九鼎集團(tuán)養(yǎng)豬服務(wù)中心診斷實(shí)驗(yàn)室簡介

湖南九鼎

湖南九鼎科技（集團(tuán)）有限公司 陳建華0-8719310
郵編：414000

    九鼎集團(tuán)養(yǎng)豬服務(wù)中心診斷實(shí)驗(yàn)室于2010年5月正式成立，這是九鼎企業(yè)向服務(wù)型公司轉(zhuǎn)變的又一重大舉措。為便于更好地為養(yǎng)豬客戶服務(wù)，讓客戶對豬病診斷實(shí)驗(yàn)室工作的內(nèi)容與作用有所了解，現(xiàn)特作如下介紹：

    豬病診斷實(shí)驗(yàn)室總投資200多萬元，擁有當(dāng)前較先進(jìn)的儀器與設(shè)備，采用國家認(rèn)可的美國IDXX公司進(jìn)口的標(biāo)準(zhǔn)試劑盒。實(shí)驗(yàn)室現(xiàn)有員工四名，其中碩士研究生一名，大學(xué)本科三名，且都具有多年的豬場實(shí)踐工作經(jīng)驗(yàn)，不僅能為客戶豬場準(zhǔn)確檢測各項(xiàng)數(shù)據(jù)，還能根據(jù)檢測結(jié)果分析指導(dǎo)，為客戶豬場提供切實(shí)可行的豬場問題解決方案。豬病診斷實(shí)驗(yàn)室工作不僅有集團(tuán)服務(wù)專家團(tuán)隊(duì)作后盾，還有遍布各營銷省區(qū)的二十多位市場服務(wù)經(jīng)理作先鋒，可深入所需客戶豬場現(xiàn)場指導(dǎo)，為客戶真正解決生產(chǎn)實(shí)際中遇到的各種難題。

   實(shí)驗(yàn)室開展的主要項(xiàng)目有：

   1、三大主要病毒性疾病的抗體水平檢測；

   2、常見致病性細(xì)菌的分離培養(yǎng)及藥物敏感試驗(yàn)；

   3、飼料、原料的霉菌毒素檢測及常規(guī)生化指標(biāo)檢測。

一、抗體水平的檢測原理及結(jié)果判斷方法

   豬病診斷實(shí)驗(yàn)室主要針對豬瘟、藍(lán)耳、偽狂犬三大重要的病毒性疾病的抗體水平檢測。

1、豬瘟（CSFV）抗體水平檢測

①、原理：阻斷ELISA，用CSFV抗原包被微量反應(yīng)板，如果被檢樣品中存在CSFV Ab,就會阻斷HRPO-抗CSFV單克隆抗體與抗原包被板的反應(yīng)?？笴SFV單克隆抗體與抗原的結(jié)合可以通過HRPO酶與底物的顯色程度來判定。酶標(biāo)儀記錄在450nm處各樣本OD值。

②、結(jié)果判定：

陰性對照平均值＞0.50，陽性對照阻斷率＞50%，該檢測結(jié)果才有效。阻斷率blocking%=(陰性對照平均值-樣本OD值)/陰性對照平均值×100%。

樣本阻斷率≥40%判定為陽性；

樣本阻斷率≤30%判定為陰性；

樣本阻斷率在30%-40%之間判定為可疑，就應(yīng)該在數(shù)日后采血重測。

阻斷率≥50%代表免疫合格，良種場要求CSFV Ab 陽性率100%，合格率90%。樣本離散度種用豬CV要求＜20，肉豬＜25。

③、豬瘟疫苗種豬正常免3次后抗體水平范圍（參考）：

疫苗種類
阻斷率范圍

普通細(xì)胞苗


45-75

高效細(xì)胞苗/組織苗

55-95

脾淋苗

65-100

結(jié)合實(shí)際免疫所用疫苗種類，樣本平均值要求在參考范圍內(nèi)，高于參考值提示已經(jīng)感染豬瘟，低于參考值提示該種疫苗免疫效果不好。

2、豬藍(lán)耳病毒（PRRSV）抗體水平檢測

    ①、原理：將重組的PRRSV抗原包被在微量反應(yīng)板上，被檢測樣品在包被孔中孵育時(shí)，針對PRRSV的特異性抗體與之形成抗原抗體復(fù)合物，洗去未結(jié)合成分后，加入HRPO標(biāo)二抗，與之前的抗原抗體復(fù)合物結(jié)合，洗去沒有結(jié)合的酶標(biāo)抗體，再加入酶底物和顯色劑，顏色的深淺有存在的抗PRRSV特異性抗體的量決定。

    ②、結(jié)果判定：陽性對照平均值-陰性對照平均值≥0.150，陰性對照平均值≤0.150，試驗(yàn)才成立。S/P值=（樣本OD值-陰性對照平均值）/（陽性對照平均值-陰性對照平均值）

S/P≥0.4該樣本判定為陽性

S/P＜0.4該樣本判定為陰性

③
、豬場PRRSV抗水平要求：

對免疫過PRRSV疫苗的感染群，通常有以下幾種抗體模式：穩(wěn)定種豬群S/P2.0左右，很少大于2.5；良好免疫群S/P0.7-1.8，有些可能大于2.0。

S/P大于2.5提示病毒血癥；

S/P大于3.5提示急性感染。

    良好場要求抗體陽性率100%，S/P值在0.7-2.5的占90%。樣本離散度CV越小越好，樣本平均值要求1.2±0.4范圍內(nèi)。

3、豬偽狂犬（PRV-gB）抗體水平檢測

    ①、原理：通過40倍稀釋的樣品在抗原包被的微孔板上進(jìn)行。初次孵育時(shí)，存在于檢測樣品中的PRV抗體會與酶標(biāo)板上的抗原結(jié)合。然后開始洗滌步驟，向微孔板中加入酶標(biāo)記的抗PRV gB的單克隆抗體，進(jìn)行第二次孵育，在此過程中其與抗原競爭結(jié)合。如果檢測樣品中不存在PRV gB抗體，酶標(biāo)單抗就可以與抗原自由結(jié)合，相反，如果檢測樣品中存在PRV gB抗體，酶標(biāo)單抗與抗原的結(jié)合就會被阻斷。而在此次孵育過后，未結(jié)合的酶標(biāo)單抗就會被沖洗掉，加入底物/顯色劑溶液后，在酶的存在下，底物轉(zhuǎn)變?yōu)橐环N能與顯色劑反應(yīng)產(chǎn)生藍(lán)色的物質(zhì)。使用分光光度計(jì)測量650nm的吸收值A(chǔ)(650)。

    ②、結(jié)果判定：S/N=樣本OD值/陰性對照平均值

S/N＞0.70該樣本被判定為陰性；

S/N≤0.60該樣本被判定為陽性；

S/N介于0.60-0.70該樣本判定為可疑，過一段時(shí)間后重新采血測。

③、良好場要求：

    在豬場應(yīng)用偽狂犬基因工程缺失苗的前提下，測PRV-gB抗體水平可以評估疫苗的免疫效果，良好場要求抗體陽性率90%。

二、常見致病性細(xì)菌的分離培養(yǎng)及藥物敏感試驗(yàn)

（一）、常用的幾種細(xì)菌染色方法：

1、革蘭氏染色法；2、瑞士染色法；3、吉姆薩染色法。

（二）、豬場常見的八種細(xì)菌：

1、豬丹毒；2、鏈球菌；3、巴氏桿菌；4、副豬嗜血桿菌；5、胸膜肺炎放線菌；

6、大腸桿菌；7、沙門氏菌；8、葡萄球菌。

（三）、細(xì)菌分離培養(yǎng)總體步驟：

1、試劑器材的準(zhǔn)備；2、病料的采集；3、病料接種；4、細(xì)菌分離鑒定；5、動(dòng)物致病性試驗(yàn)；6、藥敏試驗(yàn)；7、菌種保存。

（四）、將分離純化的致病菌做藥物敏感試驗(yàn)：

1、豬場要做藥敏試驗(yàn)的原因：(1）不同豬群感染的細(xì)菌不同；(2）同樣的細(xì)菌對藥物的敏感不同；(3）細(xì)菌間的耐藥譜不同；(4）用藥方法不科學(xué)；(5）用藥時(shí)間和劑量不合理。

2、藥物敏感試驗(yàn)的作用：體外試驗(yàn)研究豬群感染細(xì)菌對臨床常用藥物的敏感性，針對性給豬群使用最有效的藥物以及劑量與聯(lián)合用藥，以提高疫病預(yù)防與治療效果，減少藥物浪費(fèi)和細(xì)菌株的耐藥譜的增加。

三、飼料原料的霉菌毒素檢測以及飼料與水質(zhì)的常規(guī)生化指標(biāo)檢測

    本項(xiàng)檢測會與九鼎集團(tuán)飼料檢測中心化驗(yàn)室共同完成，便于客戶采購合格的飼料原材料，采取相應(yīng)的應(yīng)對措施，指導(dǎo)客戶應(yīng)用合理的飼料營養(yǎng)配方。

    當(dāng)前豬價(jià)看好，但流行的疾病錯(cuò)綜復(fù)雜，生豬難養(yǎng)，開展實(shí)驗(yàn)室診斷，獲取最佳的豬場問題解決方案非常必要，建議規(guī)模化豬場，重點(diǎn)大客戶定期采樣送養(yǎng)豬服務(wù)中心診斷實(shí)驗(yàn)室做常規(guī)健康檢查與免疫監(jiān)測，根據(jù)豬場規(guī)模的大小，采集相應(yīng)的樣品數(shù)，及時(shí)送檢，九鼎集團(tuán)將極力為客戶排憂解難。

    九鼎集團(tuán)各區(qū)域?qū)⒁允袌黾夹g(shù)服務(wù)人員為中心，協(xié)同營銷服務(wù)主管充分滿足各類客戶的需求，適時(shí)開展診斷室服務(wù)業(yè)務(wù)，體現(xiàn)九鼎的服務(wù)特色，創(chuàng)造更多的產(chǎn)品附加值。

monkeyb307

不錯(cuò)
對產(chǎn)業(yè)提升有幫助
如何讓老闆肯花錢診斷又是一回事了

playboy

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