植酸酶檢測酶活為什么很低，請高手賜教

wy0351

       我按照國標做的植酸酶測定，但是酶活總是很低，5000U的測出來2000多一點，而且結(jié)果數(shù)據(jù)很不穩(wěn)定，反應(yīng)過程中標準空白和樣品空白的操作是一樣的嗎？都是先加終止液再加底物的嗎？加入底物后的樣品空白是渾濁的，離心后測出的吸光值是負數(shù)，請問這個現(xiàn)象是正常的嗎？拜托高手賜教，感激之至！

lhx

期待檢測過的回答

馬前卒

植酸酶含量的檢測平行性不好！反應(yīng)條件很難控制。

saturnbio

沒親手做過，改天問一下檢測人員。

極限天空

1.樣品先加底物,空白先加終止液.
2.控制好PH值和溫度.時間.
3.國標的檢測方法不是很好用.
4.有的廠家的植酸酶測定結(jié)果不大穩(wěn)定.
5.對檢測人員的要求比較高,

wy0351

您好，我想請問一下有什么方法測植酸酶比較好一點呢。我剛接手這個實驗，以前的人也是按國標做的，我做了幾天發(fā)現(xiàn)國標里好多說的很含糊，而且有的感覺不是很對，例如偏釩酸銨溶液配制那就有誤導的感覺，硝酸不能提前加入的，還有，做標準曲線，前面說的按無機磷的量，而后面給出的公式好像是按濃度來算的。我現(xiàn)在很迷茫，我的樣品空白老是測出負值，不知道原因是什么。我的回歸方程系數(shù)也很低

liyunhuddt

你如果用標準空白調(diào)零的話，樣品空白是負值是正常的，用樣品的OD減去空白算木什么影響。我們做的時候一般用蒸餾水調(diào)零，這樣比較穩(wěn)定。

fm001982

注意底物，有些植酸鈉配置出來有可能使PH發(fā)生變化，需要調(diào)整。

夜飲_客天下

這個問題解決沒有？

361759357

也許不一定是檢測的問題，可能是植酸酶自身存在問題也不一定，本來植酸酶就及其不穩(wěn)定。