天添”（組4）后，PK活性比組1，2，3顯著提高（P<0.05）。
表5  “天添”對羅非魚糖代謝的影響  n=3
組別        肝糖原
mg.g-1        肝己糖激酶(HK)
U.g-1.min-1        肝丙酮酸激酶(PK)
U.g-1.min-1
                       
組1        29.75±1.66a        1.84±0.05a         6.24±0.12a
組2        29.58±0.44a        2.27±0.20a         5.87±0.14a
組3        30.89±1.28a        1.84±0.21a         4.82±0.13b
組4        31.85±0.84a        2.08±0.26a         10.41±0.27b
3 討論
3.1 對生產(chǎn)性能的影響
以增重率、特定生長率、餌料系數(shù)和蛋白效率為判定依據(jù)，飼料蛋白下降后，羅非魚的生產(chǎn)性能比較明顯的下降。補充“天添”（1g/kg）后，其增重率和特定生長率與降低蛋白組有明顯的優(yōu)勢。
3.2 對形體指標的影響
    飼料蛋白的降低導(dǎo)致魚體肥滿度的顯著下降，補充 “天添”后，可以顯著改善魚體的肥滿度。補充“天添”可降低羅非魚內(nèi)臟指數(shù)，但對肝胰臟指數(shù)無影響。
3.3 對糖代謝的影響
補充“天添”后，各試驗組間肝糖原和己糖激酶（HK）活性沒有顯著差異；肝丙酮酸激酶活性因飼料蛋白的降低而快速下降，但補充“天添”后，又顯著上升。HK有包括GK在內(nèi)的四種同工酶，在飼料碳水化合物含量對HK的調(diào)控方面，F(xiàn)uruichi和 Yone 認為魚類在服用葡萄糖后HK活性升高，但后來一些研究者指出不管是改變喂食節(jié)律或者飼料組成，HK的活性都不發(fā)生變化。林小植等用不同水平碳水化合物飼料喂食南方鲇 (Silurus meridionalis Chen) 幼魚后發(fā)現(xiàn)，其HK的活性隨時間變化不明顯；以及在對翹嘴紅鲌的研究中，戈賢平等發(fā)現(xiàn)在日糧等能量的條件下，飼料中的碳水化合物水平對HK沒有顯著影響，這些與Tranulis等、Panserat等在對虹鱒的研究結(jié)果是一致的?？傮w來說，與本試驗的結(jié)果一致，也表明，“天添”沒有通過提高或降低己糖激酶活性來發(fā)揮其功能。
有關(guān)丙酮酸激酶（PK）的研究表明，飼料中碳水化合物含量對魚類PK的活性具有一定的影響，如：Cowey發(fā)現(xiàn)虹鱒肝臟中PK活性隨著飼料中碳水化合物含量的增加有增加趨勢；蔡春芳報道，隨著飼料中碳化合物的增加，青魚肌肉和肝胰臟中PK活性顯著提高，與對照組相比，高碳水化合物組分別提高了28％和6％；Enes等在增加歐洲舌齒鱸日糧中淀粉含量時發(fā)現(xiàn)，其肝臟中PK活性也有增加趨勢，其中對照組和高淀粉組的活性為62.8和84.3 mU/mg 蛋白；在對翹嘴紅鲌的研究中，戈賢平等指出隨著飼料中碳水化合物添加量的增加，其PK活性也有增加趨勢，與無碳水化合物組比較，高碳水化合物組PK活性增加了307.14％。這與本試驗降低蛋白，增加糖類物質(zhì)后，PK活性降低的結(jié)果不一致，但補充 “天添”后，PK活性又得到顯著的增強，似乎又證明的前述觀點，具體原因有待進一步研究證實。
4 小結(jié)
    以生產(chǎn)性能、形體指標等為判定依據(jù)，飼料中補充“天添”有顯著的促長效果；以糖代謝酶活性指標判定，“天添”的添加增強了羅非魚對糖類物質(zhì)的利用效率。

kangyucai

我覺得這樣的試驗沒有意義。

tianruiqi2009

是一個非常新鮮的東東:D:::D::

yyy860615

我們也在做羅非魚實驗，不過是免疫實驗

澳洲雞肉粉

這也是一種探索，因為魚飼料的的餌料系數(shù)雖然坐下來了，但是蛋白質(zhì)的轉(zhuǎn)化率依然很低，約在26－34％之間，