一、顯微簡檢測原理 飼料顯微檢測是以動植物形態(tài)學(xué)、組織細(xì)胞學(xué)為基礎(chǔ),將顯微鏡下所見物質(zhì)的形態(tài)特征、物化特點、物理性狀與實際使用的飼料原料應(yīng)有的特征進(jìn)行對比分析一種鑒別方法。 二、飼料顯微檢測所需設(shè)備 體視顯微鏡、生物顯微鏡、離降心機、烘箱、抽濾器、分析天平、分樣篩(10目、20目、30目、40目)、電熱板、載玻片、蓋玻片、探針、鑷子、鏡頭紙、濾紙、漏斗、滴管、燒杯、試管。 三、飼料顯微檢測的基本步驟 1、被檢樣品的檢前處理 取有代表性的分析樣品10~15克,進(jìn)行以下工作: (1)記錄外部特征 將取好的待測樣品平鋪于紙上,仔細(xì)觀察,記錄顏色、粒度、軟硬程度、氣味、霉變、異物等情況。觀察中應(yīng)特別注意細(xì)粉粒,因為摻假、摻雜物往往被分得很細(xì)。 (2)篩分處理 鏡檢之前應(yīng)對樣品進(jìn)行篩分,通常用20目~40目篩子將樣品分成三組,然后觀察。此過程對熟練的檢測人員可以省略。 (3)脫脂 對高脂含量的樣品,脂肪溢于樣品表面,往往粘上許多細(xì)粉,使觀察產(chǎn)生困難。用已醚、四氯化化碳等有機溶劑脫脂,然后烘箱干燥5~15min或室溫干燥后,可使樣品清晰可辨。 2、被檢樣品的體視鏡觀察 將篩分好的各組樣品分別平鋪于紙下或培養(yǎng)皿中,置于體視顯微鏡下,從低倍至高倍進(jìn)行檢查。從上到下,從左到右逐粒觀察,先粗后細(xì),邊檢查過用探針將識別的樣品分類,同時探測各種顆粒的硬度、結(jié)構(gòu)、表面特征,如色澤、形狀等并作記錄。將檢出的結(jié)果與生產(chǎn)廠家出廠記上的成分相對照,即可將摻假、摻雜、污染等質(zhì)量情況作出初步測定。 3、被檢樣品的和物鏡觀察 當(dāng)某種異物摻入較少且磨得很細(xì)時,在體視顯微鏡下很難辨認(rèn),需通過生物鏡進(jìn)行觀察。 (1)樣品處理 生物鏡觀察的樣品,一般采用酸與堿進(jìn)行處理。對于不同的原料,所三酸堿濃度和處理時間也不同,動物類原料多用酸處理,植物類和甲殼類需酸堿處理。對于動物中的單純蛋白,如魚粉、肉骨粉、水解羽毛粉等只需用1.25%的硫酸處理5~15min,面對含角蛋白的樣品,如蹄角粉、皮革粉、生羽毛粉、豬毛等需用50%的硫酸處理,時間也稍長,動物中的甲殼類和動植物中的玉米粉、麩皮、米糠、餅粕類等先用1.25%硫酸再用1.25%的氫氧化鈉處理,時間約10~30min。稻殼粉和花生殼粉等硅質(zhì)化程度高和含纖維較高的樣品需分別用50%硫酸和50%的氫氧化鈉處理,對種種樣品的得理進(jìn)間可根據(jù)經(jīng)驗而定。 處理步驟如下: 過篩(粒大10目,粒小20目)→酸處理(加熱)→過濾→蒸餾水沖洗2~3次→必要時還需堿處理(加熱)→過濾→蒸餾水沖洗2~3次→制作。 (2)制片與觀察 取少量消化好的樣品于載坡片上,加適量載液并將樣品鋪平,力求薄面勻,載液可用1:1:1的蒸餾水、水合氯醛、甘油;也可以用礦物油,單純用蒸餾水也較普遍。 觀察時,應(yīng)注意樣片的每個部位,而且至少要檢查三個樣片后再綜合判斷。 四、常見飼料原料的顯微特征 1、常見植物性飼料原料的顯微特征 (1)谷物類原料 a、玉米及制品 整粒玉米形似牙齒,黃色或白色,主要由玉米皮、胚乳、胚芽三部分組成,胚胎包括精糊層、角質(zhì)淀粉和粉質(zhì)淀粉。 玉米粉碎后各部分特征明顯,體視顯微鏡下玉米表皮薄而半透明,略有光澤不規(guī)則片狀、較硬,其上有較細(xì)的條紋。角質(zhì)淀粉為黃色(白玉米為白色),多邊,有棱,有光澤,較硬;粉質(zhì)淀粉為疏松,不定形顆粒,白色,易破裂,許多粉質(zhì)淀粉顆粒和糊粉層的小粉末常粘于角質(zhì)淀粉顆粒和玉米皮表面,另外還可見漏斗狀帽蓋和質(zhì)輕而薄的紅色片狀穎花。 生物鏡下可見玉米表皮細(xì)胞,長形、壁厚、相互連接排列緊密,如念株狀。角質(zhì)淀粉的淀粉粒為多角形;粉質(zhì)淀粉的淀粉粒為圓形,多成對排列。每個淀粉中央有一個清晰的臍點,臍點中心向外有入射性裂紋。 b小麥及制品 整粒小麥為橢圓形,淺黃色至黃褐色,略有光澤。在其腹面有一條較深的腹溝,背部有許多細(xì)微的波狀皺紋。主要由種皮、胚乳、胚芽三部分組成。 小麥麩皮多為片狀結(jié)構(gòu),其片大小,形狀依制粉程度不同而不同,通??梢苑譃榇笃熎ず托∑熎?。大片麩皮片狀結(jié)構(gòu)大,表面上保留有小麥粒的光澤和細(xì)微橫向縱紋,略有卷曲,麩皮內(nèi)表面附有許多淀粉顆粒。小片殖皮片狀結(jié)構(gòu)小,淀粉含量高。小麥的胚芽扁平,淺黃色,含有油脂,粉碎時易分離出來。 高倍鏡下可見小麥麩皮由多層組成,具有鏈珠狀的細(xì)胞壁,僅一層管狀細(xì)胞外,在管細(xì)胞上整齊地排列一層橫紋細(xì)胞。鏈珠狀的細(xì)胞壁清晰可見。小麥淀粉顆粒較大,直徑達(dá)30~40微米,圓形、有時可見雙凸透鏡狀,沒有明顯的臍點。 c高粱及制品
整粒高梁為卵圓形,端部不尖銳,在胚芽端有一顏色加深的小點,從小點向四周顏色由深至淺,同時有向外的放射狀細(xì)條紋,高粱外觀色彩斑駁,由棕、淺紅棕及黃白等多色混雜,外殼有較強的光澤。
在體視鏡下可見皮層緊緊附在角質(zhì)淀粉上,粉碎物粒度大小參差不齊,呈圓形或不規(guī)則形狀,顏色因品種而異,可為白、紅褐、淡黃等。角質(zhì)淀粉表面粗糙,不透明;粉抽淀粉色白,有光澤,呈粉狀。 在高倍鏡下,高粱種皮和淀粉顆粒的特征在鑒定上尤為重要。其種皮色彩豐富,細(xì)胞內(nèi)充滿了紅色、粉紅和黃色的色素顆粒,淡紅棕色的色素顆粒常占優(yōu)勢。高粱的淀粉顆粒與玉米淀粉顆粒極為相似,也為多邊形,中心有明顯的臍點并向外有放射狀裂紋。 (2)餅粕類原料 a大豆餅粕 大豆餅粕主要由種皮、種臍、子葉組成。 在體視鏡下可見明顯的大塊種皮和種臍,種表面光滑,堅硬且脆,向面卷曲。在20倍放大條件下,種皮外表面可見明顯的凹痕和針狀小孔,內(nèi)表面為白色多也海綿狀組織,種臍明顯,長橢圓形,有棕色、黑色、黃色。(浸出粒中子葉顆粒大小較均勻,形狀不規(guī)則,邊緣鋒利,硬而脆,無光澤不透明,呈奶油色或黃褐色。由豆餅粉碎后的粉碎物中時因擠壓而成團(tuán),近圓形、邊緣渾圓,質(zhì)地粗糙,顏色外深內(nèi)淺。) 高倍鏡下大豆種皮是大豆餅粕的主要鑒定特征。在處理理后的大豆種皮表面可見多個凹陷的小點及向四周呈現(xiàn)輻射狀的裂紋,尤如一朵朵小花,同時還可看見表面的“工”字形細(xì)胞。 b花生餅粕 花生餅粕以碎花生仁為主,但仍不少花生種皮,果皮存在,體視鏡下能找到破碎外殼上的成束纖維脊,或粗糙的網(wǎng)絡(luò)狀纖維,還能看見白色柔軟有光澤的小塊,種非常薄,呈粉紅色,紅色或深紫色,并有紋理,常附著籽仁的碎塊上。 生物鏡下,花生殼上交錯排列的纖維更加明顯,內(nèi)果皮帶有小孔,中呆皮為薄壁組織,種皮的表皮細(xì)胞有四至五個邊的厚壁,壁上有孔,由正面可觀看到細(xì)胞壁上有許多指狀突起物。籽仁的細(xì)胞大,壁多孔,含油脂高。 c棉籽餅粕 棉籽餅粕主要由棉籽仁、少量的棉籽殼、棉纖維構(gòu)成,在體視顯微鏡下,可見棉籽殼和短絨毛粘附在棉籽仁顆粒中,棉纖維中空、扁平、卷曲;棉籽殼為略凹陷的塊狀物,呈孤形彎曲,殼厚、棕色、紅棕色。棉仁碎粒為黃色或黃褐色,含有許多黑色或紅褐色的棉酚色素腺。棉籽壓榨時將棉仁碎片和外殼都壓在一起了,看起來顏色較暗,每一碎片的結(jié)構(gòu)難以看清。 生物鏡下可見棉籽種皮細(xì)胞壁厚,似纖維,帶狀,呈不規(guī)則的彎曲,細(xì)胞空腔較小,多個相鄰的細(xì)胞排列呈花瓣狀。 d菜籽餅粕 在體視鏡下,菜籽餅粕中的種皮仍為主要的鑒定特征。一般為很薄的小塊狀,扁平,單一層,黃褐色至紅棕色,表面有油光澤,可見凹陷刻窩。種皮和籽仁碎片不連在一起,易碎;種皮內(nèi)表面的柔軟的半透明白色薄片附著,子葉為不規(guī)則小碎片,黃色無光澤,質(zhì)脆。 生物鏡下,菜籽餅最典型的特征是種皮上的柵欄細(xì)胞,有褐色色素,為4~5邊形,細(xì)胞壁深褐色,壁厚,有寬大的細(xì)膩內(nèi)腔,其直徑超過細(xì)胞壁寬度,表面觀察,這些柵欄細(xì)胞在形狀,大小上都較近似,相鄰兩細(xì)胞間總以較長的一邊相對排列,細(xì)胞間連接緊密。 e向日葵粕
其中存在著未除凈葵花殼是主要的鑒別特征。向日葵粕為灰白色,殼為白色,其上有黑色條紋,由于殼中含有較高的纖維素、木質(zhì)素,通常較堅韌,呈長條形,斷面也呈鋸齒狀。籽仁的粒度小,開頭不規(guī)則,黃褐色或灰褐,無光澤。高倍鏡下可見種皮表皮細(xì)胞長,有工字形細(xì)胞壁,而且可見雙毛,即兩根從同一細(xì)胞長出。
2、常見動物性原料的顯微特征 a魚粉 一般將魚加壓、蒸煮、干燥粉碎加工而成。多為棕黃色或黃褐色,粉狀或顆粒狀,有烤魚香味。在體視顯微鏡下,魚肉顆粒較大,表面粗糙,用小鑷子觸之有纖維狀破裂,有的魚肌纖維呈短斷片狀。魚骨是魚粉鑒定中的重要依據(jù),多為半透明或不透明的碎片,仔細(xì)觀察可找到魚體各部位的魚骨如魚刺、魚脊、魚頭等。魚眼球為乳白色玻璃狀物,較硬,魚鱗是一種薄平而卷曲的片狀物,半透明,有圓心環(huán)紋。 b蝦殼粉 蝦殼粉是對蝦或小蝦脫水干燥加工而成的,在顯微鏡下的主要特征是觸角、蝦殼及復(fù)眼。蝦觸須以片斷存在。呈長管狀,常有4個環(huán)節(jié)相聯(lián);蝦殼薄而透明。頭部的殼片則厚不透明,殼表面有平等線,中間有橫紋,部分殼有十字形線或玫瑰花形線紋;蝦眼為復(fù)眼,多為皺縮的小片,深紫色或黑色,表面上有橫影線。 c蟹殼粉 蟹殼粉鑒別的主要依據(jù)蟹殼在體視鏡下的特征。蟹殼為無規(guī)則的小的幾丁質(zhì)殼形狀,殼外表多為桔多紅色,而且多孔,有時蟹殼可破裂成薄層,邊緣較卷曲,褐色如麥皮,在蟹殼粉中常可見到的斷裂的蟹螯枝頭部。 d貝殼粉 體視鏡下貝殼粉多為小的顆粒狀物,質(zhì)硬,表面光滑,多為白色至灰色,光澤暗淡,有些顆粒的外表面具有同心或平行的線紋。 e骨粉及肉骨粉 在肉骨粉中的肉的含量一般較少,顆粒具油膩感,淺黃至深褐色,粗糙,可見肌纖維,骨為不定形塊狀,一般較魚骨、禽骨大,邊緣渾圓,灰白色,具有明顯的松質(zhì)骨,不透明。肉骨粉及骨粉中還常有動物毛發(fā),長而卷曲,黑色或白色。 f血粉 噴霧二燥的血粉多為紅色小珠狀,晶亮;滾筒干燥的血粉為邊緣銳利的塊狀,深紅色,厚的地方為黑色,薄的地方為血色,透明,其上可見小血細(xì)胞亮點。 j水解羽毛粉 其多為碎玻璃狀或松香狀的小塊狀。透明易碎,淺灰、黃褐、至黑色,斷裂時常扇狀邊緣。在水解羽毛粉中仍可找到未完全水解的羽毛殘枝。 表3-1 魚粉等級和感觀、物理、化學(xué)指標(biāo) | | | | | | | | | | | 至少98%能通過篩孔為2.8mm的標(biāo)準(zhǔn)篩 | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | |
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